实验十一 人类细胞中巴氏小体 (X染色质)的观察
人类细胞中巴氏小体 （X染色质）的观察 实验十一
一 实验目的 掌握观察与鉴别X染色质的简易方 法，识别其形态特征及所在部位，为进一 步研究人体染色体的畸变与疾病提供一参 考条件
掌握观察与鉴别X染色质的简易方 法，识别其形态特征及所在部位，为进一 步研究人体染色体的畸变与疾病提供一参 考条件。 一、实验目的
二、实验原理 1、发现于 1949年，加拿大学者Barr等人在雌猫的神经元细胞 核中首次发现一种染色较深的浓缩小体，而在雄猫 则没有这种结构。进一步研究发现，除猫外，其他 雌性哺乳动物（包括人类)也同样有这种显示性别 差异的结构。而且不仅是神经元细胞，在其他细胞 的间期核中也可以见到这一结构。称之为巴氏小体， 也称为X染色质
1、发现： 1949年，加拿大学者Barr等人在雌猫的神经元细胞 核中首次发现一种染色较深的浓缩小体，而在雄猫 则没有这种结构。进一步研究发现，除猫外，其他 雌性哺乳动物（包括人类）也同样有这种显示性别 差异的结构。而且不仅是神经元细胞，在其他细胞 的间期核中也可以见到这一结构。称之为巴氏小体， 也称为X染色质。 二、实验原理
2、莱昂假说： Lyon假说的要点 剂量补偿 (请同学们下去看书了解弄懂) 正常女性的间期细胞核中紧贴核膜内缘有一个染 色较深，大小约为1微米的三角形或椭圆形小体，即X 染色质。间期核内X染色质的数目总是比X染色体的数 目少1。正常女性有两条X染色体，因此只有一个X染色 质；若有三条X染色体，就会有两个X染色质，余此类 推。正常男性只有一条X染色体，所以没有X染色质
2、莱昂假说： Lyon假说的要点 剂量补偿 （请同学们下去看书了解弄懂） 正常女性的间期细胞核中紧贴核膜内缘有一个染 色较深，大小约为1微米的三角形或椭圆形小体，即X 染色质。间期核内X染色质的数目总是比X染色体的数 目少1。正常女性有两条X染色体，因此只有一个X染色 质；若有三条X染色体，就会有两个X染色质，余此类 推。正常男性只有一条X染色体，所以没有X染色质
←一核膜 染色质 核膜 X染色质 X染色质示意图 X染色质光镜图
X染色质 核膜 X染色质 核膜 X染色质示意图 X染色质光镜图
人口腔Barrbody小体
人口腔Barrbody小体
三、实验用品 器材：显微镜，牙签，载玻片，盖玻片，滴管， 试剂：硫堇，甲醇，冰醋酸，蒸馏水，1N的HCL,香 柏油，二甲苯 材料：人口腔粘膜上皮细胞 毛根鞘细胞
三、实验用品 器材：显微镜，牙签，载玻片，盖玻片，滴管， 试剂：硫堇，甲醇，冰醋酸，蒸馏水，1N的HCL，香 柏油，二甲苯 材料：人口腔粘膜上皮细胞 毛根鞘细胞
四、实验步骤 ■口腔颊部粘膜细胞巴氏小体观察 刮取口腔颊部粘膜上皮细胞→涂片→60%冰醋酸固定5分钟 →吸去冰醋酸，用改良苯酚品红染色1-2分钟→压片→镜检 2、发根细胞巴氏小体观察 拔取带毛囊头发一段→45%冰醋酸解离5分钟→剥取毛囊→ 染色2-3分钟→压片观察 在女性间期细胞核内侧靠近核膜处有约1微米大小的反光极 强的颗粒状亮点，即为巴氏小体。材料不同，观察结果可能有 不同，且必须和核仁区别开来（核仁往往离核膜较远或接近核 中央部位)
四、实验步骤 1、口腔颊部粘膜细胞巴氏小体观察 刮取口腔颊部粘膜上皮细胞→涂片→60%冰醋酸固定5分钟 →吸去冰醋酸，用改良苯酚品红染色1-2分钟→压片→镜检 2、发根细胞巴氏小体观察 拔取带毛囊头发一段→45%冰醋酸解离5分钟→剥取毛囊→ 染色2-3分钟→压片观察 在女性间期细胞核内侧靠近核膜处有约1微米大小的反光极 强的颗粒状亮点，即为巴氏小体。材料不同，观察结果可能有 不同，且必须和核仁区别开来（核仁往往离核膜较远或接近核 中央部位）
五、实验结果 1染色质：油镜下可见X小体为一致密的浓染小体，轮廓清晰 约1um,常附着于核膜边缘或靠边内侧，其形态有三角形、 卵形、扁平形等。正常女性间期细胞核中染色质比例约为 30%~50%,男性中则偶尔可见（2%)，且不典型。 2、Barr bodyl的形状
1、X染色质：油镜下可见X小体为一致密的浓染小体,轮廓清晰, 约1um，常附着于核膜边缘或靠边内侧，其形态有三角形、 卵形、扁平形等。正常女性间期细胞核中X染色质比例约为 30%～50%，男性中则偶尔可见（2%），且不典型。 2、Barr body的形状 五、实验结果
六、作业及思考题 1、份别观察男女各30个可数细胞，计算显示X染色质 所占百分比。 2、观察中选绘4-5个典型细胞，示明X染色质的形成和 部位。（正常女性口腔粘膜细胞中约30-50%有一个巴氏小 体，男性则低于1-2%。) 3、简述研究巴氏小体的意义。 思考题：（此题不交） 查阅关于莱昂假说的资料、弄清Lyon假说的要 点及剂量补偿的内容
1、分别观察男女各30个可数细胞，计算显示X染色质 所占百分比。 2、观察中选绘4-5个典型细胞，示明X染色质的形成和 部位。（正常女性口腔粘膜细胞中约30-50%有一个巴氏小 体，男性则低于1-2%。） 3、简述研究巴氏小体的意义。 思考题：（此题不交） 查阅关于莱昂假说的资料、弄清Lyon假说的要 点及剂量补偿的内容。 六、作业及思考题