20042005学年第二学期2004级一村一名大学生园艺班 《植物姐织培养技术》期末考试试卷A 一，填空（每空1分，共13分） 1.一个税分化的植物细胞，之所以修够再生成完整的植橡，是因为其具有 2植物组织培养一般过程可分为 3植物组培时，培养温度一般控制在 4组培常用的消毒酒精浓度一般为 点不同外植体大小的一般要求是茎段长为()■，叶片大小为( ）cm,替通茎 尖为()m,微茎尖为( : 6植物组织培养污染从病解茵上分析可分为是( )污染和《)污染。 二，多现遗择（每题2分，共0分） 1.一般组织培养室分为以下几个分案( A配置室R洗涤室C接种室 D.灭菌室 E培养室 E.观察室G. 到化室成到化丽室 2接种家建造时。要求( 人墙度光滑 B,配缓冲间C,面积一般为57r墙量无髓 E安装横拉 门 3用用或HC1调培养基州值的浓度是( A0.1MB.1.0C0.01M 4物体表面可用下列方法消毒天菌《) L灼烧灭菌且高医混热灭首C.紫外线灭菌D熏蒸灭菌配过滤除菌 及用气雾重蒸剂对空问和物体表面进行清毒灭菌时，用量一般为每立方米《) L1-2g且.1-2gC3-4gD.34g 6根据灭菌物体积大小、质电确定高压湿热灭菌时间，一粮要求121℃，灭菌( A10-15minB.20-40minC.50min以上 7.升汞作为灭南剂。其浓度一般为() A1.0%B.0.5C0.1%D.1.5% &母液配制时要求选用() A自来水B.蒸馏水G,无商水D,矿泉水
2004-2005 学年第二学期 2004 级一村一名大学生园艺班 《植物组织培养技术》期末考试试卷 A 一、填空(每空 1 分，共 13 分) 1.一个脱分化的植物细胞，之所以能够再生成完整的植株，是因为其具有 。 2. 植物组织培养一般过程可分为 、 、 、 。 3. 植物组培时，培养温度一般控制在 。 4.组培常用的消毒酒精浓度一般为 。 5.不同外植体大小的一般要求是茎段长为( )cm，叶片大小为( ) cm，普通茎 尖为( ) mm， 微茎尖为( )mm。 6.植物组织培养污染从病原菌上分析可分为是（ ）污染和（ ）污染。 二、多项选择(每题 2 分，共 20 分) 1.一般组织培养室分为以下几个分室( ) A.配置室 B.洗涤室 C.接种室 D.灭菌室 E.培养室 F.观察室 G. 驯化室或驯化棚室 2.接种室建造时，要求( ) A. 墙壁光滑 B.配缓冲间 C.面积一般为 5-7 ㎡ D.墙壁无缝 E.安装横拉 门 3.用 NaOH 或 HCl 调培养基 PH 值的浓度是( ) A.0.1M B.1.0M C.0.01M 4.物体表面可用下列方法消毒灭菌（ ） A.灼烧灭菌 B. 高压湿热灭菌 C. 紫外线灭菌 D. 熏蒸灭菌 E.过滤除菌 5.用气雾熏蒸剂对空间和物体表面进行消毒灭菌时，用量一般为每立方米（ ） A.1～2g B. 1～2mg C.3～4g D. 3～4mg 6.根据灭菌物体积大小、质地确定高压湿热灭菌时间，一般要求 121℃,灭菌( ) A. 10-15 min B. 20-40min C.50 min 以上 7.升汞作为灭菌剂，其浓度一般为( ) A.1.0% B.0.5% C.0.1% D.1.5% 8.母液配制时要求选用（ ） A.自来水 B. 蒸馏水 C.无菌水 D.矿泉水
9.植物姐织培养属于( 》范睛。 礼跑子繁殖且无性繁殖 C.有性繁殖 1(植物组织培养若用蓝紫光理财，则蓝紫光属于光照条件中的《) A光质C,光强D.光州时间 三、名词解释（每题2分，共10分） 1 外植体 2 灭两： 3 脱分化： 4 根变： 5 植物组织培养（广文）： 四、问容题（共35分） 1.立式高压灭菌锅的其体使月方法。(6分) 2简述汁液涂沫法来鉴定植物病毒的具体操作。(？分) 3简述4、I,2-D、IB、江、6-A、ZI,G8种激素的溶解方法。8分) 4.简述试管苗的移载方法。(8分) 反简述微茎尖培养脱毒源理。(6分) 六，论述题（共22分） 1.以制作配方为5+605e/L的暗养基L为例，叙述组培培养基的配制步骤。（大 量元素母液为10×，微量元素母液、铁盐母液，有机物母液均为1的×，激素母液沫度为 1g/1)(10分) 2以茎段（外植体）接种为例，叙述无菌操作过程(12分)
