实验30喻乳英动物离体心驻灌流实验 日的和原理了解辅乳类动物心脏离体灌流方法(Langendorff氏法)和离体心胜冠 脉血流量的测定灌流，观察肾上腺素，乙酰胆碱和垂体后叶素对心脏活动及冠秋流量的影响， 心脏从动物体摘取之后，用有一定压力、温度(38℃)并充氧的克民液经主动脉根部灌 流。灌流液经冠状动脉口进入冠状血管营养心胜，以维持心脏的节律性活动。灌流液经冠状 血管流入右心房，然后由腔静脉口及肺动味口流出，在单位时间内的蓝出量即为冠状动味血 流量（过脉流量）·心脏活动可通过条力换隐器进行记录，也可用压力换能器（心室内放置 水囊)进行记录。 材料家兔或大服：木睡，哺乳动物类手术器械一套，注射器，针头，线绳，灌流液 贮瓶(larriotto),心脏Langendorff法灌流装置，超领恒温槽，5C0+950混合气体， 绕杯，量简，秒表，温度计，克氏液(rebs液)，1：10000骨上酿素，1：10000乙酰阻碱， 方法和步骤 1,Langendorff灌流装置（图11-30-1》包括供气、恒压灌流和恒温三个部分。 (1)将灌流系统用胶管连接，灌流液贮瓶灌满灌流液。调整灌流液贮瓶的高度使灌流 压力达到实验要求，一般要求rr1otto框中心管的下端距心脏的高度为70一S0,可按 心胜的大小而适当调整。 (2)混合气瓶（也可用球）的减压阀出口用软管接至灌流管内的充气管，调节气瓶 上的减压阀，使灌流液中的气泡连续且小而均匀。 (3)调节超级恒温器使心粧插管内的灌流液温度恒定在38℃左右。为了保证离体心鞋 的表面有一定的温度和湿度，将心脏置于由玻璃或有机酸璃制成的保温灌流槽内。保温灌流 槽内容积约为100加】左右，槽的底部有漏斗形的开口，上方盖子盖住可以保特槽内温度恒定。 国 2.标本制备 (1)擒取心脏：先准答好手术器械及充氧的冷克氏液《4℃左右)。用木睡重击动物后 脑部，击昏后，仰置于手术台上。迅速沿胸前量正中舅开皮肤，打开胸腔，轻轻提起心脏， 小心剪断腔静脉、主动脉及心脏周国组织，迅建将心脏连目一段主动脉取出。手术过程中注
实验 30 哺乳类动物离体心脏灌流实验 目的和原理 了解哺乳类动物心脏离体灌流方法（Langendorff 氏法）和离体心脏冠 脉血流量的测定灌流。观察肾上腺素、乙酰胆碱和垂体后叶素对心脏活动及冠脉流量的影响。 心脏从动物体摘取之后，用有一定压力、温度（38℃）并充氧的克氏液经主动脉根部灌 流。灌流液经冠状动脉口进入冠状血管营养心脏，以维持心脏的节律性活动。灌流液经冠状 血管流入右心房，然后由腔静脉口及肺动脉口流出，在单位时间内的流出量即为冠状动脉血 流量（冠脉流量）。心脏活动可通过张力换能器进行记录，也可用压力换能器（心室内放置 水囊）进行记录。 材料 家兔或大鼠；木锤，哺乳动物类手术器械一套，注射器，针头，线绳，灌流液 贮瓶（Marriotto），心脏 Langendorff 法灌流装置，超级恒温槽，5%CO2+95%O2 混合气体， 烧杯，量筒，秒表，温度计，克氏液（Krebs 液），1:10000 肾上腺素，1:10000 乙酰胆碱。 方法和步骤 1．Langendorff 灌流装置（图 11-30-1）包括供气、恒压灌流和恒温三个部分。 （1）将灌流系统用胶管连接，灌流液贮瓶灌满灌流液。调整灌流液贮瓶的高度使灌流 压力达到实验要求，一般要求 Marriotto 瓶中心管的下端距心脏的高度为 70～90cm，可按 心脏的大小而适当调整。 （2）混合气瓶（也可用球胆）的减压阀出口用软管接至灌流管内的充气管，调节气瓶 上的减压阀，使灌流液中的气泡连续且小而均匀。 （3）调节超级恒温器使心脏插管内的灌流液温度恒定在 38℃左右。为了保证离体心脏 的表面有一定的温度和湿度，将心脏置于由玻璃或有机玻璃制成的保温灌流槽内。保温灌流 槽内容积约为 100ml 左右，槽的底部有漏斗形的开口，上方盖子盖住可以保持槽内温度恒定。 2．标本制备 （1）摘取心脏：先准备好手术器械及充氧的冷克氏液（4℃左右）。用木锤重击动物后 脑部，击昏后，仰置于手术台上。迅速沿胸前壁正中剪开皮肤，打开胸腔，轻轻提起心脏， 小心剪断腔静脉、主动脉及心脏周围组织，迅速将心脏连同一段主动脉取出。手术过程中注
