实验十一实验室便常规检验 目的和要求 了解粪便检验的内容，掌握酸碱度及粪便潜血检验的方法。对粪中寄生虫卵的检查，应有初步的认 方法和内容 1器材酸 方法 PH试 取PH试纸1条 ,用蒸馏水浸湿（若粪便稀软则不必浸湿） 板进行比较，即测得粪使的P"也可用“手枪式酸度计” 1原理 2.试剂与器 液潜血检验同。 (1)联苯胺冰醋酸液联苯胺约0.1g加冰醋酸约2ml,振荡，溶解。临用时配制，不能久存。 (2)30%过氧化氢 (3)载玻片，镊子，酒精灯，小试管等。 3.操作 用竹镊子在粪便的不同部分，选取绿豆大小的粪块，置洁净的载玻片上涂成直径约1©m的 范围。如粪 遇和涂 名玻片在酒精打上缓缓通时藏20滴及新化流0一20滴，用火类技 以破坏粪中的过氧化氢酶。 (3)冷后， 滴加联苯胺冰醋酸液10 合，将玻片置 4.根据颜色的出现时间，用“士”或1~3个“+”号表示结果。详见表11一1。 5注意事项 (1)所用器材应清洁无血迹。 定要将粪便标本加热处理，否则可呈现假阳性。 (3)肉食动物应禁食3天肉类食物， 表11一1粪便潜血检验结果判定表 符号 蓝色开始出现的时间 符号 蓝色开始出现的时间 (g) (g) 60 44 15 十 30 ++十 3 (4)联苯胺、过氧化氢液贮存时间过久者，不易发生颜色反应。 (三)粪中病理混杂物的观察 粪中除饲料残渣外，在病理情况下，往往混有血细胞、脓细胞、上皮细胞等物。肉食动物若发生 阻塞性黄疸，还可见到 大量中性脂肪 涂片刀 量生理盐水 火柴棒混合 并涂成薄片，以能透过书报字迹为宜，加盖玻片，用低倍镜观察整个图片，然后用高倍镜仔细观 红细胞为小而圆、无细胞核的发亮物，常散在或与白细胞同时出现 （2)白细 为形 有核 3)脓球结构模糊 核隐约 平上 或氢氧化钠中不 但加热或用乙可溶化 6)游离脂肪酸为无色细长针状结晶或块状，苏丹染色块状呈红色，针状结晶不着色，加 冷务福染色不者色，降冷乙可使其溶化外，血热、氢气化 热、冷乙醇、 钠和乙醚都不会使其溶化
实验十一 实验室便常规检验 目 的 和 要 求 了解粪便检验的内容，掌握酸碱度及粪便潜血检验的方法。对粪中寄生虫卵的检查，应有初步的认 识。 方 法 和 内 容 （一）粪便酸碱度测定 1.器材与试剂 广泛PH试纸、酸度计等。 2.操作方法 常用PH试纸法。取PH试纸1条，用蒸馏水浸湿（若粪便稀软则不必浸湿），贴于粪 便表面数秒钟，取下纸条与PH标准色板进行比较，即可测得粪便的PH。也可用“手枪式酸度计”， 将电极直接与粪球接触，即可读出PH。 （二）粪便潜血检验 1.原理 与尿液潜血检验同。 2.试剂与器材 （1）联苯胺冰醋酸液 联苯胺约0.1g，加冰醋酸约2ml，振荡，溶解。临用时配制，不能久存。 （2）30％过氧化氢溶液。 （3）载玻片，镊子，酒精灯，小试管等。 3.操作方法 （1）用竹镊子在粪便的不同部分，选取绿豆大小的粪块，置洁净的载玻片上涂成直径约1cm的 范围。如粪便干燥，可加少量蒸馏水调和涂布。 （2）将玻片在酒精灯上缓缓通过数次，以破坏粪中的过氧化氢酶。 （3）冷后，滴加联苯胺冰醋酸液10～20滴及新鲜30％过氧化氢溶液10～20滴，用火柴棒搅动混 合，将玻片置于白色背景上观察。 4.根据颜色的出现时间，用“±”或1～3个“＋”号表示结果。详见表11－1。 5.注意事项 （1）所用器材应清洁无血迹。 （2）一定要将粪便标本加热处理，否则可呈现假阳性。 （3）肉食动物应禁食3天肉类食物。 表11—1 粪便潜血检验结果判定表 符号 蓝色开始出现的时间 （s） 符号 蓝色开始出现的时间 （s） ± 60 ＋＋ 15 ＋ 30 ＋＋＋ 3 （4）联苯胺、过氧化氢液贮存时间过久者，不易发生颜色反应。 （三）粪中病理混杂物的观察 粪中除饲料残渣外，在病理情况下，往往混有血细胞、脓细胞、上皮细胞等物。