实验11儿种常见的铁氧动物模型及中枢神经系统功能和低湿对缺氧的影响 目的 缺氧是多种疾病共有的瑞理过程。许多原因都能使机体发生缺氧。不月类型的 缺氧，其机体的代份适应性反应和症状表现有所不同。本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性 缺氧的动物模型方法，观察缺氧过程中野吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化，并了 解温度和中枢神经系统机脆状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性：初 步掌提计量魔料的常用饶计指标的应用， 材料小白鼠：100、500m1广口瓶和测耗氧装置：1、2、10m1注射器：50g/L(5e/1) 亚硝酸钠溶液、10g/L(1g/d1)美兰溶液、2.5g/1.(0.25g/d1)氯内嗪溶液（新鲜配0、生理盐 水：的气体（甲酸加浓硫酸制取）：冰浴、钠石灰、弹簧夹，尊刀、极子。 方法和步骤 (一)中枢种经系统功能状老和温度对动物耐受缺氧的影响 用氧丙嗪和冰浴处理使动物中区神经系统功能处于种制，代谢率降低，为实验组：以生 理盐水，室温下处理为对塑组。按以下操作步露进行： 1.取性别相间，体重相近的小白鼠2只，并准确称取体重。按随机分配的原则，将其中 1只鼠作为实验组，另一只作为对膳组。向实验组鼠按0.1/10体重，腹腔内注财 2.5g/1.(0.25/1)氯丙嗪，（参见常用注射方法腹乾注射法节）安放在冰浴的沙布上1015 分钟，使呼吸频率降为？080次/分：向对丽组鼠腹腔注射生理盐水(0,1/10g体重)，放 置室温1015分钟。 2将2只鼠分别做入1001的广口瓶内，按图10-11-1和附录连接测耗氧装置。 3待限死亡后，记录存活时间，按附录用测耗氧装置测定总耗氧量。根据总耗氧量A (ml),存活到间T(mi),鼠体量雪(e)三项指标，求出总耗氧率R(ml/e/ein)。 公式：R(ml/g/ain)=A(al)÷w(x》÷T(ain) 4数据统计处理，在老师指导下，收集各组各项指标的厚始数据，列表并进行烧计处理 求出各项指标的均数（广x及标准差S),并对实验组和对照组的存活时同(T)和总耗氧率(） 的均数差异作显著性测验(t测验)（参见统计分析简介）一
实验 11 几种常见的缺氧动物模型及中枢神经系统功能和低温对缺氧的影响 目的 缺氧是多种疾病共有的病理过程。许多原因都能使机体发生缺氧。不同类型的 缺氧，其机体的代偿适应性反应和症状表现有所不同。本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性 缺氧的动物模型方法，观察缺氧过程中呼吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化，并了 解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性；初 步掌握计量资料的常用统计指标的应用。 材料 小白鼠；100、500ml 广口瓶和测耗氧装置；1、2、10ml 注射器；50g/L(5g/dl) 亚硝酸钠溶液、10g/L(1g/dl)美兰溶液、2.5g/L(0.25g/dl)氯丙嗪溶液(新鲜配制)、生理盐 水；CO 气体（甲酸加浓硫酸制取）；冰浴、钠石灰、弹簧夹、剪刀、镊子。 