仪器分析(含实验) 《仪器分析实验》 高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography For Short:HPLC 编写日期:2006年9月
编写日期:2006年9月 《仪器分析实验》 高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography For Short:HPLC 仪器分析(含实验)
实验目的 >了解HPLC仪器基本结构,掌握实验仪器的一般使 用方法; 加深对色谱分离原理的理解,掌握主要实验条件 的选择; 掌握液相色谱定性定量分析技术。 实验内容 反相高效液相色谱法分离测定烷基苯系物 编写日期.2006年9月
编写日期:2006年9月 实验目的 ➢ 了解HPLC仪器基本结构,掌握实验仪器的一般使 用方法; ➢ 加深对色谱分离原理的理解,掌握主要实验条件 的选择; ➢ 掌握液相色谱定性定量分析技术。 实验内容 反相高效液相色谱法分离测定烷基苯系物
实验讲解要点 一、色谱分离原理 二、色谱分析技术 三、HPLC仪器和使用方法 四、HPLC和GC的比较 五、RP-HPLC测定烷基苯化合物原理 建议在实验过程中,对北比前面的气相色谱实验技术,进 一步巩固和提高所学知识和实验技能。 编写日期:2006年9月
编写日期:2006年9月 实验讲解要点 一 、色谱分离原理 二、色谱分析技术 三、 HPLC仪器和使用方法 四、 HPLC和GC的比较 五、 RP-HPLC测定烷基苯化合物原理 建议在实验过程中,对比前面的气相色谱实验技术,进 一步巩固和提高所学知识和实验技能
一、色谱分离原理 色谱法是一类高效分离方法。 >色谱分离原理是什么? >HPLC和GC仪器的分离部件是什么? 它们有什么不同? >HPLC和GC的主要差别? 编写日期,2006年9月
编写日期:2006年9月 一、色谱分离原理 色谱法是一类高效分离方法。 ➢ 色谱分离原理是什么? ➢ HPLC和GC仪器的分离部件是什么? 它们有什么不同? ➢ HPLC和GC的主要差别?
二、色谱分杯技术 色谱分析是一类重要的仪器分析方法,其特 点是分离能力强、定量准确,适合于复杂样 品或多组分样品分析。 >常见的色谱定性方法? >色谱定量分析的依据? >气相色谱实验采用那种定量分析方法?有 何特点? >HPLC和GC的应用特点 编写日期:2006年9月
编写日期:2006年9月 二、色谱分析技术 色谱分析是一类重要的仪器分析方法,其特 点是分离能力强、定量准确,适合于复杂样 品或多组分样品分析。 ➢ 常见的色谱定性方法? ➢ 色谱定量分析的依据? ➢ 气相色谱实验采用那种定量分析方法?有 何特点? ➢ HPLC和GC的应用特点
三、HPLC仪器和实验技术 >HPLC仪器的基本组分? >主要部件的工作原理? >HPLC和GC仪器的比较 >HPLC和GC实验技术的比较 >有人认为色谱分析实验很简单,就是打一 针样品而已,你是怎么认为的?你是否给病 人打过针?为什么没有? 编写日期.2006年9月
编写日期:2006年9月 三、 HPLC仪器和实验技术 ➢ HPLC仪器的基本组分? ➢ 主要部件的工作原理? ➢ HPLC和GC仪器的比较 ➢ HPLC和GC实验技术的比较 ➢ 有人认为色谱分析实验很简单,就是打一 针样品而已,你是怎么认为的?你是否给病 人打过针?为什么没有?
四、高效液相色谱仪的基本组成 hypodermic syrnge 分几个系统? precolumn injector 和GC有何不同? pump mixing chamber fittings column 高压泵工作原理? solvents GC是如何进样的? 记录系统和GC一样 detector M 吗? de ta system 编写日期:2006年9月
编写日期:2006年9月 四、高效液相色谱仪的基本组成 分几个系统? 和GC有何不同? 高压泵工作原理? GC是如何进样的? 记录系统和GC一样 吗?
OUTLET BALL VALVE PISTON INLET BALL VALVE 高压泵工作原理(单向阀) >高压液体有危险吗? >高压泵如何改变流速? 编写日期:2006年9月
编写日期:2006年9月 高压泵工作原理(单向阀) ➢ 高压液体有危险吗? ➢ 高压泵如何改变流速?
Columr Load Inject 六通阀工作原理(流路切换) >HPLC进样针与GC有何不同? >为什么HPLC与GC进样要求不同? 编写日期:2006年9月
编写日期:2006年9月 高压泵工作原理(单向阀) ➢ HPLC进样针与GC有何不同? ➢ 为什么HPLC与GC进样要求不同? 六通阀工作原理(流路切换)
五、RP-HPLC测定烷基苯化合物原理 >什么是正相色谱?什么是反相色谱? >什么是键合固定相? >预测一下苯和甲苯在C18反相柱上的保留 顺序? >什么是反相色谱疏水机理? >本实验的主要色谱分析条件有那些? >流动相组成对保留时间有何影响?举例说 明? >改变检测波长对色谱图有何影响? 编写日期:2006年9月
编写日期:2006年9月 五、 RP-HPLC测定烷基苯化合物原理 ➢ 什么是正相色谱?什么是反相色谱? ➢ 什么是键合固定相? ➢ 预测一下苯和甲苯在C18反相柱上的保留 顺序? ➢ 什么是反相色谱疏水机理? ➢ 本实验的主要色谱分析条件有那些? ➢ 流动相组成对保留时间有何影响?举例说 明? ➢ 改变检测波长对色谱图有何影响?