实险1地蜍坐骨神经厚肠肌标本制备 目的和原理 蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相以之处，面且其 离体组织的生活条件比较简单，易于控制和掌报，米源也较丰富，由此在生理学实验。尤其 是细腹生理学的某线实验中，常用蛙或蟑蜂的坐骨神轻带肠肌标本来观察神轻肌肉的兴奋 性、刺激与反应的规律及肌肉收增的特点等。制备具有正常兴奋收增功能的蛙类坐骨神经腰 肠肌标本是生理学实验的基木操作技术之一。 材料 始蜍或蛙：蛙板、探针、相明刀、细剪刀、尖摄子、玻璃分针、大头针、培养 皿、滴管。瓷碗、锌铜马或银电极、任氏液。 步骤 1,最脑特罐取地蜍一只，用左手提住，以示指压其头部前璃使其尽量前第（图 10一1-1)：右手持探针白校骨大孔处垂直规入，到达椎管，即将摆针改变方向刺入颅腔，向 各侧不断搅动，刺底妈吸脑组织：再将深针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使逐渐刺入整个 椎管内。捣吸脊筒。此时蟑蜂下领呼吸运动应消失，四枝松软，即成为一级脑脊筒的地嫁 (pithed toad)·香则须按上法再行挎毁. 图10-1-1蛙脑和脊随的破坏 图 10-1-2横断脊柱 2.剪除暂干上部及内驻 用粗剪刀在衡骨后方剪断脊柱（图101-2）。左手挥任蟾 蜍脊柱。右于将粗剪刀沿两侧（避坐骨神经）剪开瘦壁，此时驱干上部及内脏即全部下垂 (图10--3)。剪除全部厘干上部及内脏组织，弃于瓷刷内： 3,剥皮避开神经，用左于持圆头领子夹住柱，右手捏住皮肤边峰，逐步向下牵 拉剥离皮肤（图101-4）·拉至大圆时，如阻力较大，可先剩下一侧，再利另一侧。将全 部皮肤剥除后。将标本置于盛有任氏液的培养里中。 4,洗净双手和用过的全部手术器械。再进行下列步骤
实验 1 蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备 目的和原理 蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相似之处，而且其 离体组织的生活条件比较简单，易于控制和掌握，来源也较丰富，由此在生理学实验，尤其 是细胞生理学的某些实验中，常用蛙或蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本来观察神经肌肉的兴奋 性、刺激与反应的规律及肌肉收缩的特点等。制备具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨神经腓 肠肌标本是生理学实验的基本操作技术之一。 材料 蟾蜍或蛙；蛙板、探针、粗剪刀、细剪刀、尖镊子、玻璃分针、大头针、培养 皿、滴管、 瓷碗、锌铜弓或铝银电极、任氏液。 步骤 1．毁脑脊髓 取蟾蜍一只，用左手握住，以示指压其头部前端使其尽量前俯（图 10-1-1），右手持探针自枕骨大孔处垂直刺入，到达椎管，即将探针改变方向刺入颅腔，向 各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使逐渐刺入整个 椎管内，捣毁脊髓。此时蟾蜍下颌呼吸运动应消失，四肢松软，即成为一毁脑脊髓的蟾蜍 （pithed toad）。否则须按上法再行捣毁。 图 10-1-1 蛙脑和脊髓的破坏 图 10-1-2 横断脊柱 2．剪除躯干上部及内脏 用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱（图 10-1-2）。左手握住蟾 蜍脊柱，右手将粗剪刀沿两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁。此时躯干上部及内脏即全部下垂 （图 10-1-3）。剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于瓷碗内。 3．剥皮 避开神经，用左手持圆头镊子夹住脊柱，右手捏住皮肤边缘，逐步向下牵 拉剥离皮肤（图 10-1-4）。拉至大腿时，如阻力较大，可先剥下一侧，再剥另一侧。将全 部皮肤剥除后，将标本置于盛有任氏液的培养皿中。 4．洗净双手和用过的全部手术器械，再进行下列步骤