方法和步骤 (一)中枢神经系统功能状态和温度对动物耐受缺氧的影响 用氯丙嗪和冰浴处理使动物中枢神经系统功能处于抑制，代谢率降低，为实验组；以生 理盐水，室温下处理为对照组。按以下操作步骤进行： 1.取性别相同，体重相近的小白鼠 2 只，并准确称取体重。按随机分配的原则，将其中 1 只鼠作为实验组，另一只作为对照组。向实验组鼠按 0.1ml/10g 体重，腹腔内注射 2.5g/L(0.25g/dl)氯丙嗪，(参见常用注射方法腹腔注射法节)安放在冰浴的沙布上 10~15 分钟，使呼吸频率降为 70~80 次/分；向对照组鼠腹腔注射生理盐水(0.1ml/10g 体重)，放 置室温 10~15 分钟。 2.将 2 只鼠分别放入 100ml 的广口瓶内，按图 10-11-1 和附录连接测耗氧装置。 3.待鼠死亡后，记录存活时间，按附录用测耗氧装置测定总耗氧量。根据总耗氧量Ａ （ml），存活时间 T(min)，鼠体量 W(g)三项指标，求出总耗氧率 R(ml/g/min)。 公式：R(ml/g/min)=A(ml)÷W(g)÷T(min) 4.数据统计处理。在老师指导下，收集各组各项指标的原始数据，列表并进行统计处理： 求出各项指标的均数(`x)及标准差(S)，并对实验组和对照组的存活时间(T)和总耗氧率(R) 的均数差异作显著性测验(t 测验)（参见统计分析简介）
(二)不可原因造成不同的缺氧类型 1.密闭瓶中呼吸 (1)取小鼠一只，数正常甲吸频率（次/10秒，并注意深度。观察活动一般情况及耳、 尾、口唇的硬色。 图10-11-1缺氧瓶和测托氧装置 (2)将鼠款入含销石灰（钓5g)的100加1广口瓶内，待安静后塞紧瓶塞，开始记录时间， 以每隔5分钟间隔数呼吸频率（次/10秒）一次，并观察行为（如挣扎、经率等）和耳、尾、 口居的服色变化，直至动物死亡，尸体图待打开腹腔观察。 2吸入00 (1)取小佩一贝，数正常呼吸顿率（次/10），并注意深度。观察活动一般情况及耳、 尾、口辱的颜色： (2)将鼠成入500=1广口框内，塞紧框赛，用10加l针筒抽取0D气体10■l,注入刚密 周的广口瓶内，形成20D之空间环境，开始记录时间，观察方法与指标同1之(2)项。 及输入亚南酸盐 (1)取体重相近的鼠2只，数呼顺频率和观察皮肤精限色泽，向腹腔内各注射 50g/L(5g/d1)亚硝酸钠0.21后，立即向其中一只腹腔内再注射10g/L(1g/d1)美兰溶液 0.2ml,另一只注射生理盐水0.2如1， (2)观察方法与指标用1之2项，并观察两鼠表现及死亡到间有无差异。 将以上4具死限的腹腔打开，取下小块肝组织置滤纸片上一起进行血液或肝脏颜色比 较。 注意点 1.肤氧瓶和测耗氧量装置必须完全密用不漏气。 2小鼠腹腔注射部位应精靠左下腹，剑损及肝脏。还应遮免将药液注入畅腔或榜航。 3实验组鼠应在氧丙嘻注射后稍平静时放在冰浴的纱布上，成留时间的长短，以呼吸顿 率降为0一80次/分为宜，随时观察鼠。以防溺水死亡， 结果 记录各项实验结果的数据，原始数据列表，进行统计处理，主现指标用文字记 录。分析和探时各处理因素的作川及机制
