实验八实验室血常规检验（一） (红细胞、白细胞计数、红细胞沉降速度、血红蛋白、红细胞压积容量的检验方法)》 目的和要求 掌握红细胞及白细胞计数、血沉、血红蛋白、红细胞压积容量的检验操作方法。要求按本书所 选用的方法及注意事项进行操作，所得结果应基本正确。 内容和方法 纪细惑计数方法根多，常用显微镜计数法 1原理血液经稀释后，充入血细胞 数板， 用显微镜观察，计数一定容积内的红细胞数并换算成 每升血液中的红细胞数。 2.器材与试 (1)计数板计数各种血细胞专用量具。临床上最常用的是改良纽巴氏计算板。它是由一块特制 计数池两侧各有1条支柱，将盖玻片 的缝隙。在各池的平面玻璃上，刻划有 9m2面积的刻 我别 为9个大方格 每格长 宽各lmm 面积1m， 体积0 量0.1μ 为16个中方格 400个小方格，此为计数红细胞之用，见图8.和图82 计数池划线 24mm 2)盖玻片 专用于计数板的盖玻片呈长方形，厚度为0.4~0.7mm。通常大小是 或选用一次性定量10u1或20μ1毛细玻璃管、5ml吸管、中试管 释 十数器等。 化钠溶液 yem 氯化 酸使溶液成 晶硫 ,使红细胞不成串钱状) 5.0g 氯化高汞（固定红细胞，并具防腐作用 0.5g 200m 图8一2计数池的正面和侧面 3操作方法 红细胞稀释液3 威流管吸取全样品至0刻度处或吸血至刻度10处，红细跑稀释液用 2ml) 3)擦去吸管外壁多余的血液 将此血液吹入试管底部，再吸、吹数次，以洗出沙利氏管内 附的血细屏 (4)用吸管吸取以 颠倒混每汁物池与盖玻片接触处，即可白姚流入计数池内。注音一 释好的血液 充液不可过多或过少， 过多则溢出而流入两侧槽内，过少则计数池中形成空气泡，致使无法计数。 计数池充液法见图8-3。 图8一3计数室充液法 图8一4红细胞计数顺 (5)充池后待2~3mn,用低倍镜依次计数中央大方格内的四角和正中5个中方格内的红细胞。 计数时，先用低倍镜，光线要稍微暗些，找到计数池的格子后，把中央的大方格置于视野中，然 后转用高倍镜，在此中央大方格内选择四角与最中间的5个中方格（或用对角线的方法数5个中方 格)，每一中方格有16个小方格，所以总共计数80个小方格。计算时要注意压在左边双线上的红细 胞应计数在内，压在右边双线上的红细胞则不计数在内：同样，压在上线的计入，压在下线的不计 入，此即所谓“数左不数右，数上不数下”的计数法则。计数顺序见图84。 4.计算 5个中方格内红细胞数×5×10×200×10=5个中方格内红细胞数×1010
实验八 实验室血常规检验（一） （红细胞、白细胞计数、红细胞沉降速度、血红蛋白、红细胞压积容量的检验方法） 目 的 和 要 求 掌握红细胞及白细胞计数、血沉、血红蛋白、红细胞压积容量的检验操作方法。要求按本书所 选用的方法及注意事项进行操作，所得结果应基本正确。 内 容 和 方 法 （一）红细胞计数 红细胞（RBC）计数方法很多，常用显微镜计数法。 1.原理 血液经稀释后，充入血细胞计数板，用显微镜观察，计数一定容积内的红细胞数并换算成 每升血液中的红细胞数。 2.器材与试剂 （1）计数板 计数各种血细胞专用量具。临床上最常用的是改良纽巴氏计算板。它是由一块特制 的厚玻璃板构成，通过H形槽沟将其分为上下两个相同计数池。计数池两侧各有1条支柱，将盖玻片 盖于计数池的两侧支柱上，盖片与计数池间形成0.1mm高度的缝隙。在各池的平面玻璃上，刻划有 9m2面积的刻度，分为9个大方格，每格长、宽各1mm，面积1m2，体积0.1m3，容量0.1μl。四角每一 大方格都用单线划分为16个中方格，为计数白细胞之用。中央一个大方格用双线划分为25个中方 格，每个中方格又划分为16个小方格，共计400个小方格，此为计数红细胞之用，见图8-1和图8-2。 图8—1 计数池划线图 （2）盖玻片 专用于计数板的盖玻片呈长方形，厚度为0.4～0.7mm。通常大小是 24mm×20mm×0.6mm。 （3）沙利氏吸管或选用一次性定量10μl或20μl毛细玻璃管、5ml吸管、中试管。 （4）显微镜、计数器等。 （5）试剂稀释液 ①0.85％氯化钠溶液。 ②赫姆（Hayem）氏液。 氯化钠（使溶液成为等渗） 1.0g 结晶硫酸钠（增加溶液的密度，使红细胞不成串钱状） 5.0g 氯化高汞（固定红细胞，并具防腐作用） 0.5g 蒸馏水 200ml 溶解后加1％伊红溶液1滴，使呈红色，以便识别。 以上两种稀释液，任选一种即可。 图8—2 计数池的正面和侧面 3.操作方法 （1）取小试管1支，加红细胞稀释液3.98ml。 （2）用沙利氏吸血管吸取全血样品至20μl刻度处（或吸血至刻度10μl处，红细胞稀释液用 2ml）。 （3）擦去吸管外壁多余的血液，将此血液吹入试管底部，再吸、吹数次，以洗出沙利氏管内黏 附的血细胞，然后试管口加塞，颠倒混合数次。 （4）用吸管吸取以稀释好的血液，放于计数池与盖玻片接触处，即可自然流入计数池内。注意 充液不可过多或过少，过多则溢出而流入两侧槽内，过少则计数池中形成空气泡，致使无法计数。 计数池充液法见图8-3。 图8—3 计数室充液法 图8—4 红细胞计数顺序 （5）充池后待2～3min，用低倍镜依次计数中央大方格内的四角和正中5个中方格内的红细胞。 计数时，先用低倍镜，光线要稍微暗些，找到计数池的格子后，把中央的大方格置于视野中，然 后转用高倍镜，在此中央大方格内选择四角与最中间的5个中方格（或用对角线的方法数5个中方 格），每一中方格有16个小方格，所以总共计数80个小方格。计算时要注意压在左边双线上的红细 胞应计数在内，压在右边双线上的红细胞则不计数在内；同样，压在上线的计入，压在下线的不计 入，此即所谓“数左不数右，数上不数下”的计数法则。计数顺序见图8-4。 4.计算 5个中方格内红细胞数×5×10×200×106＝5个中方格内红细胞数×1010
式中5个中方格（即80个小方格）内的红细胞总数 ×5- ·5个中方格换算成1个大方格。 ×10- -1个大方格容积为0.1μ1，划算成1.0μ1 ×200- ,血液的稀释倍敖 ×106 由微升换算成升」 5.注意事项 1)红细胞计数是二项细致的工作，稍有粗心大意，就要快 就会引起计数不准。为避免计数不准，关 键是防凝、 坊止血液部分凝周 取抗凝 采血中应及时将血液与抗凝剂混匀。防 溶是指防止过分振摇而使红细胞溶解，或是器材用水洗后未用生理盐水冲洗而发生溶血，使计数结 果偏低。取样正确是指吸血10μ1或20μ一定要准确，吸血管外的血液要擦去，吸血管内的血液要全 部洗入稀释液中：稀释液的用量要准：充液量不可过多或过少，过多可使血盖片浮起，过少则计数 室中形成小的空气泡，使计数结果偏低甚至无法计数。此外，显微镜台未保持水平，使计数室内的 液体流向 作上的血管数精装每次用完后，先用清水吸吹数次，然后 戈红细胞稀释管 次数次 下次使用。血细胞计数板用蒸馏水冲洗后，用 即可，切不可用粗布擦拭，也不可用乙醚、酒精等溶剂冲洗。 健康动物红细胞数见表8-1。 表8一1健康动物红细胞数（万/位方毫米） 动物种类 平均数值 变动范围 00700 牛（包本牛） 600 900 8001100 山羊 1300 1000-1600 600 500~700 350 250-500 (二）白细胞计数 理 计数常 显微镜计数法 液将红细胞破坏后 ,混均充入计数池中，在显微镜下计数一定容积中的白细胞 数，经 求得 的相臀。细胞稀释液可用2%的冰醋酸液，内加%结品紫液1清。以 总数 与稀释液区别。 作方法 取小 入白细胞稀释液0.38ml。 学 些吸取被检爽式管中，反复吸取数次，以洗净管内所黏附的白细胞，充入 处 (4)用毛细吸管吸取被稀释的血液，充入己盖好盖玻片的计数室内，静置2~3mi后，待白细胞 下沉 (5)用低倍镜计数四角大格内的白细胞。计数方法和原则与红细胞计数相同。 4.计算 白细胞数L=四个大格白细胞数÷4×10×20×105 即：白细胞数L=四个大方格内白细胞数×50×10 式中：4 为每个大格内白细胞平均数。 ×10 一因一个大方格溶剂为0.1μ1，换算为1.0μ1。 ×20 ·血液稀释倍数。 X100 -将1u换算为L 5.注意事项与红细胞计数的注意事项同。初学者容易将尘埃异物与白细胞混淆，可用高倍镜观 察，白细胞有细胞核的结构，而尘埃异物的形状不规则，无细胞结构。 6.正常参考值健康动物白细胞数见表8-2。 表8一2健康动物白细胞数（个/位方毫米）
