生物化学实验教学大纲（供五年制各专业使用）生物化学与分子生物学实验室编重庆医科大学基础医学实验教学中心二00八年三月PDF文件使用”pdfFactoryPro”试用版本创建www.fineprint.cn
（供五年制各专业使用） 生物化学与分子生物学实验室编 重庆医科大学基础医学实验教学中心 二 00 八年三月 PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 www.fineprint.cn
编写说明本大纲根据科学出版社宋方洲，何凤田主编全国高等医药院校基础医学实验教学系列教材《生物化学与分子生物学实验》一书，结合重庆医科大学五年制本科生物化学实验教学27学时、36学时教学计划和实验课学时安排制定，供五年制医学各专业生物化学实验教学课使用。PDF文件使用"pdfFactoryPro”试用版本创建www.fineprint.cn
编写说明 本大纲根据科学出版社宋方洲，何凤田主编全国高等医药院校基础医学实验 教学系列教材《生物化学与分子生物学实验》一书，结合重庆医科大学五年制本 科生物化学实验教学 27 学时、36 学时教学计划和实验课学时安排制定，供五年 制医学各专业生物化学实验教学课使用。 PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 www.fineprint.cn
前言生物化学与分子生物学是从分子水平揭示生命现象奥秘的科学，是一门实验性学科。实验教学是生化与分子生物学教学的重要组成部分，是培养学生动手能力、科研基本技能、发现问题和解决问题能力，以及科学思维方式的重要环节。生物化学与分子生物学实验技术渗透在医学各研究领域，是医学生的一门必修实验课。为适应高等医学院校基础医学实验教学改革和发展的形势，按照重庆医科大学基础医学实验教学改革的统一部署和要求，重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室汇同第三军医大学、遵义医学院、川北医学院生物化学与分子生物学教研室编写了《生物化学与分子生物学实验》教材。本教材共四章。第一章是基本实验操作及常用仪器使用，重点介绍了分光光度法、电泳法、层析法、离心法、PCR、分子杂交、分子克隆等经典的生化与分子生物学实验技术和相应仪器的使用方法，还包括玻璃仪器洗涤和使用等基本的生化与分子生物学实验方法，以及实验报告书写方法指导，目的在于使学生对本学科的实验技术有较系统的认识。第二章是经典验证性实验，包括23个经典生化实验和15个分子生物学经典实验，这些实验有助于学生巩固生物化学与分子生物学理论知识，并可培养学生基本的生物化学与分子生物学实验技能。第三章有13个综合性实验，每个实验均涉及多种实验技术。通过相对系统地使用多种实验技术解决一个问题，或达到一个研究目的，可培养学生的综合逻辑思维能力，对科学研究有一个初步的认识。第四章有5个创新性实验，通过学生自已提出问题、在老师指导下解决问题的方式教学，以培养学生独立思考和基本的科研能力。根据学校教学计划，五年制本科生化与分子生物学是两门课，本大纲仅仅是生物化学实验教学部分。该大纲结合学校五年制本科生化实验27和36学时教学计划，和实验课课表学时安排制定。鉴于学时和经费的限制，我们仅开设了教材第二章6～8个生物化学经典实验，以训练学生基本生化实验技能，掌握相关的实验原理，熟悉相应的实验操作，为学习其它基础医学课程和临床医学课程打下良好的基础。教材第一章由学生自学，第三、四章内容待时机成熟后开展。在教学过程中，教师必需按照本大纲的要求认真研究教材，掌握好教学的重点，实施教学，并适当联系临床，提高学生的学习积极性。在教学过程中，教师要了解学生的思想动态，鼓励学生主动学习，针对学生在学习中存在的问题，提PDF文件使用"pdfFactoryPro”试用版本创建www.fineprint.cn
前 言 生物化学与分子生物学是从分子水平揭示生命现象奥秘的科学，是一门实验 性学科。实验教学是生化与分子生物学教学的重要组成部分，是培养学生动手能 力、科研基本技能、发现问题和解决问题能力，以及科学思维方式的重要环节。 生物化学与分子生物学实验技术渗透在医学各研究领域，是医学生的一门必修实 验课。为适应高等医学院校基础医学实验教学改革和发展的形势，按照重庆医科 大学基础医学实验教学改革的统一部署和要求，重庆医科大学基础医学院生物化 学与分子生物学教研室汇同第三军医大学、遵义医学院、川北医学院生物化学与 分子生物学教研室编写了《生物化学与分子生物学实验》教材。 本教材共四章。