(二)不同原因造成不同的缺氧类型 1.密闭瓶中呼吸 （1）取小鼠一只，数正常呼吸频率(次/10 秒)，并注意深度。观察活动一般情况及耳、 尾、口唇的颜色。 图 10-11-1 缺氧瓶和测耗氧装置 （2）将鼠放入含钠石灰(约 5g)的 100ml 广口瓶内，待安静后塞紧瓶塞，开始记录时间， 以每隔５分钟间隔数呼吸频率(次/10 秒)一次，并观察行为（如挣扎、痉挛等）和耳、尾、 口唇的颜色变化，直至动物死亡，尸体留待打开腹腔观察。 2.吸入 CO （1）取小鼠一只，数正常呼吸频率(次/10 秒)，并注意深度。观察活动一般情况及耳、 尾、口唇的颜色。 （2）将鼠放入 500ml 广口瓶内，塞紧瓶塞，用 10ml 针筒抽取 CO 气体 10ml，注入刚密 闭的广口瓶内，形成 2%CO 之空间环境，开始记录时间，观察方法与指标同１之（2）项。 3.输入亚硝酸盐 （1）取体重相近的鼠 2 只，数呼吸频率和观察皮肤粘膜色泽。向腹腔内各注射 50g/L(5g/dl)亚硝酸钠 0.2ml 后，立即向其中一只腹腔内再注射 10g/L(1g/dl)美兰溶液 0.2ml，另一只注射生理盐水 0.2ml。 （2）观察方法与指标同１之(2)项，并观察两鼠表现及死亡时间有无差异。 将以上 4 只死鼠的腹腔打开，取下小块肝组织置滤纸片上一起进行血液或肝脏颜色比 较。 注意点 1.缺氧瓶和测耗氧量装置必须完全密闭不漏气。 2.小鼠腹腔注射部位应稍靠左下腹，勿损及肝脏。还应避免将药液注入肠腔或膀胱。 3.实验组鼠应在氯丙嗪注射后稍平静时放在冰浴的纱布上，放留时间的长短，以呼吸频 率降为 70－80 次/分为宜。随时观察鼠，以防溺水死亡。 结果 记录各项实验结果的数据，原始数据列表，进行统计处理，主观指标用文字记 录。分析和探讨各处理因素的作用及机制
思考题 1,密闭瓶内眼，一氧化碳中毒鼠及亚硝酸钠中毒鼠各属何种类型缺氧？其发生机制有何 不同？ 2.不同类型缺氧对呼吸和血液颜色的改变是否相同？为什么？ 3.低温和抑制中枢神经系统功能为何能增强对缺氧的耐受？ 4.为什么要在缺氧瓶内放入钠石灰？这对缺氧机制的分析有何意义？ 5.为什么不能只凭实验组和对照组的T、R均数差异来得出缺氧耐受改变的结论？应作 何统计处理？ 附录测定小白取总耗氧量的测耗氧装置 原理 小白取在密闭的缺氧瓶中，不断消耗氧气，而产生的C2又被钠石灰吸收 瓶内氧分压逐渐降低而产生负压，当缺氧瓶与测耗氧装置相连时，装置的移液管内液面因瓶 内负压而上升，量筒内液面下降的毫升数即为消耗氧的总量。 方法与步骤 1.向量筒内充水至刻度，然后将玻璃管接头与缺氧瓶塞上的一个橡皮管相连 2.待鼠死后从量筒上读出液面下降的毫升数，即为小白鼠的总耗氧量()
思考题 1.密闭瓶内鼠，一氧化碳中毒鼠及亚硝酸钠中毒鼠各属何种类型缺氧？其发生机制有何 不同？ 2.不同类型缺氧对呼吸和血液颜色的改变是否相同？为什么？ 3.低温和抑制中枢神经系统功能为何能增强对缺氧的耐受？ 4.为什么要在缺氧瓶内放入钠石灰？这对缺氧机制的分析有何意义？ 5.为什么不能只凭实验组和对照组的 T、R 均数差异来得出缺氧耐受改变的结论？应作 何统计处理？ 附录 测定小白鼠总耗氧量的测耗氧装置 原理 小白鼠在密闭的缺氧瓶中，不断消耗氧气，而产生的 CO2 又被钠石灰吸收， 瓶内氧分压逐渐降低而产生负压，当缺氧瓶与测耗氧装置相连时，装置的移液管内液面因瓶 内负压而上升，量筒内液面下降的毫升数即为消耗氧的总量。 方法与步骤 1.向量筒内充水至刻度，然后将玻璃管接头与缺氧瓶塞上的一个橡皮管相连。 2.待鼠死后从量筒上读出液面下降的毫升数，即为小白鼠的总耗氧量(A)