式中 5个中方格（即80个小方格）内的红细胞总数 ×5 —— 5个中方格换算成1个大方格。 ×10 —— 1个大方格容积为0.1μl，划算成1.0μl ×200 —— 血液的稀释倍数。 ×106 —— 由微升换算成升。 5.注意事项 （1）红细胞计数是一项细致的工作，稍有粗心大意，就会引起计数不准。为避免计数不准，关 键是防凝、防溶、取样正确。防凝是指采取末梢血液的动作要快，防止血液部分凝固。取抗凝血 时，抗凝剂的量要合适，不可过少使血液部分呈小块凝集；采血中应及时将血液与抗凝剂混匀。防 溶是指防止过分振摇而使红细胞溶解，或是器材用水洗后未用生理盐水冲洗而发生溶血，使计数结 果偏低。取样正确是指吸血10μl或20μl一定要准确，吸血管外的血液要擦去，吸血管内的血液要全 部洗入稀释液中；稀释液的用量要准；充液量不可过多或过少，过多可使血盖片浮起，过少则计数 室中形成小的空气泡，使计数结果偏低甚至无法计数。此外，显微镜台未保持水平，使计数室内的 液体流向一侧，这些操作上的错误均可使计数结果不准确。 （2）器械清洗方法 沙利氏吸血管或红细胞稀释管，每次用完后，先用清水吸吹数次，然后在蒸 馏水、酒精、乙醚中，按次序分别吸吹数次，干后备下次使用。血细胞计数板用蒸馏水冲洗后，用 绒布轻轻擦干即可，切不可用粗布擦拭，也不可用乙醚、酒精等溶剂冲洗。 6.正常参考值 健康动物红细胞数见表8-1。 表8—1健康动物红细胞数（万/立方毫米） 动物种类 平均数值 变动范围 马 650 600~700 牛（包括水牛） 600 550~700 绵羊 900 800~1100 山羊 1300 1000~1600 猪 600 500~700 鸡 350 250~500 （二）白细胞计数 白细胞（WBC）计数常用显微镜计数法。 1.原理 用稀释液将红细胞破坏后，混均充入计数池中，在显微镜下计数一定容积中的白细胞 数，经换算求得每升血液中的白细胞总数。 2.器材与试剂 与红细胞计数相同。白细胞稀释液可用2％的冰醋酸液，内加1％结晶紫液1滴，以 便与红细胞稀释液区别。 3.操作方法 （1）取小试管1支，加入白细胞稀释液0.38ml。 （2）用沙利氏吸血管吸取被检血至20μl处。 （3）擦去管外黏附的血液，吹入小试管中，反复吸取数次，以洗净管内所黏附的白细胞，充入 振荡混合。 （4）用毛细吸管吸取被稀释的血液，充入已盖好盖玻片的计数室内，静置2～3min后，待白细胞 下沉。 （5）用低倍镜计数四角大格内的白细胞。计数方法和原则与红细胞计数相同。 4.计算 白细胞数/L＝四个大格白细胞数÷4×10×20×106 即：白细胞数/L＝四个大方格内白细胞数×50×106 式中÷4 —— 为每个大格内白细胞平均数。 ×10 —— 因一个大方格溶剂为0.1μl，换算为1.0μl。 ×20 —— 血液稀释倍数。 ×106 —— 将1μl换算为1L。 5.注意事项 与红细胞计数的注意事项同。初学者容易将尘埃异物与白细胞混淆，可用高倍镜观 察，白细胞有细胞核的结构，而尘埃异物的形状不规则，无细胞结构。 6.正常参考值 健康动物白细胞数见表8-2。 表8—2健康动物白细胞数（个/立方毫米）