图11-1-3 剪除驱千上部及内鞋 图 11-1-4剩去皮肤 5,完成坐青神轻耶肠肌标本 方法1： 《1)分离两圆：避开坐骨神经。用粗剪刀从背侧剪去低骨，然后沿中线将脊柱明成左 右两率，再从耻骨联合中央剪开（为保证两侧坐骨神经完整，应避免剪时偏向一侧）。将已 分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。 图10-15 非肠肌皇骨神经标本 (2)等离坐骨神经：取糖一条，先用鼓璃分针沿音柱侧等离坐骨神经夜乾部，然后用 大头针将标本背位因定于干净蛙板上。再用玻璃分针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经 沟，纵向分离暴露坐骨神经之大健部分，直至分离至胸窝轻神经分叉处。然后剪断股二头肌 醒、华醒队和半膜肌肌显，并饶至前方剪所股四头肌壁。自上向下剪斯所有坐骨神经分支： 将连着3一4节性骨的坐骨神轻分离出来。 (3)完成坐骨神经胖肠肌标本：将已游离的坐骨神经搭在瓣肠机上，用相剪刀自棒关 作周围向上剪除并利净所有大电肌肉。在膝关节约1n处剪新股骨，弃去上段股骨。候留 都分即为坐骨神经形肠肌标本（图1心一-与）。 方法2： 上运已利皮的标本不先分离两感，取印卧位，用支璃分针将两侧坐骨神经紧靠脊桂根部 各结扎一线暂不鸭下。再将标本构卧，用三根大头针钉在蛙板上，使充分伸直成人字型。用 尖头银子夹住骶骨尾璃稍向上提，使能部内上窿起，用相明刀水平位剪除：骨。用弯头玻南 分针自剪口处钟入将一侧坐骨神经轻轻匀出，在其下方横置玻璃分针，使其暴露于剪口上方 并具有一定的张力。同方法1，用玻璃分针循坐骨神经沟分离暴露坐骨神经大提部分，直至 丽窝处。，剪斯股二头肌和半膜肌等机醒，剪斯前方的服四头肌壁。然后以同样的步露，处理 另一侧之大腿坐骨神经，教除州定，从脊柱根部剪断坐情神经，手执结扎线将神经轻轻提起 顺序白下剪断其所有分支。将神经搭在排肠肌上，用粗剪自棒关节周围向上剪除利净所有大 健肌肉。距膝关节钓1■处剪断殿骨，依同法处理另一侧标本，这样就制得两个坐骨神经非
图 11-1-3 剪除躯干上部及内脏 图 11-1-4 剥去皮肤 5．完成坐骨神经腓肠肌标本 方法 1： （1）分离两腿：避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左 右两半，再从耻骨联合中央剪开（为保证两侧坐骨神经完整，应避免剪时偏向一侧）。将已 分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。 图 10-1-5 腓肠肌坐骨神经标本 （2）游离坐骨神经：取腿一条，先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后用 大头针将标本背位固定于干净蛙板上。再用玻璃分针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经 沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分，直至分离至腘窝胫神经分叉处。然后剪断股二头肌 腱、半腱肌和半膜肌肌腱，并绕至前方剪断股四头肌腱。自上向下剪断所有坐骨神经分支。 