实验六细菌的分离培养与 培养特性观察
实验六 细菌的分离培养与 培养特性观察
目的要求 1、掌握细菌分离培养的基本操作方法。 2、了解厌氧菌培养原理。 3、掌握细菌在培养基上生长表现。 二、器材 牛肉膏蛋白胨培养基、接种环、 酒精灯、大肠 杆菌、葡萄球菌、恒温培养箱等
一、目的要求 1、 掌握细菌分离培养的基本操作方法。 2、 了解厌氧菌培养原理。 3 、掌握细菌在培养基上生长表现。 二、器材 牛肉膏蛋白胨培养基、接种环、酒精灯、大肠 杆菌、葡萄球菌、恒温培养箱等
三、实验内容 1、平板划线接种 (1)右手持接种环，将接种环直立灭菌，再横向 持棒烧金属柄部分，通过火焰3-4次； (2)无菌取样或取斜面培养物或取液体材料和肉 汤培养物一接种环； (3)接种培养平板时以左手掌托平皿，拇指、食 指及中指将平皿盖揭开成20°左右的角度（角度 越小越好，以免空气中的细菌进入平皿中将培养 基污染)
三、实验内容 1、平板划线接种 （1）右手持接种环，将接种环直立灭菌，再横向 持棒烧金属柄部分，通过火焰 3-4 次； （2）无菌取样或取斜面培养物或取液体材料和肉 汤培养物一接种环； （3）接种培养平板时以左手掌托平皿，拇指、食 指及中指将平皿盖揭开成 20 º左右的角度（角度 越小越好，以免空气中的细菌进入平皿中将培养 基污染）；
(4)将所取材料涂布于平板培养基边缘，然后将 多余的细菌在火焰上烧灼，待接种环冷却后再与 所涂细菌轻轻接触开始划线； (5)划线时尽量与培养基表面平行，防止划破培 养基，划线时不要过多重复，以免形成菌苔，不 能得到单个菌落。 划线接种方法如下图：
（4）将所取材料涂布于平板培养基边缘，然后将 多余的细菌在火焰上烧灼，待接种环冷却后再与 所涂细菌轻轻接触开始划线； （5）划线时尽量与培养基表面平行，防止划破培 养基，划线时不要过多重复，以免形成菌苔，不 能得到单个菌落。 划线接种方法如下图：
2、斜面划线接种 (1)两试管斜面移植时，左手斜持菌种管和被接种琼脂 斜面管，管口互相并齐，管底部放在拇指和食指之间； (2)右手持接种环，灭菌后，用右手小指和无名指下部 近掌背处拔出一管棉塞，无名指和中指下部近掌背处拔出 第二管棉塞，将管口进行火焰灭菌，使其靠近火焰，将接 种环伸入菌种管内，先在无菌生长的琼脂上接触使冷却 再挑取少许细菌后拉出接种环立即伸人另一管斜面培养基 上，勿碰及斜面和管壁，直达斜面底部，从斜面底部开始 划曲线，向上至斜面顶端为止，管口通过火焰灭菌，将棉 塞塞好；(3)接种完毕，接种环通过火焰灭菌后放下接 种棒，最后在斜面管壁上注明菌名、日期，置37℃温箱中 培养
2、斜面划线接种 （1）两试管斜面移植时，左手斜持菌种管和被接种琼脂 斜面管，管口互相并齐，管底部放在拇指和食指之间； （2）右手持接种环，灭菌后，用右手小指和无名指下部 近掌背处拔出一管棉塞，无名指和中指下部近掌背处拔出 第二管棉塞，将管口进行火焰灭菌，使其靠近火焰，将接 种环伸入菌种管内，先在无菌生长的琼脂上接触使冷却， 再挑取少许细菌后拉出接种环立即伸人另一管斜面培养基 上，勿碰及斜面和管壁，直达斜面底部，从斜面底部开始 划曲线，向上至斜面顶端为止，管口通过火焰灭菌，将棉 塞塞好；（3）接种完毕，接种环通过火焰灭菌后放下接 种棒，最后在斜面管壁上注明菌名、日期，置37℃温箱中 培养
细菌分离培养
细菌分离培养
四、思考题 1、细菌分离培养和移植时需要注意哪些事 项？ 2、观察细菌菌落，并对其进行描述
四、思考题 1、 细菌分离培养和移植时需要注意哪些事 项？ 2 、观察细菌菌落，并对其进行描述