第一章是基本实验操作及常用仪器使用，重点介绍了分光光 度法、电泳法、层析法、离心法、PCR、分子杂交、分子克隆等经典的生化与分 子生物学实验技术和相应仪器的使用方法，还包括玻璃仪器洗涤和使用等基本的 生化与分子生物学实验方法，以及实验报告书写方法指导，目的在于使学生对本 学科的实验技术有较系统的认识。第二章是经典验证性实验，包括 23 个经典生 化实验和 15 个分子生物学经典实验，这些实验有助于学生巩固生物化学与分子 生物学理论知识，并可培养学生基本的生物化学与分子生物学实验技能。第三章 有 13 个综合性实验，每个实验均涉及多种实验技术。通过相对系统地使用多种 实验技术解决一个问题，或达到一个研究目的，可培养学生的综合逻辑思维能力， 对科学研究有一个初步的认识。第四章有 5 个创新性实验，通过学生自己提出问 题、在老师指导下解决问题的方式教学，以培养学生独立思考和基本的科研能力。 根据学校教学计划，五年制本科生化与分子生物学是两门课，本大纲仅仅是 生物化学实验教学部分。该大纲结合学校五年制本科生化实验 27 和 36 学时教学 计划，和实验课课表学时安排制定。鉴于学时和经费的限制，我们仅开设了教材 第二章 6～8 个生物化学经典实验，以训练学生基本生化实验技能，掌握相关的 实验原理，熟悉相应的实验操作，为学习其它基础医学课程和临床医学课程打下 良好的基础。教材第一章由学生自学，第三、四章内容待时机成熟后开展。 在教学过程中，教师必需按照本大纲的要求认真研究教材，掌握好教学的重 点，实施教学，并适当联系临床，提高学生的学习积极性。在教学过程中，教师 要了解学生的思想动态，鼓励学生主动学习，针对学生在学习中存在的问题，提 PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 www.fineprint.cn
出解决问题的方法，帮助学生学好生化实验。教师要严格要求学生，培养学生实事求是的科学态度，并利用一切可能的机会，注重启发学生的创新思维、培养学生的自学能力、实验操作能力和观察事物的能力等，为提高学生的综合素质发挥教师应起的作用。PDF文件使用"pdfFactoryPro”试用版本创建www.fineprint.cn
出解决问题的方法，帮助学生学好生化实验。教师要严格要求学生，培养学生实 事求是的科学态度，并利用一切可能的机会，注重启发学生的创新思维、培养学 生的自学能力、实验操作能力和观察事物的能力等，为提高学生的综合素质发挥 教师应起的作用。 PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 www.fineprint.cn
生物化学实验教学大纲生物化学是一门实验性学科，生物化学实验的目的在于通过实验操作使学习者了解生物化学实验的基本内容，掌握生化实验的基本技能，学习和培养在实验中观察问题、解决问题的能力，以及科学的思维方法。生物化学基本实验技术主要包括1、分光光度技术；2、电泳技术；3、层析技术：4、离心技术；5、生物化学实验的临床检测方法五大方面。生物化学的实验技术既能在生物化学中使用，也能在其他学科中使用。本大纲根据科学出版社宋方洲，何凤田主编全国高等医药院校基础医学实验教学系列教材《生物化学与分子生物学实验》编写，开设实验的标题与教材第二章一致，共6~8个生物化学实验。大纲对每个实验提出了学习目的要求、学习重点、思考题，供学习时参考。36学时实验教学内容及学时分配表实验内容实验名称学时数4血清蛋白质含量测定一双缩脲法4二酚试剂法测定血清蛋白质浓度三5转氨基作用（纸层析）四5醋酸纤维薄膜电泳五4转氨酶活性的测定六4血清碱性磷酸酶活性测定一金氏法七5丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用八5血糖浓度的测定27学时实验教学内容及学时分配表实验内容实验名称学时数4血清蛋白质含量测定一双缩脲法二4醋酸纤维薄膜电泳三5转氨基作用（纸层析）四5血糖浓度的测定五4转氨酶活性的测定六5丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用PDF文件使用”pdfFactoryPro”试用版本创建www.fineprint.cn