9. 植物组织培养属于( )范畴。 A.孢子繁殖 B.无性繁殖 C. 有性繁殖 10.植物组织培养若用蓝紫光照射，则蓝紫光属于光照条件中的（ ） A.光质 C.光强 D. 光照时间 三、名词解释(每题 2 分，共 10 分) 1. 外植体： 2. 灭菌： 3. 脱分化： 4. 褐变： 5. 植物组织培养（广义）： 四、问答题(共 35 分) 1. 立式高压灭菌锅的具体使用方法。(6 分) 2. 简述汁液涂沫法来鉴定植物病毒的具体操作。(7 分) 3.简述 NAA、IAA、2,4-D、IBA、KT、6-BA、ZT、GA8 种激素的溶解方法。(8 分) 4. 简述试管苗的移栽方法。(8 分) 5. 简述微茎尖培养脱毒原理。(6 分) 六、论述题(共 22 分) 1.以制作配方为 MS+6-BA0.5mg/ L 的培养基 2L 为例，叙述组培培养基的配制步骤。(大 量元素母液为 10×，微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为 100×，激素母液浓度为 1mg/ml)(10 分) 2. 以茎段(外植体)接种为例，叙述无菌操作过程(12 分)
20042006学年第二学期2004级一村一名大学生园艺班 《植物组织培养技术》期末考试试卷A答案 一、填空（每空1分，共13分） 1,一个脱分化的植物细胞，之所以能够再生成完整的植株，是因为其具有朝胞全能 性一 2植物组织培养一舰过程可分为初代格养、胜代格养、生根培养一、里 化移找 3植物组培时，培养温度一般控制在25±2℃一 4.组培常川的消毒酒精浓度一最为0匹一5一 5不同外植体大小的一般要求是茎段长为(1)cn:叶片大小为(05)cm,普通 茎尖为（儿至几十）m,微茎尖为(0.30.5)m. 6植物组织培养污染从病原茵上分析可分为是（细菌》污染和（真商）污染。 二、多项途择（每题2分，共20分） I.一般组织培养室分为以下几个分室(ABCDEF沁) L配置室B洗涤室C接种室D.灭菌室 E培养室 E.观察室G. 到化室或趴化御室 2接种室建造时，要求(AE) A墙壁光滑五.配缓冲间C.面积一般为57置D.墙壁无缝E安装横拉 门 &用或CI调培养基图值的浓度是(B) A.0.1M B.1.OM C.0.01M 4物体表面可用下列方法消毒灭菌(CD) A灼烧灭菌民高压湿热灭商G,紫外线灭南D熏蒸灭南E过滤障菌 &用气雾重蒸剂对空问和物体表面进行清毒灭菌时，用量一般为每立方米(C) A.1~2g B.1~2ng C.3~4g D.3~4ng 6根据灭菌物体积大小、质地确定高压程热灭菌时间。一般要求121℃，灭菌(B) A10-15alnB.20-40mlnG.50ain以上 7.升汞作为灭南剂，其浓度一般为(C) A1.0%且.0.5路C0.1%D.1.5%
2004-2005 学年第二学期 2004 级一村一名大学生园艺班 《植物组织培养技术》期末考试试卷 A 答案 一、填空(每空 1 分，共 13 分) 1.一个脱分化的植物细胞，之所以能够再生成完整的植株，是因为其具有 细胞全能 性 。 2. 植物组织培养一般过程可分为 初代培养 、 继代培养 、 生根培养 、 驯 化移栽 。 3. 植物组培时，培养温度一般控制在 25±2℃ 。 4.组培常用的消毒酒精浓度一般为 70%～75% 。 5.不同外植体大小的一般要求是茎段长为( 1 )cm，叶片大小为( 0.5 ) cm，普通 茎尖为( 几至几十 ) mm， 微茎尖为( 0.3～0.5 )mm。 6.植物组织培养污染从病原菌上分析可分为是（ 细菌 ）污染和（ 真菌 ）污染。 二、多项选择(每题 2 分，共 20 分) 1.一般组织培养室分为以下几个分室( ABCDEFG ) A.配置室 B.洗涤室 C.接种室 D.灭菌室 E.培养室 F.观察室 G. 驯化室或驯化棚室 2.接种室建造时，要求( ABCDE ) A. 