新乡医学院教案首页 课程名称 水质理化检验 授课题目 气相色谱法测定水中五氯酚 授课对象 本科2012级卫生检验与检疫专业 1、五氯盼测定的意义 5分钟 2、气相色谱法测定水中五氯酚 25分钟 时间分配 3、学生实验操作 160分钟 4、小结 10分钟 共200分钟 1、掌握气相色谱法测定水中五氯酚的原理和操作方法 课时目标 2、熟悉气相色谱仪的基本操作和测定条件的选择： 3、了解气相色谱法中常用的衍生化试剂。 授课重点 气相色谱法测定水中五氯酚的原理和方法 授课难点 气相色谱法测定水中五氯酚的方法 授课形式 小班实验课 授课方法 板书结合示教 山591-2010水质五氯酚的测定气相色谱法 参考文献 张克荣主编《水质理化检验》人民卫生出版社，第一版。 1.为什么本实验采用工作曲线定量？ 思考题 2. 如何考察本实验的衍生化效率？ 教研室主任（签字） 课程负责人（签字） 教研室主任 及课程负责人签 字 年月日 年月日
教案续页 教案内容 教学组织与 教学安排 气相色谱法测定水中五氯酚 一、实验目的和要求 1、掌握气相色谱法测定水中五氯酚的原理和操作方法： 2、熟悉气相色谱仪的基本操作和测定条件的选择： 3、了解气相色谱法中常用的衍生化试剂。 二、方法原理 水样通过液液萃取进行提取，经乙酸酐衍生化后气相色谱法分离， 电子捕获检测器检测，外标工作曲线法定量。 三、实验器材 1、仪器气相色谱仪附电子捕获检测器，DB-5毛细管色谱柱：氨 吹仪。 2、试剂 五氯酚（标准物质，浓度为1gmL)、正己烷（农残级）、乙酸酐 【(CH,CO),O]、无水硫酸钠NaSO)、高纯氮气、硫酸铜(CuS0)、硫代 硫酸钠NaS,O5H,O)、硫酸H,SO)、碳酸钾K,C0). 四、操作步骤 1、萃取 取100mL水样置于250mL分液漏斗中，加入1mL浓酸后，用 20mL正己烷分两次对水样进行茶取，合并正己烷相弃去水相。再用0.1 moL碳酸钾溶液20mL对合并后的正己烷相进行萃取，合并水相弃去 正己烷相。 2、衍生化 向水相中加入1mL乙酸酐，振摇5min后加入5mL正己烷，振摇
教案续页 教案内容 教学组织与 教学安排 5mim,静置分层后，弃去水相，收集正己烷相。正己烷相经无水硫酸钠 脱水后氮吹定容至1mL,经气相色谱仪检测，进样1L,以峰面积查得 工作曲线对应的含量，换算成样品中五氯酚的含量 3、气相色谱仪的色谱条件 毛细管色谱柱：DB-5毛细管色谱柱(30m×0.32mm×0.25um或30 m×0.25mm×0.25m)片 进样口温度：250℃：检测器温度：300℃。 色谱柱温度（升温程序）：60℃保持2min,以20C/min升至220℃， 以10C/min升至250C保持3min。 载气流量：1.5mL/min:尾吹气流量：60mL/min。 进样量：1.0uL:进样模式不分流进样，进样后0.75min分流，分 流比401。 4、工作曲线的绘制 校准曲线分两种：工作曲线和标准曲线的区别 ()工作曲线即曲线和样品的测定步骤完全一样，即需要顶处理。 (2)标准曲线与样品的测定步骤不一样，即不需要做预处理。 向装有20mL0.1moL碳酸钾溶液的7个125mL分液漏斗中分别 加入0、5、10、50、100、250、500L五氯酚标准使用液(1gmL),混 匀后按照衍生化相同步骤进行操作（在漏斗中分别加入1mL乙酸酐，振 摇5mim后加入5mL正己烷，振摇5min,静置分层后，弃去水相，收 集正己烷相。正己烷相经无水硫酸钠脱水后氮吹定容至1mL,经气相色 谱仪检测)，得到五氯酚浓度为0、5、10、50、100、250、500gmL的 标准系列溶液。 用微量注射器取1L标准系列溶液分别注入气相色谱仪中，记录不 同质量浓度溶液对应的色谱峰的峰面积（或峰高），以五氯酚标准系列溶液 浓度为横坐标，相应的峰面积（或峰高）为纵坐标，绘制工作曲线
教案续页 教案内容 教学组织与 教学安排 5、计算 水样中五氯酚的质量浓度()按照式()进行计算。 p=Pax上 式中：p一水样中五氯酚的质量浓度，gL: P标一由工作曲线计算所得的五氯酚质量浓度，gL。 片一萃取液浓缩后的定容体积，mL: V一水样体积，mL。 五、注意事项 1、衍生化反应时间以2-5min为宜，不可低于2min 2、绘制工作曲线时，五氯酚标准溶液的取用要准确。 六、思考题 1、为什么本实验采用工作曲线定量？ 2、如何考察本实验的衍生化效率？
教案末页 小结 教学后记