将连着 3～4 节椎骨的坐骨神经分离出来。 （3）完成坐骨神经腓肠肌标本：将已游离的坐骨神经搭在腓肠肌上。用粗剪刀自膝关 节周围向上剪除并刮净所有大腿肌肉，在距膝关节约 1cm 处剪断股骨。弃去上段股骨，保留 部分即为坐骨神经腓肠肌标本（图 10-1-5）。 方法 2： 上述已剥皮的标本不先分离两腿，取仰卧位，用玻璃分针将两侧坐骨神经紧靠脊柱根部 各结扎一线暂不剪下。再将标本俯卧，用三根大头针钉在蛙板上，使充分伸直成人字型。用 尖头镊子夹住骶骨尾端稍向上提，使能部向上窿起，用粗剪刀水平位剪除骶骨。用弯头玻璃 分针自剪口处伸入将一侧坐骨神经轻轻勾出，在其下方横置玻璃分针，使其暴露于剪口上方 并具有一定的张力。同方法 1，用玻璃分针循坐骨神经沟分离暴露坐骨神经大腿部分，直至 腘窝处。剪断股二头肌和半膜肌等肌腱，剪断前方的股四头肌腱。然后以同样的步骤，处理 另一侧之大腿坐骨神经。撤除固定，从脊柱根部剪断坐骨神经，手执结扎线将神经轻轻提起， 顺序向下剪断其所有分支。将神经搭在腓肠肌上，用粗剪自膝关节周围向上剪除刮净所有大 腿肌肉，距膝关节约 1cm 处剪断股骨。依同法处理另一侧标本。这样就制得两个坐骨神经腓
肠肌标木。方法2的优点是：标本固定良好，不摇晃易操作：神经有一定张力，只要进剪方 向与神经方向保持平行，初学者不号伤及神经：缩短操作时间。 6,完成坐骨神经时肠肌标本用尖头领子在上述坐骨神经胖形肌标本的限壁下方穿 孔，穿线结扎之，提起结扎线。在结扎线下方剪晰限壁。并逐步游离胖彬肌至膝关节处，左 手握住标本的殿骨部分，使已瓣离的坐骨神经和排肠肌下垂，右手持粗剪刀水平方向伸进想 肠肌与小腿之间，在摩关节处寡斯，与小塑其余部分分离。左手保雷部分即为刚着于股骨之 上的、具有坐骨神经支配的B肠机标本（图101-5）。将标本浸入盛有新鲜任氏液之培养 皿中待用. 7,检查标本兴奇性取锌铜马在任氏液中沾湿后迅迪接触坐骨神经。如非肠肌发生 收缩，表明标本具有正常的生理话性。兴奋性良好，说明实验慢作成功。 结果及分析 1,吸酷骨船后的地蚊应有句表现 2.制答好的种经肌肉标本为何要成在任氏液中 3.如何判断制备的神轻肌肉标本的兴奋性？ 4,用锌铜弓料激神经，为何会引起肌肉收缩？ 注意事项 「，制备神经肌内标本过程中，要不斯滴加任氏液，以防标本干馒，丧失正常生理活性。 2.操作过程中应避免强力牵危和手程神经或亮伤神经肌肉。 3,爱脑骨髓时防止蝓蜂皮肤分泌的峰蜂毒液射入操作者限内或污荣实验标本
肠肌标本。方法 2 的优点是：标本固定良好，不摇晃易操作；神经有一定张力，只要进剪方 向与神经方向保持平行，初学者不易伤及神经；缩短操作时间。 6．完成坐骨神经腓肠肌标本 用尖头镊子在上述坐骨神经腓肠肌标本的跟腱下方穿 孔，穿线结扎之。提起结扎线，在结扎线下方剪断跟腱，并逐步游离腓肠肌至膝关节处，左 手握住标本的股骨部分，使已游离的坐骨神经和腓肠肌下垂，右手持粗剪刀水平方向伸进腓 肠肌与小腿之间，在膝关节处剪断，与小腿其余部分分离。左手保留部分即为附着于股骨之 上的、具有坐骨神经支配的腓肠肌标本（图 10-1-5）。将标本浸入盛有新鲜任氏液之培养 皿中待用。 7．检查标本兴奋性 取锌铜弓在任氏液中沾湿后迅速接触坐骨神经，如腓肠肌发生 收缩，表明标本具有正常的生理活性，兴奋性良好，说明实验操作成功。 结果及分析 1．毁脑脊髓后的蟾蜍应有何表现？ 2．制备好的神经肌肉标本为何要放在任氏液中？ 3．如何判断制备的神经肌肉标本的兴奋性？ 4．用锌铜弓刺激神经，为何会引起肌肉收缩？ 注意事项 1．制备神经肌肉标本过程中，要不断滴加任氏液，以防标本干燥，丧失正常生理活性。 2．操作过程中应避免强力牵拉和手捏神经或夹伤神经肌肉。 3．毁脑脊髓时防止蟾蜍皮肤分泌的蟾蜍毒液射入操作者眼内或污染实验标本