生物化学实验教学大纲 生物化学是一门实验性学科，生物化学实验的目的在于通过实验操作使学习 者了解生物化学实验的基本内容，掌握生化实验的基本技能，学习和培养在实验 中观察问题、解决问题的能力，以及科学的思维方法。 生物化学基本实验技术主要包括 1、分光光度技术；2、电泳技术；3、层析 技术；4、离心技术；5、生物化学实验的临床检测方法五大方面。生物化学的实 验技术既能在生物化学中使用，也能在其他学科中使用。 本大纲根据科学出版社宋方洲，何凤田主编全国高等医药院校基础医学实验 教学系列教材《生物化学与分子生物学实验》编写，开设实验的标题与教材第二 章一致，共 6~8 个生物化学实验。大纲对每个实验提出了学习目的要求、学习重 点、思考题，供学习时参考。 36 学时实验教学内容及学时分配表 实验内容 实验名称 学时数 一 二 三 四 五 六 七 八 血清蛋白质含量测定—双缩脲法 酚试剂法测定血清蛋白质浓度 转氨基作用（纸层析） 醋酸纤维薄膜电泳 转氨酶活性的测定 血清碱性磷酸酶活性测定—金氏法 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 血糖浓度的测定 4 4 5 5 4 4 5 5 27 学时实验教学内容及学时分配表 实验内容 实验名称 学时数 一 二 三 四 五 六 血清蛋白质含量测定—双缩脲法 醋酸纤维薄膜电泳 转氨基作用（纸层析） 血糖浓度的测定 转氨酶活性的测定 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 4 4 5 5 4 5 PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 www.fineprint.cn
实验一、双缩法测定血清蛋白质含量教学目的与要求1：掌握双缩脉法测定蛋白质的原理。2.学习掌握分光光度计的使用。主要教学内容1.双缩脲法测定蛋白质的原理。2.分光光度法的基本原理，标准曲线的制备方法。3.分光光度计的使用。教学的重点双缩脲法测定蛋白质的原理和注意事项。分光光度法的原理和比色计的使用。教学方法课堂教授和讨论。思考题1.用双缩脉法和分光光度法的基本原理解释为什么双缩脲法可以定量测定蛋白质的含量。2.为什么标准曲线法与计算法测定的蛋白质数值有差异？分析两种方法产生差异的可能原因。3.本实验应于加双缩脲试剂多少时间才能进行比色测定？并应在显色多少时间内完成比色读数，为什么？4标准曲线法绘制时应该注意什么？为什么必须是直线？且横、纵轴不能有截距？实验二、Folin-酚试剂法测定蛋自质含量教学目的与要求1.学习掌握Folin-酚试剂法测定蛋白质的基本原理。2.学习掌握分光光度计的使用。主要教学内容PDF文件使用”pdfFactoryPro”试用版本创建www.fineprint.cn
实验一、双缩脲法测定血清蛋白质含量 教学目的与要求 1．掌握双缩脲法测定蛋白质的原理。 2．学习掌握分光光度计的使用。 主要教学内容 1. 双缩脲法测定蛋白质的原理。 2. 分光光度法的基本原理，标准曲线的制备方法。 3. 分光光度计的使用。 教学的重点 双缩脲法测定蛋白质的原理和注意事项。 分光光度法的原理和比色计的使用。 教学方法 课堂教授和讨论。 思考题 1．用双缩脲法和分光光度法的基本原理解释为什么双缩脲法可以定量测定 蛋白质的含量。 2．为什么标准曲线法与计算法测定的蛋白质数值有差异？分析两种方法产 生差异的可能原因。 3．本实验应于加双缩脲试剂多少时间才能进行比色测定？并应在显色多少 时间内完成比色读数，为什么？ 4．标准曲线法绘制时应该注意什么？为什么必须是直线？且横、纵轴不能 有截距？ 实验二、Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 教学目的与要求 1.学习掌握 Folin-酚试剂法测定蛋白质的基本原理。 2.学习掌握分光光度计的使用。 主要教学内容 PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 www.fineprint.cn
1.Folin-酚试剂法测定蛋白质的基本原理。2.进一步学习掌握分光光度法、标准曲线的制备，和分光光度计的使用。教学的重点Folin-酚试剂法测定蛋白质的基本原理。教学方法课堂教授和讨论，思考题1.试比较酚试剂法与双缩脲法测定蛋白质的原理、灵敏度、特异性。2.为什么加酚试剂后必须马上混匀？实验六、纸层析法观察转氨基作用教学目的与要求1.学习纸层析法观察转氨基作用的基本原理。2.复习掌握氨基酸转氨基作用的概念。主要教学内容1：纸层析法观察转氨基作用的基本原理。2.氨基酸转氨基作用的概念。教学的重点纸层析法观察转氨基作用的基本原理。教学方法课堂教授和讨论。思考题实验结果为什么对照管是一个色斑，而测定管是两个色斑？这些色斑分别代表什么物质？又是如何证明的？实验十、血清醋酸纤维薄膜电泳教学目的与要求1：学习掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质的原理和技术。PDF文件使用”pdfFactoryPro”试用版本创建www.fineprint.cn