动物种类 平均数值 变动范围 8000 7000-9000 黄牛、奶牛 7500 7000-8000 880 8000000 00- 20000 18000-30000 (三)红细胞沉降速度的测定 也称血沉(ESR) 是指抗凝血在特制的血沉管中在单位时间内，红细胞下降的毫米数。其方法 很多，主要介绍魏氏和涅氏两种方法。 1原理红细胞沉降速度与红细胞钱串状的形成、红细胞数目的多少、血浆蛋白的组成以及测定时 室温的变化、血沉管倾斜的程度等因素有关。 2.器材与试剂 (1)魏氏血沉管、特制血沉架、涅氏血沉管、采血针头等。 (2)抗凝剂109mmol/L枸橼酸钠液。 3操作方法 (1)魏氏法魏氏血沉管长30cm,内径为2.5mm,管壁有200个刻度，每一刻度之间距离为 1mm,附有特制的血沉架见图8-5。测定方法如下： ①取3.8%枸橼酸钠液0.4ml置于小试管中。 ②自颈静脉采血1.6ml,加入上述试管，轻轻混合。 ③用血沉管吸取抗凝血至刻度0处，用棉花擦去管外血液，直立于血沉架上。 ④经15、30、45、60min,分别记录红细胞沉降的刻度数，用分数形式表示（分母代表时间，分 子代表沉降mm数)。 图8 5魏氏血沉架装置 (2)涅氏法涅氏血沉管有两种， 种仅有100个刻度，称为“六五”型血沉管：另一种除有100 个刻度供测定血沉用之外，一侧自上而下标有20~125，用来表示血红蛋白的百分数，管中央自上而 下标有1~13，用来表示红细胞数（百万/mm3),这种管子特称为三用血沉管。二者测定血沉的结果 是一致的，故可通用。测定方法是：向涅氏血沉管内加入10%EDTA二钠液4滴或加入草酸钠粉0.02 ~0.04g。自颈静脉采血，沿管壁接取血液至刻度“0”处，轻轻颠倒混合数次。垂直立于试管架上， 经15、30、45、60min,分别读取红细胞沉降的数值。 4.注意事项 (1)血沉管必须垂直静立（牛、羊的血液，血沉速度很慢，可倾斜60°，以加速沉降。注意， 其正常值也相应增加)：血液柱面上不应有气泡：抗凝剂的量要按规定加入。 (2)报告结果时，必须注明是用什么方法测定的。 (四)血红蛋白的测定 血红蛋白(Homoglobin,Hb)的测定常用沙利氏(Sahli)比色法， 1.原理表面活性剂溶解红细胞膜，释放血红蛋白。血红蛋白被高铁氟化钾氧化为高铁血红蛋白 (H),在一定的PH下，H与氰离子(CNˉ)结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白 HiCN在波长54Onm处有一吸收峰，测定其吸光度，可求得血红蛋白浓度(gL)。 2.器材与试剂 (1)分光光度计 (2)试剂HiCN转化液。 氯化钾 50mg 高铁氧化钾 200m 无水磷酸二氢钾 114m TritonX-100(或其他非离子表面活性剂) 10m 蒸馏水 1000ml 配成后用滤纸过滤，置棕色瓶中，塞紧后保存于冷暗处，但勿使结冰，可保存数月。此液应透 明、淡黄色，pH在7.0~7.4之间，以蒸馏水作空白，用540nm比色，吸光度应小于0.001。若变浑、变 绿或发生浑浊则应废弃。 3.操作方法 (1)取血液20μ1加入5ml血红蛋白转化液中，充分混匀，静置5min
动物种类 平均数值 变动范围 马 8000 7000~9000 黄牛、奶牛 7500 7000~8000 水牛 8800 8000~9000 绵羊 8500 8000~9500 山羊 10000 7000~13000 猪 13000 11000~16000 鸡 20000 18000~30000 （三）红细胞沉降速度的测定 也称血沉（ESR），是指抗凝血在特制的血沉管中在单位时间内，红细胞下降的毫米数。其方法 很多，主要介绍魏氏和涅氏两种方法。 1.原理 红细胞沉降速度与红细胞钱串状的形成、红细胞数目的多少、血浆蛋白的组成以及测定时 室温的变化、血沉管倾斜的程度等因素有关。 2.器材与试剂 （1）魏氏血沉管、特制血沉架、涅氏血沉管、采血针头等。 （2）抗凝剂 109mmol/L枸橼酸钠液。 3.