免疫学及免疫学检验 沉淀反应 precipitation reaction 毛旭虎 ●医学检验系临床微生物学及免疫学教研室 二OO二年三月
免疫学及免疫学检验 沉淀反应 （precipitation reaction) 毛旭虎 ⚫ 医学检验系临床微生物学及免疫学教研室 ⚫ 二OO二年三月
免疫学及免疫学检验 可溶性抗原+相应抗体 肉眼可见的沉淀
免疫学及免疫学检验 可溶性抗原+相应抗体 肉眼可见的沉淀
免疫学及免疫学检验 1897年 Kraus就发现细菌培养液(毒素)与相应 抗血清混合出现沉淀 1905年 Bechhold把抗体放在明胶中,将抗原加于 其中,发现沉淀反应可在凝胶中进行 1946年 Oudin报告了试管免疫扩散技术 1965年 Mancini提出单向免疫扩散技术,使定性 免疫试验向定量化发展 免疫浊度法的出现,使沉淀反应达到快速 微量、自动化的新阶段
免疫学及免疫学检验 1897年 Kraus 就发现细菌培养液（毒素）与相应 抗血清混合出现沉淀 1905年 Bechhold 把抗体放在明胶中，将抗原加于 其中，发现沉淀反应可在凝胶中进行 1946年 Oudin 报告了试管免疫扩散技术 1965年 Mancini 提出单向免疫扩散技术，使定性 免疫试验向定量化发展 免疫浊度法的出现，使沉淀反应达到快速、 微量、自动化的新阶段
免疫学及免疫学检验 根据沉淀反应的介质和检测方 法的不同沉淀反应可分为 液相内的沉淀反应 凝胶内的沉淀反应
免疫学及免疫学检验 根据沉淀反应的介质和检测方 法的不同,沉淀反应可分为: 液相内的沉淀反应 凝胶内的沉淀反应
免疫学及免疫学检验 第一节液体内沉淀试验 根据沉淀现象的不同,液体内沉淀又 可分为三类 絮状沉淀 环状沉淀 免疫浊度沉淀
免疫学及免疫学检验 第一节 液体内沉淀试验 根据沉淀现象的不同，液体内沉淀又 可分为三类： 絮状沉淀 环状沉淀 免疫浊度沉淀
免疫学及免疫学检验 絮状沉淀试验 絮状沉淀试验是一项经典实验技术。曾 用于测定梅毒抗体的Kahn试验是絮状沉淀 的代表试验,现今已被更简便而敏感的 USR或RPR方法替代
免疫学及免疫学检验 一、絮状沉淀试验 絮状沉淀试验是一项经典实验技术。曾 用于测定梅毒抗体的Kahn试验是絮状沉淀 的代表试验，现今已被更简便而敏感的 USR或RPR方法替代
免疫学及免疫学检验 )原理 抗原溶液与相应抗体溶液混合, 在电解质存在的条件下,抗原与抗体 结合出现可见的絮状沉淀。絮状沉淀 易受抗原与抗体比例的影响,由此可 作为最适比测定的基本方法
免疫学及免疫学检验 (一) 原理 抗原溶液与相应抗体溶液混合， 在电解质存在的条件下，抗原与抗体 结合出现可见的絮状沉淀。絮状沉淀 易受抗原与抗体比例的影响，由此可 作为最适比测定的基本方法
免疫学及免疫学检验 (二)操作步骤 1.抗原稀释法 (1)将可溶性抗原作一系列倍比稀释 (2)各管加入一定浓度的适量抗血清。 (3)振摇使抗原、抗体充分混匀,置37℃孵育。 (4)产生沉淀量随抗原量而不同,以出现沉淀物 最多的管为最适比例管
免疫学及免疫学检验 (二) 操作步骤 1. 抗原稀释法 (1) 将可溶性抗原作一系列倍比稀释。 (2) 各管加入一定浓度的适量抗血清。 (3) 振摇使抗原、抗体充分混匀，置37℃孵育。 (4) 产生沉淀量随抗原量而不同，以出现沉淀物 最多的管为最适比例管
免疫学及免疫学检验 2.抗体稀释法 本法采用抗原量恒定与不同倍比稀释度的抗体反 应,出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。 3.方阵滴定法 抗原和抗体同时稀释,亦称棋盘( checkerboard 滴定法,是前二法的结合,可一次完成抗原和抗体 的滴定并找出抗原、抗体的最适比
免疫学及免疫学检验 2. 抗体稀释法 本法采用抗原量恒定与不同倍比稀释度的抗体反 应，出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。 3. 方阵滴定法 抗原和抗体同时稀释，亦称棋盘(checkerboard) 滴定法，是前二法的结合，可一次完成抗原和抗体 的滴定并找出抗原、抗体的最适比
免疫学及免疫学检验 (三)方法评价 絮状沉淀试验方法简单,设备要求低 敏感度较低,受抗原抗体比例影响非常明 目前多用以测定抗原抗体反应的最适 比
免疫学及免疫学检验 (三) 方法评价 絮状沉淀试验方法简单，设备要求低， 敏感度较低，受抗原抗体比例影响非常明 显，目前多用以测定抗原抗体反应的最适 比