1. Folin-酚试剂法测定蛋白质的基本原理。 2. 进一步学习掌握分光光度法、标准曲线的制备，和分光光度计的使用。 教学的重点 Folin-酚试剂法测定蛋白质的基本原理。 教学方法 课堂教授和讨论。 思考题 1.试比较酚试剂法与双缩脲法测定蛋白质的原理、灵敏度、特异性。 2.为什么加酚试剂后必须马上混匀？ 实验六、纸层析法观察转氨基作用 教学目的与要求 1．学习纸层析法观察转氨基作用的基本原理。 2．复习掌握氨基酸转氨基作用的概念。 主要教学内容 1．纸层析法观察转氨基作用的基本原理。 2．氨基酸转氨基作用的概念。 教学的重点 纸层析法观察转氨基作用的基本原理。 教学方法 课堂教授和讨论。 思考题 实验结果为什么对照管是一个色斑，而测定管是两个色斑？这些色斑分别代 表什么物质？又是如何证明的？ 实验十、血清醋酸纤维薄膜电泳 教学目的与要求 1．学习掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质的原理和技术。 PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 www.fineprint.cn
2.了解血清蛋白各组分半定量方法（27学时不要求）及清蛋白与球蛋白比值的概念和意义。主要教学内容1.醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质的原理和技术。2.血清蛋白各组分半定量方法（27学时不要求）及A/G比值的概念和意义。教学的重点血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳法的原理和技术。教学方法课堂教授和讨论思考题1：简述人血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的基本原理和结果。2.以血清为样品，醋酸纤维薄膜电泳与滤纸法比较有什么优点？实验十三、血清碱性磷酸酶活性测定一金氏法教学目的与要求1：学习和掌握血清碱性磷酸酶活性测定金氏法的基本原理和方法。2.了解血清碱性磷酸酶活性测定的临床意义。主要教学内容1.血清碱性磷酸酶活性测定金氏法的基本原理和方法。2.血清碱性磷酸酶活性测定的临床意义。教学的重点血清碱性磷酸酶活性测定金氏法的基本原理和方法。教学方法课堂教授和讨论。思考题1.为什么需要设立标准空白管和测定空白管？2.本实验中，能不能用磷酸盐缓冲液代替所用的碳酸盐缓冲液？为什么？3.酶活性测定应该注意哪些因素？PDF文件使用”pdfFactoryPro”试用版本创建www.fineprint.cn
2．了解血清蛋白各组分半定量方法（27学时不要求）及清蛋白与球蛋白比 值的概念和意义。 主要教学内容 1．醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质的原理和技术。 2．血清蛋白各组分半定量方法（27学时不要求）及A/G比值的概念和意义。 教学的重点 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳法的原理和技术。 教学方法 课堂教授和讨论。 思考题 1．简述人血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的基本原理和结果。 2．以血清为样品，醋酸纤维薄膜电泳与滤纸法比较有什么优点？ 实验十三、血清碱性磷酸酶活性测定—金氏法 教学目的与要求 1．学习和掌握血清碱性磷酸酶活性测定金氏法的基本原理和方法。 2．了解血清碱性磷酸酶活性测定的临床意义。 主要教学内容 1．血清碱性磷酸酶活性测定金氏法的基本原理和方法。 2．血清碱性磷酸酶活性测定的临床意义。 教学的重点 血清碱性磷酸酶活性测定金氏法的基本原理和方法。 教学方法 课堂教授和讨论。 思考题 1．为什么需要设立标准空白管和测定空白管？ 2．本实验中，能不能用磷酸盐缓冲液代替所用的碳酸盐缓冲液？为什么？ 3．酶活性测定应该注意哪些因素？ PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 www.fineprint.cn