墙壁光滑 B.配缓冲间 C.面积一般为 5-7 ㎡ D.墙壁无缝 E.安装横拉 门 3.用 NaOH 或 HCl 调培养基 PH 值的浓度是( B ) A.0.1M B.1.0M C.0.01M 4.物体表面可用下列方法消毒灭菌（ C D ） A.灼烧灭菌 B. 高压湿热灭菌 C. 紫外线灭菌 D. 熏蒸灭菌 E.过滤除菌 5.用气雾熏蒸剂对空间和物体表面进行消毒灭菌时，用量一般为每立方米（ C ） A.1～2g B. 1～2mg C.3～4g D. 3～4mg 6.根据灭菌物体积大小、质地确定高压湿热灭菌时间，一般要求 121℃,灭菌( B ) A. 10-15 min B. 20-40min C.50 min 以上 7.升汞作为灭菌剂，其浓度一般为( C ) A.1.0% B.0.5% C.0.1% D.1.5%
&母液配制时要求选用(B) A自米水B.蒸馏水C,无商水D.矿泉水 身植物组织培养属于(B》范畸。 人微子螭殖B无性繁殖 C有性繁殖 10.植物组织培养若用蓝紫光理射，则蓝紫充属于充愿条件中的《A) A光质C,光强D光盟时间 三、名词解释（每题2分，共10分） 外植体：从活体植物体上分离下米的用于离体培养的那部分无菌细胞、组 织威器官。 2 灭酒：是指采用物理或化学方法杀死物体表面或环境中的一切微生物（包 括细商的芽孢和真商的形子) 3 脱分化：己分化好的细鞋在人工诱导条件下，族夏分生能力，回复到分生 组织状态（即诱导形成愈伤组织》的过程。 根变：是折外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被蠹活，使细胞里的酚 类物质氧化成棕桐色的屋卖物质，不但使培养变成相色，而且外植体最后也变偶而死亡的现 象。 植物组织培养（广义）：在人工控制的条件下，将植物体的任何一部分， 无菌操作接种到培养基上，离体培养直至生成完整植株。 四，同答题（共35分） 1.立式高压灭菌蜗的具体使用方法。6分》 ①接通电源，没置灭菌温度和灭陶时间：121一123℃，20一30mi。(1分》 ②住外锅加水至高水位，另外再多加1L。(1分) ③往内锅故入特灭商物品，拧紧锅盖，关闭上排气阀。(1分) ④灭商开时，把下排气旋细旋至最大(3档与4档之间)，当温度上升到108 左右，通过博节下排气间，使压力表上的温度与显示温度相一致。(2分) 同灭商时间到。关闭电源，取出物品。(1分》 2简述汁液涂沫法来鉴定植物病毒的具体操作。(7分)
8.母液配制时要求选用（ B ） A.自来水 B. 蒸馏水 C.无菌水 D.矿泉水 9. 植物组织培养属于( B )范畴。 A.孢子繁殖 B.无性繁殖 C. 有性繁殖 10.植物组织培养若用蓝紫光照射，则蓝紫光属于光照条件中的（ A ） A.光质 C.光强 D. 光照时间 三、名词解释(每题 2 分，共 10 分) 1. 外植体：从活体植物体上分离下来的用于离体培养的那部分无菌细胞、组 织或器官。 2. 灭菌：是指采用物理或化学方法杀死物体表面或环境中的一切微生物（包 括细菌的芽孢和真菌的孢子） 3. 脱分化：已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生 组织状态（即诱导形成愈伤组织）的过程。 4. 褐变：是指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚 类物质氧化成棕褐色的醌类物质，不但使培养变成褐色，而且外植体最后也变褐而死亡的现 象。 5. 植物组织培养（广义）：在人工控制的条件下，将植物体的任何一部分， 无菌操作接种到培养基上，离体培养直至生成完整植株。 四、问答题(共 35 分) 1. 立式高压灭菌锅的具体使用方法。(6 分) ① 接通电源，设置灭菌温度和灭菌时间：121－123℃,20－30min。 （1 分） ② 往外锅加水至高水位，另外再多加 1L。（1 分） ③ 往内锅放入待灭菌物品，拧紧锅盖，关闭上排气阀。（1 分） ④ 灭菌开始时，把下排气阀旋钮旋至最大（3 档与 4 档之间），当温度上升到 108℃ 左右，通过调节下排气阀，使压力表上的温度与显示温度相一致。（2 分） ⑤ 灭菌时间到，关闭电源，取出物品。（1 分） 2. 简述汁液涂沫法来鉴定植物病毒的具体操作。(7 分)