操作方法 （1）魏氏法 魏氏血沉管长30cm，内径为2.5mm，管壁有200个刻度，每一刻度之间距离为 1mm，附有特制的血沉架见图8-5。测定方法如下： ①取3.8％枸橼酸钠液0.4ml置于小试管中。 ②自颈静脉采血1.6ml，加入上述试管，轻轻混合。 ③用血沉管吸取抗凝血至刻度0处，用棉花擦去管外血液，直立于血沉架上。 ④经15、30、45、60min，分别记录红细胞沉降的刻度数，用分数形式表示（分母代表时间，分 子代表沉降mm数）。 图8—5 魏氏血沉架装置 （2）涅氏法 涅氏血沉管有两种，一种仅有100个刻度，称为“六五”型血沉管；另一种除有100 个刻度供测定血沉用之外，一侧自上而下标有20～125，用来表示血红蛋白的百分数，管中央自上而 下标有1～13，用来表示红细胞数（百万/mm3），这种管子特称为三用血沉管。二者测定血沉的结果 是一致的，故可通用。测定方法是：向涅氏血沉管内加入10％EDTA二钠液4滴或加入草酸钠粉0.02 ～0.04g。自颈静脉采血，沿管壁接取血液至刻度“0”处，轻轻颠倒混合数次。垂直立于试管架上， 经15、30、45、60min，分别读取红细胞沉降的数值。 4.注意事项 （1）血沉管必须垂直静立（牛、羊的血液，血沉速度很慢，可倾斜60°，以加速沉降。注意， 其正常值也相应增加）；血液柱面上不应有气泡；抗凝剂的量要按规定加入。 （2）报告结果时，必须注明是用什么方法测定的。 （四）血红蛋白的测定 血红蛋白（Homoglobin，Hb）的测定常用沙利氏（Sahli）比色法。 1.原理 表面活性剂溶解红细胞膜，释放血红蛋白。血红蛋白被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白 （Hi），在一定的PH下，Hi与氰离子（CN–）结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白 （HiCN）。HiCN在波长540nm处有一吸收峰，测定其吸光度，可求得血红蛋白浓度（g/L）。 2.器材与试剂 （1）分光光度计。 （2）试剂HiCN转化液。 氰化钾 50mg 高铁氰化钾 200mg 无水磷酸二氢钾 114mg TritonX－100（或其他非离子表面活性剂） 1.0ml 蒸馏水 1000ml 配成后用滤纸过滤，置棕色瓶中，塞紧后保存于冷暗处，但勿使结冰，可保存数月。此液应透 明、淡黄色，pH在7.0～7.4之间，以蒸馏水作空白，用540nm比色，吸光度应小于0.001。若变浑、变 绿或发生浑浊则应废弃。 3.操作方法 （1）取血液20μl加入5ml血红蛋白转化液中，充分混匀，静置5min
(2)用分光光度计比色，波长540nm,光径1cm,以转化液或蒸馏水作为空白，测定吸光度 (A)。 4.注意事项 (1)可用末梢血液直接测定，静脉血按每毫升血液1.5 ngEDTA二钠的比例抗凝，不可用肝素抗 凝（可致混浊） (2)HCN法结果准确可靠，操作简便，但试剂中KCN为剧毒，在配制和保存过程中，应提高警 惕，防止污染。用于大量标本时，应注意废液处理，可用解毒液解毒，即按每升加次氯酸钠3.5混 匀后敞开过夜，使CN~氧化成CO2和N2挥发后，在排入下水道。 5.计算 血红蛋白(gL)=测定管吸光度×(64458÷44000)×251 =测定吸光度×367.7 式中64458 目前国际公认的血红蛋白平均分子量。 44000 25 将售际直液标准化委员会公布的血红蛋白摩尔吸光度。 6.正常参考值健康动物血红蛋白参考值见表8-3 表8一3动物血红蛋白正常值 动物和种尖 血红蛋白值（克/100ml) 马、骡 11.0(9.013.0 10.0(9.0≈11.0 g8880 猪鸡 120 12.5(10.014.5 红 容 理在1 度玻c 火抗凝 读取红细胞 即为红细胞压积容量】 2.器材和试 所占的百分比， 泪氏 答壁右100个 侧自上而下标有0~ 10,供测定血沉用 度的小玻璃管代替 (2)长针头及胶皮乳头选用长12~15cm的针头，将针尖剪去并磨平，针柄部接以胶皮乳头。