实验十四、血清丙氨酸氨基转移酶活性测定一金氏法教学目的与要求1.学习和掌握血清丙氨酸氨基转移酶活性测定金氏法的原理及方法。2.熟悉血清丙氨酸氨基转移酶活性测定的临床意义。主要教学内容血清丙氨酸氨基转移酶活性测定金氏法的原理、方法和临床意义。教学的重点血清丙氨酸氨基转移酶活性测定金氏法的原理及方法。教学方法课堂教授和讨论。思考题1.本方法可测的直线范围是多少？如果样品管的吸光度值超出可测范围的上限，应该怎样处理？2.配制底物液时为什么不能使用D-氨基酸？3.本实验方法可以采取哪些措施减少α-酮戊二酸对丙酮酸测定的干扰？实验十六、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用教学目的与要求1.学习和掌握酶竞争性抑制作用的概念和特点。2.观察丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。主要教学内容1酶竞争性抑制作用的概念和特点。2.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。教学的重点酶竞争性抑制作用的概念和特点。教学方法课堂教授和讨论。思考题PDF文件使用”pdfFactoryPro”试用版本创建www.fineprint.cn
实验十四、血清丙氨酸氨基转移酶活性测定—金氏法 教学目的与要求 1．学习和掌握血清丙氨酸氨基转移酶活性测定金氏法的原理及方法。 2．熟悉血清丙氨酸氨基转移酶活性测定的临床意义。 主要教学内容 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定金氏法的原理、方法和临床意义。 教学的重点 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定金氏法的原理及方法。 教学方法 课堂教授和讨论。 思考题 1．本方法可测的直线范围是多少？如果样品管的吸光度值超出可测范围的 上限，应该怎样处理？ 2．配制底物液时为什么不能使用 D-氨基酸？ 3．本实验方法可以采取哪些措施减少 α-酮戊二酸对丙酮酸测定的干扰？ 实验十六、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 教学目的与要求 1．学习和掌握酶竞争性抑制作用的概念和特点。 2．观察丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。 主要教学内容 1．酶竞争性抑制作用的概念和特点。 2．丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。 教学的重点 酶竞争性抑制作用的概念和特点。 教学方法 课堂教授和讨论。 思考题 PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 www.fineprint.cn
1.实验中各试管有什么意义？如何说明丙二酸对琥珀酸脱氢酶是竞争性抑制作用。2.实验中加入液体石蜡的作用是什么？水浴保温过程中为什么不能摇动试管？如果将褪色的试管用力摇动会出现什么现象？实验十九、血糖浓度的测定教学目的与要求1：学习葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的基本原理和方法。2.掌握分光光度计的原理和操作。主要教学内容葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的基本原理。教学的重点葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的原理和意义。教学方法课堂教授和讨论。思考题血糖测定结果对诊断糖尿病有什么意义？PDF文件使用”pdfFactoryPro”试用版本创建www.fineprint.cn
1．实验中各试管有什么意义？如何说明丙二酸对琥珀酸脱氢酶是竞争性抑 制作用。 2．实验中加入液体石蜡的作用是什么？水浴保温过程中为什么不能摇动试 管？如果将褪色的试管用力摇动会出现什么现象？ 实验十九、血糖浓度的测定 教学目的与要求 1．学习葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的基本原理和方法。 2．掌握分光光度计的原理和操作。 主要教学内容 葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的基本原理。 教学的重点 葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的原理和意义。 教学方法 课堂教授和讨论。 思考题 血糖测定结果对诊断糖尿病有什么意义？ PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 www.fineprint.cn