①采取计液在被鉴定植物上取1一3g幼叶(1分》，在研体中加入10阳】水及少量瞬 酸缓冲液（阳7.0），研碎后用双层纱布过滤(2分)，再在汁液中加入少量的500一600目 金钢砂（摩擅剂）(1分)。 ②接种用棉缘随取汁液在指示植物叶面上轻轻涂沫2一3次，后用清水冲洗叶面，(2 分) ③培养在防好虫温室内培养，15一25C,2一6天观察病症。(1分) 3简述N4、丛、2,4U、IBA、NT、6-A、ZI、GA8种激素的溶解方法。8分) IA丛、IBA、GA、ZI先溶95酒精再如水定容：3分) 从先溶于练水或95酒精再加水：(1分) 2,4-D先溶于0.1Ma0阳再加水：2分) T、M先溶于0.MC1再加水。(2分) 4.简述试管苗的移栽方法。《8分) ①基质的混配：按配方将基质进行混合。(1分) ②漫配基质和容器的消毒：用0.1一0.2%高锰酸甲对基质和容器进行喷酒清洗消毒(1 分) ③装体或穴盘：将基质装入容器中，压实。浇透水。(2分) ④试管苗的清洗：将试管苗根部的培养基质清洗干净，以防污染并少伤根。(2分)》 回试管苗的移栽：在容器内用竹签扎一小孔穴，将洗净的小苗栽入其中，周围压实 并轻浇薄水。(2分) 5简述微尖培养颗毒冢理。(6分) 染病植株体内病毒的分布不均匀，感常近多顶的感染深度越低，生长点几平不含或含病 毒根少《2分》·原因是无维管束，病毒具能通过胞间违丝传递，不及细胞不断分裂和生长 的建度(4分)·因此可利用微茎尖培养脱毒。 六、论述题（共22分） 1.以制作配方为5+6-0.5g/L的培养基2L为例，叙述组培培养基的配制步骤。（大 量元素母液为10X,微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为10×，激素母液浓度为 1g/1D(10分) (1》按配方移取各母液(1分)：大量元素母液为001，微量元素母液、铁盐母液，有机 物母液均为20■l,6-M激素母液为11。(1分) 2)定容：用蒸馏水定容至L。(标题和内容各Q5分)》
①采取汁液 在被鉴定植物上取 1－3g 幼叶（1 分），在研钵中加入 10ml 水及少量磷 酸缓冲液（PH7.0），研碎后用双层纱布过滤（2 分），再在汁液中加入少量的 500－600 目 金钢砂（摩擦剂）（1 分）。 ②接种 用棉球蘸取汁液在指示植物叶面上轻轻涂沬 2－3 次，后用清水冲洗叶面。（2 分） ③培养 在防蚜虫温室内培养，15－25C，2－6 天观察病症。（1 分） 3.简述 NAA、IAA、2,4-D、IBA、KT、6-BA、ZT、GA8 种激素的溶解方法。(8 分) IAA、IBA、GA、ZT 先溶 95%酒精再加水定容；(3 分) NAA 先溶于热水或 95%酒精再加水；(1 分) 2，4-D 先溶于 0.1M NaOH 再加水；(2 分) KT、BA 先溶于 0.1M HCl 再加水。 （2 分) 4. 简述试管苗的移栽方法。(8 分) ① 基质的混配：按配方将基质进行混合。（1 分） ② 混配基质和容器的消毒：用 0.1～0.2%高锰酸钾对基质和容器进行喷洒清洗消毒（1 分） ③ 装钵或穴盘：将基质装入容器中，压实，浇透水。（2 分） ④ 试管苗的清洗：将试管苗根部的培养基质清洗干净，以防污染并少伤根。（2 分） ⑤ 试管苗的移栽 ：在容器内用竹签扎一小孔穴，将洗净的小苗栽入其中，周围压实 并轻浇薄水。（2 分） 5. 简述微茎尖培养脱毒原理。(6 分) 染病植株体内病毒的分布不均匀，越靠近茎顶的感染深度越低，生长点几乎不含或含病 毒很少（2 分）。原因是无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，不及细胞不断分裂和生长 的速度（4 分）。因此可利用微茎尖培养脱毒。 六、论述题(共 22 分) 1.以制作配方为 MS+6-BA0.5mg/ L 的培养基 2L 为例，叙述组培培养基的配制步骤。(大 量元素母液为 10×，微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为 100×，激素母液浓度为 1mg/ml)(10 分) (1)按配方移取各母液(1 分)：大量元素母液为 200ml，微量元素母液、铁盐母液、有机 物母液均为 20ml，6-BA 激素母液为 1ml。(1 分) (2)定容：用蒸馏水定容至 2L。(标题和内容各 0.5 分)