也 可用细长微细吸管代替 "(3)转速能达4000rmin。 3.操作方法 (1)用长针头吸满抗凝血，插入温氏管底部，轻捏胶皮乳头，自下而上挤入血液至刻度10处。 (2)置离心机中，以3000r/min的速度离心30~45min(牛、羊的血液离心45min),取出观察， 记录红细胞层高度，再离心5mn,如与第一次离心的高度一致，此时红细胞柱层所占的刻度数，即 为PCV数值，用百分数表示。 图8一6温氏红细胞压积测定管及冲液长针头 4.注意事项 (1)温氏管及充液用具必须干燥，以免溶血。 (2)离心时，离心机的转速必须达到3000rmin以上，并遵守所规定的时间。 (3)用一般离心机离心后，红细胞层呈斜面，读取时应取斜面12处所对应的刻度数。血浆与红 细胞层之间的灰白层是白细胞与血小板组成，不应计算在内。 5正常参老值名种动物PCV正常值在30%一40%之间
（2）用分光光度计比色，波长540nm，光径1cm，以转化液或蒸馏水作为空白，测定吸光度 （A）。 4.注意事项 （1）可用末梢血液直接测定，静脉血按每毫升血液1.5mgEDTA二钠的比例抗凝，不可用肝素抗 凝（可致混浊）。 （2）HiCN法结果准确可靠，操作简便，但试剂中KCN为剧毒，在配制和保存过程中，应提高警 惕，防止污染。用于大量标本时，应注意废液处理，可用解毒液解毒，即按每升加次氯酸钠3.5ml混 匀后敞开过夜，使CN–氧化成CO2和N2挥发后，在排入下水道。 5.计算 血红蛋白（g/L）＝测定管吸光度×（64 458÷44 000）×251 ＝测定吸光度×367.7 式中 64 458 —— 目前国际公认的血红蛋白平均分子量。 44 000 —— 1965年国际血液标准化委员会公布的血红蛋白摩尔吸光度。 251 —— 稀释倍数。 6.正常参考值 健康动物血红蛋白参考值见表8-3。 表8—3动物血红蛋白正常值 动物种类 血红蛋白值（克/100ml） 马、骡 11.0（9.0～13.0） 牛 10.0（9.0～11.0） 水牛 8.3（8.0～9.0） 羊 9.8（7.8～11.6） 猪 10.5（9.5～12.0） 鸡 12.5（10.0～14.5） （五）红细胞压积容量（PCV）测定 红细胞压积容量（packed cell volum，PCV）又叫压容和比容，是一种简单、实用的检查方法。 1.原理 在100刻度玻璃管中，充入抗凝血，经一定时间离心后，红细胞下沉并紧压于玻璃管中， 读取红细胞柱所占的百分比，即为红细胞压积容量。 2.器材和试剂 （1）温氏（Wiritrobe）管 管长11cm，内径约2.5mm，管壁有100个刻度。一侧自上而下标有0～ 10，供测定血沉用，另一测标有10～0，供测定比容用见图8-6。如无这种特制的管子，可用有100刻 度的小玻璃管代替。 （2）长针头及胶皮乳头 选用长12～15cm的针头，将针尖剪去并磨平，针柄部接以胶皮乳头。也 可用细长微细吸管代替。 （3）转速能达4000r/min。 3.操作方法 （1）用长针头吸满抗凝血，插入温氏管底部，轻捏胶皮乳头，自下而上挤入血液至刻度10处。 （2）置离心机中，以3000r/min的速度离心30～45min（牛、羊的血液离心45min），取出观察， 记录红细胞层高度，再离心5min，如与第一次离心的高度一致，此时红细胞柱层所占的刻度数，即 为PCV数值，用百分数表示。 图8—6 温氏红细胞压积测定管及冲液长针头 4.注意事项 （1）温氏管及充液用具必须干燥，以免溶血。 （2）离心时，离心机的转速必须达到3000r/min以上，并遵守所规定的时间。 （3）用一般离心机离心后，红细胞层呈斜面，读取时应取斜面1/2处所对应的刻度数。血浆与红 细胞层之间的灰白层是白细胞与血小板组成，不应计算在内。 5.正常参考值 各种动物PCV正常值在30％～40％之间