肉食动物若发生 阻塞性黄疸，还可见到大量脂肪酸；胰腺疾病时，因胰液分泌紊乱，出现大量中性脂肪。 1.粪便涂片方法 由粪便不同部分采取少许粪块，置载玻片上，加少量生理盐水，用火柴棒混合 并涂成薄片，以能透过书报字迹为宜，加盖玻片，用低倍镜观察整个图片，然后用高倍镜仔细观 察。 2.观察 （1）红细胞 为小而圆、无细胞核的发亮物，常散在或与白细胞同时出现。 （2）白细胞 为圆形、有核、结构清晰的细胞，常分散存在。 （3）脓球 结构模糊不清，核隐约可见，常常聚集在一起甚至成堆存在。 （4）上皮细胞 柱状上皮细胞来自肠黏膜，扁平上皮细胞来自肛门附近。 （5）中性脂肪 镜检淡黄色折光性强，呈滴状或无色有折光块状，苏丹Ⅲ染色为红色，在冷乙醇 或氢氧化钠中不溶，但加热或用乙醚可溶化。 （6）游离脂肪酸 为无色细长针状结晶或块状，苏丹Ⅲ染色块状呈红色，针状结晶不着色，加 热、冷乙醇、氢氧化钠和乙醚均可使其溶化。 （7）结合脂肪酸 为针束状或块状，苏丹Ⅲ染色不着色，除冷乙醇可使其溶化外，加热、氢氧化 钠和乙醚都不会使其溶化
(四)粪中寄生虫卵的观察 1原理密度较小的线虫卵、缘虫卵及球虫卵囊等，可悬浮在饱和盐水中；密度较大的吸虫卵，可 高心新需法处宝美便，涂制在我片上发案： (1)载玻片、盖玻片、小烧杯、60目金属铜筛、显微镜等。 (2)饱和食盐水蒸馏水100ml与氯化钠30~35g混合，煮沸溶解，冷后除去未溶解的氯化钠，即 得 ()直接涂片法本法是最简便和最常用的虫卵检查法，但检出率很低 ,检查时在 洁净的载片上 滴少许50%的甘油水溶液， 中放少量的被检粪便 后用火柴杆或牙签等加以搅拌，去掉粪便 中硬固的流子盐使载片 层均 的龚液 然后上蔬 2) 0'片 水漂浮 容积约为50ml烧杯内，加 包和盐 覆 静置30m 成 心翻转载玻 ,加盖玻片镜检 约5g,加50ml水搅拌均匀，用金属筛过滤。滤液静置沉淀20 40m 保留沉渣，再加水混匀，再沉淀，如此反复操作直到上层液 体透明后观等 寄生里里卵大涂片 生虫图谱所描绘的各种省禽寄生虫虫卵进行辨认 检观察时注意形状、大小、卵壳及卵盖、卵细胞等，按照奇 4.注意事项 (1)制备涂片不可太厚，以能透视书报字迹为宜 (2)先以低倍镜观察，按上下 左右方向逐次移动以检查全片，必要时转换高倍镜观察
（四）粪中寄生虫卵的观察 1.原理 密度较小的线虫卵、绦虫卵及球虫卵囊等，可悬浮在饱和盐水中；密度较大的吸虫卵，可 离心沉淀。用这些方法处理粪便，涂制在载片上观察。 2.器材与试剂 （1）载玻片、盖玻片、小烧杯、60目金属铜筛、显微镜等。 （2）饱和食盐水 蒸馏水100ml与氯化钠30～35g混合，煮沸溶解，冷后除去未溶解的氯化钠，即 得饱和盐水。 3.操作方法 （1）直接涂片法 本法是最简便和最常用的虫卵检查法，但检出率很低。检查时在洁净的载片上 滴少许50％的甘油水溶液，在其中放少量的被检粪便，然后用火柴杆或牙签等加以搅拌，去掉粪便 中硬固的渣子，使载片上有一层均匀的粪液，然后盖上盖玻片镜检。 （2）饱和盐水漂浮法 于容积约为50ml烧杯内，加少量饱和盐水，用竹签挑取不同部位的粪便约 5～10g，在饱和盐水中调成糊状，再加饱和盐水，搅成稀水样，挑去大块粪渣，加饱和盐水至满， 覆以载玻片。静置30min后，小心翻转载玻片，加盖玻片镜检。 （3）沉淀法 取被检粪便约5g，加50ml水搅拌均匀，用金属筛过滤。滤液静置沉淀20～40min或 用离心机离心2～3min后，倾去上清液，保留沉渣，再加水混匀，再沉淀，如此反复操作直到上层液 体透明后，弃去上清液，吸取沉渣涂片镜检。 （4）观察 寄生虫虫卵大小极不一致，观察时注意形状、大小、卵壳及卵盖、卵细胞等，按照寄 生虫图谱所描绘的各种畜禽寄生虫虫卵进行辨认。 4.注意事项 （1）制备涂片不可太厚，以能透视书报字迹为宜。 （2）先以低倍镜观察，按上下、左右方向逐次移动以检查全片，必要时转换高倍镜观察