
实验21离子与药物对离体地蜍心整括动的影响 目的和原理 作为蛙心起搏点的静脉实能按一定节律自动产生兴有。因此,贝要将离 体失去神经支配的妹心保特在适宜的环境中,在一定时同内仍能产生节律性兴奋和收缩话 动:另一方面,心脏正常的节律性话动有载于内环境理化因素的相对稳定,所以改变灌流液 的成分,则可以引起心脏活动的改变。本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法,并观察钠、 钾、钙三种离子、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响: 材料 始蜍或蛙:微机生物信号处理系统,拉力换能器:蛙心夹,滑轮,铁支果,双 凹夹,蛙心插管,蛙类于术器械,南管,糖瓷杯,缝线:任氏液,0.65%XaC1,3%CaC1: 1%C1,1:10000肾上服泰溶液和1:100000乙酰祖碱溶液。 方法和步骤 1,离体蛙心制备 (1)取地蜂一只,破坏防和脊前后,使其仲卧固定在妹板上,从斜突下将胸部皮肤向 上剪开。然后剪掉胸骨,打开心包。暴露心脏。 (2)在主动脉干下方引2根线。一条在左主动林上增结扎作插管时杂引用,另一根则 在动林圆锥上方,系一松结用于结扎固定蛙心括管。 (3)左手持左主动脉上方的结扎线,用银科剪在松结上方左主动脉根部剪一小斜口, 右手将盛有少许任氏液的大小适宜的蛙心插管由此尊口处超入动脉圆性。当插管头到达动账 圆锥时,有将插管稍精后退,并转向心室中央方向,在心室收缩期插入心室。判斯蛙心新管 是否进入心室可根据插管内的任氏液的液面是否能随心蜜的舒缩而上下波动,如蛙心括管己 进火心室,则将预先准备好的松结扎紧,并固定在蛙心插管的侧的上以免蛙心插管滑出心室。 鲜断主动脉左右分支, 《4)轻轻提起蛙心括管以拍高心脏,用一线在静脉蜜与腔静脉交界处作一结扎,结扎 线应尽量下压,以免伤及静脉窦,在结扎线外侧剪断所有组凯,将蛀心游离出来。 (5)用新鲜任民液反复换洗蛙心插管内含血的任氏液,直至蛙心插管内无血液残留为 止。此时离体蛙心己制备成功,可供实验。 2,仪透连接和参数设置
实验 21 离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响 目的和原理 作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋。因此,只要将离 体失去神经支配的蛙心保持在适宜的环境中,在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活 动;另一方面,心脏正常的节律性活动有赖于内环境理化因素的相对稳定,所以改变灌流液 的成分,则可以引起心脏活动的改变。本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法,并观察钠、 钾、钙三种离子、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。 材料 蟾蜍或蛙;微机生物信号处理系统,拉力换能器;蛙心夹,滑轮,铁支架,双 凹夹,蛙心插管,蛙类手术器械,滴管,搪瓷杯,缝线;任氏液,0.65%NaCl,3%CaCl2, 1%KCI,1:10000 肾上腺素溶液和 1:100000 乙酰胆碱溶液。 方法和步骤 1.离体蛙心制备 (1)取蟾蜍一只,破坏脑和脊髓后,使其仰卧固定在蛙板上,从剑突下将胸部皮肤 向 上剪开,然后剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏。 (2)在主动脉干下方引 2 根线。一条在左主动脉上端结扎作插管时牵引用,另一根则 在动脉圆锥上方,系一松结用于结扎固定蛙心插管。 (3)左手持左主动脉上方的结扎线,用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪一小斜口, 右手将盛有少许任氏液的大小适宜的蛙心插管由此剪口处插入动脉圆锥。当插管头到达动脉 圆锥时,有将插管稍稍后退,并转向心室中央方向,在心室收缩期插入心室。判断蛙心插管 是否进入心室可根据插管内的任氏液的液面是否能随心室的舒缩而上下波动。如蛙心插管已 进火心室,则将预先准备好的松结扎紧,并固定在蛙心插管的侧钩上以免蛙心插管滑出心室。 剪断主动脉左右分支。 (4)轻轻提起蛙心插管以抬高心脏,用一线在静脉窦与腔静脉交界处作一结扎,结扎 线应尽量下压,以免伤及静脉窦,在结扎线外侧剪断所有组织,将蛙心游离出来。 (5)用新鲜任氏液反复换洗蛙心插管内含血的任氏液,直至蛙心插管内无血液残留为 止。此时离体蛙心已制备成功,可供实验。 2.仪器连接和参数设置