(3)称量成糖和琼脂：位糖50一60，琼稀14一16g。(标题和内容各Q.5分) ()培养基熬制：加入匣糖和琼脂后进行培养液熬制，直至琼脂全部脸化。（标愿和内容 各0.5分) (5)调用值：先用用计或图试纸测量后再用0.1用或1调用值为58一6.0。 (标题和内容各0.5分) 6)二次定容：当培养基格制后总体积少干2L时要定容至2L。(标题和内容各0.5分) (7)分装并扎瓶口：趁热分装，100▣l的三角瓶钓装入30一40加l,35瓶/L,(标题和内 容各0,5分 8)高压灭菌：及时灭国，121-123℃条件下保持20一30分钟。（标题和内容各0.5分） 9)冷却：特接种。（标题和内容各Q5分）》 2以蒸段（外植体）接种为例，叙述无南操作过程(12分)。 (1)在接种凸前用甲醛高锰酸钾熏燕接种室，并打开室内紫外灯进行灭菌(0.5分) (2)接种前20min打开超净工作台的风机及台上的紫外灯(05分) (3)洗净双手，在援冲间换好专用实验服、帽子、，口罩，并换拖鞋。(Q5分) ()上工作台后，用酒精棉球擦试双手和台面、接种工具和培养皿，接种工具和培养 皿再过火灭商。(1分) (5)将用自来水冲洗干净的材料一用70-75路酒精10-30s=0.1%C1:浸泡1-10▣in 一无画水冲洗30次一放在无菌滤纸上西干水分(4分》 (6)切制材料：外植体原切口剪掉，茎切成含有一个节的小段，约1c■，节上面1/3 节下面2/3，切除部分小叶，(3分)》 (T)打开特接瓶口，并瓶口过火，将外植体轻轻插入培养基中，注意形态学上下端。 瓶口得过火，扎口。(2分) (8)请理台面(0.5分)
(3)称量蔗糖和琼脂：蔗糖 50－60g，琼脂 14－16g。(标题和内容各 0.5 分) (4)培养基熬制：加入蔗糖和琼脂后进行培养液熬制，直至琼脂全部融化。(标题和内容 各 0.5 分) (5) 调 PH 值：先用 PH 计或 PH 试纸测量后再用 0.1MNaOH 或 HCl 调 PH 值为 5.8－6.0。 (标题和内容各 0.5 分) (6)二次定容：当培养基熬制后总体积少于 2L 时要定容至 2L。(标题和内容各 0.5 分) (7)分装并扎瓶口：趁热分装，100ml 的三角瓶约装入 30－40ml, 35 瓶/L。(标题和内 容各 0.5 分 (8)高压灭菌：及时灭菌，121-123℃条件下保持 20－30 分钟。(标题和内容各 0.5 分) (9)冷却：待接种。(标题和内容各 0.5 分) 2. 以茎段(外植体)接种为例，叙述无菌操作过程(12 分)。 （1）在接种 4h 前用甲醛高锰酸钾熏蒸接种室，并打开室内紫外灯进行灭菌（0.5 分） （2）接种前 20min 打开超净工作台的风机及台上的紫外灯（0.5 分） （3）洗净双手，在缓冲间换好专用实验服、帽子、口罩，并换拖鞋。（0.5 分） （4）上工作台后，用酒精棉球擦试双手和台面、接种工具和培养皿，接种工具和培养 皿再过火灭菌。（1 分） （5）将用自来水冲洗干净的材料→用 70-75%酒精 10-30S →0.1% HgCl2 浸泡 1-10min →无菌水冲洗 3-10 次→放在无菌滤纸上沥干水分（4 分） （6）切割材料：外植体原切口剪掉，茎切成含有一个节的小段，约 1cm，节上留 1/3 节下留 2/3，切除部分小叶。（3 分） （7）打开待接瓶口，并瓶口过火，将外植体轻轻插入培养基中，注意形态学上下端。 瓶口再过火，扎口。（2 分） （8）清理台面（0.5 分）