意不要损伤心脏，主动脉根部要面0.51■长度以备插管用。心脏取出后立刻置于预先备好 的充氧的冷克氏液中，用手雷轻压心室以利于其中的剩余的血排出，防止凝血块彩成。用注 射器白主动林根部徐徐注入经充氧的冷克氏液，其作用一方面使心脏停拼以减少其能量消 耗，另一方面也售以冲洗冠状血管，清除残血以免形成凝血小块堵寒血管。心脏停洗后，迅 速鹤开心包根井剪去心脏圆围的组织（包暂肺组织、气管以及附着于心脏上的其他组织》， 认清主动脉、腔静脉及防动脉的解制位置。 (2)灌流心脏：将主动脉套进心脏插管口内。用棉线将主动脉和心脏括管结扎在一起 并固定。拓管选入主动脉不宜过深，以免损伤主动脉薄及堵住冠状动脉开口，影响冠状血管 的灌流。灌流液的温度开始应低些，以后逐渐升高到所需要求的温度。心脏经充氧的温克氏 液灌流后，在1■■内即可开始恢复跳动，但起初心率较慢，并常有心律不齐，以后逐渐变 快而且心律也逐步恢复正常和稳定（大鼠心驻的心率约20一300次/m),可推持数小时。 3.仪器参数设置 显示方式：记录仪：果样何隔：1≤：通道1：张力，C锡合，放大倍数50100：通道 4:记录滴数，C输入，放大倍数550。 4.用蛀心夹在心室舒张期夹佳心尖，并将蛀心夹的线头通过滑轮连至张力换能器，记 录心鞋活动。 5.调节国定保湿灌流槽，使保温灌流栅罩住心脏。灌流液进入冠状血管后到右心房经 腔静林及防动脉滴入双层灌流精中，经槽底部的漏斗形开口流出，用量简收集一定时间内的 流出液即为屉脉流量。流量基本稳定后，进行下列各项观察。 观察项目 1,记录正常情况下的冠脉流量(l/n)和心脏话动作为对照。 2.由心鞋插管的侧管注入1：10000骨上腺素溶液0.5a1,观黎冠脉流量和心脏话动的 变化。 3,向心脏插管的侧管注入1：10000乙酰胆碱溶液0.5a1,观察冠脉流量和心脏活动的 变化。 4.月心旺插管的测管注入0.5和1(100/l)垂体后叶煮溶液，观解冠状动林流量和心 脏活动的变化。 结果 记录和测量各种处理前后冠藏流量和脏收带张力、心率，并进行统计处理
意不要损伤心脏，主动脉根部要留 0.5~1cm 长度以备插管用。心脏取出后立刻置于预先备好 的充氧的冷克氏液中，用手指轻压心室以利于其中的剩余的血排出，防止凝血块形成。用注 射器向主动脉根部徐徐注入经充氧的冷克氏液，其作用一方面使心脏停跳以减少其能量消 耗，另一方面也借以冲洗冠状血管，清除残血以免形成凝血小块堵塞血管。心脏停跳后，迅 速剪开心包膜并剪去心脏周围的组织（包括肺组织、气管以及附着于心脏上的其他组织）， 认清主动脉、腔静脉及肺动脉的解剖位置。 （2）灌流心脏：将主动脉套进心脏插管口内，用棉线将主动脉和心脏插管结扎在一起 并固定。插管进入主动脉不宜过深，以免损伤主动脉瓣及堵住冠状动脉开口，影响冠状血管 的灌流。灌流液的温度开始应低些，以后逐渐升高到所需要求的温度。心脏经充氧的温克氏 液灌流后，在 lmin 内即可开始恢复跳动，但起初心率较慢，并常有心律不齐，以后逐渐变 快而且心律也逐步恢复正常和稳定（大鼠心脏的心率约 250～300 次／min），可维持数小时。 3．仪器参数设置 显示方式：记录仪；采样间隔：1ms；通道 1：张力，DC 耦合，放大倍数 50~100；通道 4：记录滴数，AC 输入，放大倍数 5~50。 4．用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，并将蛙心夹的线头通过滑轮连至张力换能器，记 录心脏活动。 5．调节固定保温灌流槽，使保温灌流槽罩住心脏。灌流液进入冠状血管后到右心房经 腔静脉及肺动脉滴入双层灌流槽中，经槽底部的漏斗形开口流出，用量筒收集一定时间内的 流出液即为冠脉流量。流量基本稳定后，进行下列各项观察。 观察项目 1．记录正常情况下的冠脉流量（ml/min）和心脏活动作为对照。 2．由心脏插管的侧管注入 1:10000 肾上腺素溶液 0.5ml，观察冠脉流量和心脏活动的 变化。 3．向心脏插管的侧管注入 1:10000 乙酰胆碱溶液 0.5ml，观察冠脉流量和心脏活动的 变化。 4．向心脏插管的侧管注入 0.5ml（10U／ml）垂体后叶素溶液，观察冠状动脉流量和心 脏活动的变化。 结果 记录和测量各种处理前后冠脉流量和心脏收缩张力、心率，并进行统计处理
分析讨论实验结果 注意 1,缓慢打开气氘。以灌流管中约每10■出现一个气泡的气流速度溶液充氧。 2.制作离体心整标本时操作要迅速，不要损伤心鞋。 3,灌流压力和灌流液温度要严格推持恒定。 4.冠状血管要保持通畅，避免凝血块结塞血管。 5.注射各种药物时要观察其影响流量的全过程， 思考题 1.肾上馨素对冠脉流量有什么影响？为什么？ 2,乙酰胆碱对冠脉流量有什么影响？为什么？ 3.垂体后叶素对冠脉流量有什么影响？为什么
分析讨论实验结果 注意 1．缓慢打开气瓶，以灌流管中约每 10cm 出现一个气泡的气流速度对溶液充氧。 2．制作离体心脏标本时操作要迅速，不要损伤心脏。 3．灌流压力和灌流液温度要严格维持恒定。 4．冠状血管要保持通畅，避免凝血块堵塞血管。 5．注射各种药物时要观察其影响流量的全过程。 思考题 1．肾上腺素对冠脉流量有什么影响？为什么？ 2．乙酰胆碱对冠脉流量有什么影响？为什么？ 3．垂体后叶素对冠脉流量有什么影响？为什么