(1)按图11-21-1连接,张力换能器输出线接微机生物信号处理系统第二通道(亦可 选择其它通道),选择直流锡合方式(DC), (2)微机生物信号处理系统参数设置:采样同隔2一5的:连续记录显示榄式:第二通 道放大倍数200一500、高频滤液途择“无”。 (3)将蛙心插管固定在铁支架上,月蛙心夹在心室舒张期夹住心尖,并将蛙心兴的线 头通过滑轮连至张力换能器的应变梁上,此线应有一定的紧张度。 现襄项日 (1)描记正常的蛙心妈动曲线。注意观察心舞频率,心室的收缩和好张程度。 (2)把蛀心插管内的任氏液全部更换为065%C1溶液,观察心搏变化, (3把Q.5⅓NC1吸出,用新鲜任氏液反复换洗数次,待曲线核复正常时,再在任氏 液内滴加3%CaCl:1一2滴,观察心河变化。 目的和原理作为蛙心起搏点的静隙实能按一定节律白动产生兴奋。因此,只要将离 体失去神经支配的蛙心保持在适宜的环境中,在一定时何内仍能产生节律性关奋和收缩话 动:另一方面,心脏正常的节律性活动有载于内环境理化因素的相对稳定,所以改变灌流液 的成分,则可以引起心脏活动的改变。本实验的目的是学习离体蛀心的清流方法,并观察钠, 钾、钙三种离子、肾上酸素,乙酰阻碱等因素对心脏话动的影响。 材料 帅蜂成蛀:微机生物信号处理系统,拉力换能墨:蛀心夹,滑轮。铁支果,双 凹夹,蛙心插管,蛙类手术器板,滴管,塘瓷杯,缝线:任氏液,0.65%NaC1,3%CaC1 1%KC1,1:10000样上服素溶液和1:100000乙酰1减溶液。 方法和步骤 1.离体蛙心制备 《1)取地鲶一贝,破坏脑和膏时后,使其仰卧国定在蛙板上,从剑突下将胸部皮秋向 上剪开。然后剪掉胸骨,打开心但。暴器心脏。 (2)在主动脉干下方引2根线。一条在左主动脉上端结扎作插管时牵引用,另一恨则 在动脉圆锥上方,系一松结用于结机固定蛙心插管。 (3)左于持左主动膝上方的结扎线,用眼科剪在松结上方左主动账根部剪一小斜口, 右手将盛有少许任氏液的大小适宜的蛙心插管由此尊口处插入动脉圆性。当插管头到达动脉
(1)按图 11-21-1 连接,张力换能器输出线接微机生物信号处理系统第二通道(亦可 选择其它通道),选择直流耦合方式(DC)。 (2)微机生物信号处理系统参数设置:采样间隔 2~5ms;连续记录显示模式;第二通 道放大倍数 200~500、高频滤波选择“无”。 (3)将蛙心插管固定在铁支架上,用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖,并将蛙心夹的线 头通过滑轮连至张力换能器的应变梁上,此线应有一定的紧张度。 观察项目 (1)描记正常的蛙心搏动曲线,注意观察心搏频率、心室的收缩和舒张程度。 (2)把蛙心插管内的任氏液全部更换为 0.65%NaCl 溶液,观察心搏变化。 (3)把 0.65%NaCl 吸出,用新鲜任氏液反复换洗数次,待曲线恢复正常时,再在任氏 液内滴加 3%CaCl21~2 滴,观察心搏变化。 目的和原理 作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋。因此,只要将离 体失去神经支配的蛙心保持在适宜的环境中,在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活 动;另一方面,心脏正常的节律性活动有赖于内环境理化因素的相对稳定,所以改变灌流液 的成分,则可以引起心脏活动的改变。本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法,并观察钠、 钾、钙三种离子、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。 材料 蟾蜍或蛙;微机生物信号处理系统,拉力换能器;蛙心夹,滑轮,铁支架,双 凹夹,蛙心插管,蛙类手术器械,滴管,搪瓷杯,缝线;任氏液,0.65%NaCl,3%CaCl2, 1%KCI,1:10000 肾上腺素溶液和 1:100000 乙酰胆碱溶液。 方法和步骤 1.离体蛙心制备 (1)取蟾蜍一只,破坏脑和脊髓后,使其仰卧固定在蛙板上,从剑突下将胸部皮肤 向 上剪开,然后剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏。 (2)在主动脉干下方引 2 根线。一条在左主动脉上端结扎作插管时牵引用,另一根则 在动脉圆锥上方,系一松结用于结扎固定蛙心插管。 (3)左手持左主动脉上方的结扎线,用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪一小斜口, 右手将盛有少许任氏液的大小适宜的蛙心插管由此剪口处插入动脉圆锥。当插管头到达动脉

圆锥时。有将插管稍精后退,并转向心室中央方向,在心室收缩期插入心室。,判斯蛙心插管 是否进入心室可根据插管内的任氏液的液面是香能随心室的舒缩面上下波动,如蛙心括管已 进火心室,测将预先准备好的松结扎紧,并固定在蛙心插管的侧钩上以免蛙心插管滑出心室。 剪斯主动膝左右分支。 (4)轻轻提起蛙心插管以拍高心脏,用一线在静林实与粒静脉交界处作一结扎,结扎 线应尽量下压。以免伤及静脉,在扎线外侧剪斯所有组织,将蛙心游离出米。 (5)用新师任氏液反复换洗蛙心插管内含血的任民液,直至蛙心插管内无血液残留为 止,此时离体蛙心已制答成功,可供实验。 2,仪#连按和参数设置 (1)按图11-21-1连接,张力换能器输出线接微机生物信号处理系统第二通道(亦可 选择其它通道),选择直流易合方式(①C): (2)微机生物信号处理系统参数设置:采样间隔2~5:连续记录最示模式:第二通 道故大倍数200一500、高频滤液选择“无”。 (3)将蚌心插管固定在铁支襄上,用蛙心夹在心室舒素期夹住心尖,并将蛙心夹的线 头通过滑轮连至张力换能器的应变梁上,此线应有一定的紧张度, 观察项目 《1)指记正常的娃心调动由线。注意观黎心舞频率、心蜜的收婚和好张程度。 (2)把蛙心插管内的任氏液全部更换为0.65%aC1溶液,观察心搏变化。 《3)把Q5⅓NC1吸出,用新鲜任氏液反复换洗数次,待曲线恢复正常时,再在任氏 液内滴加3%CaC1,1一2滴,观黎心河变化: 图11-21-1蛙心灌流仪渴连接方法 (4)将含有CC1,的任民液吸出,用新鲜的任民液反复换洗,特由找族复正常后,在 任氏液中加1%C11一2滴,观察心搏变化, 《5)将含有C1的任氏液吸出,用新鲜的任氏液反复换洗,待曲线恢复正常后,再在 任氏液中加1:10000的骨上腺素溶液1一2滴,观黎心搏变化。待心搏稳定后,向灌流液中 如1飞普茶洛尔溶液1一2滴,观察心湖变化
圆锥时,有将插管稍稍后退,并转向心室中央方向,在心室收缩期插入心室。判断蛙心插管 是否进入心室可根据插管内的任氏液的液面是否能随心室的舒缩而上下波动。如蛙心插管已 进火心室,则将预先准备好的松结扎紧,并固定在蛙心插管的侧钩上以免蛙心插管滑出心室。 剪断主动脉左右分支。 (4)轻轻提起蛙心插管以抬高心脏,用一线在静脉窦与腔静脉交界处作一结扎,结扎 线应尽量下压,以免伤及静脉窦,在结扎线外侧剪断所有组织,将蛙心游离出来。 (5)用新鲜任氏液反复换洗蛙心插管内含血的任氏液,直至蛙心插管内无血液残留为 止。此时离体蛙心已制备成功,可供实验。 2.仪器连接和参数设置 (1)按图 11-21-1 连接,张力换能器输出线接微机生物信号处理系统第二通道(亦可 选择其它通道),选择直流耦合方式(DC)。 (2)微机生物信号处理系统参数设置:采样间隔 2~5ms;连续记录显示模式;第二通 道放大倍数 200~500、高频滤波选择“无”。 (3)将蛙心插管固定在铁支架上,用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖,并将蛙心夹的线 头通过滑轮连至张力换能器的应变梁上,此线应有一定的紧张度。 观察项目 (1)描记正常的蛙心搏动曲线,注意观察心搏频率、心室的收缩和舒张程度。 (2)把蛙心插管内的任氏液全部更换为 0.65%NaCl 溶液,观察心搏变化。 (3)把 0.65%NaCl 吸出,用新鲜任氏液反复换洗数次,待曲线恢复正常时,再在任氏 液内滴加 3%CaCl21~2 滴,观察心搏变化。 图 11-21-1 蛙心灌流仪器连接方法 (4)将含有 CaCl2 的任氏液吸出,用新鲜的任氏液反复换洗,待曲线恢复正常后,在 任氏液中加 1%KCl 1~2 滴,观察心搏变化。 (5)将含有 KCl 的任氏液吸出,用新鲜的任氏液反复换洗,待曲线恢复正常后,再在 任氏液中加 1:10000 的肾上腺素溶液 1~2 滴,观察心搏变化。待心搏稳定后,向灌流液中 加 1%普萘洛尔溶液 1~2 滴,观察心搏变化

(6)用新鲜的任氏液反复换洗,待曲线恢复正常后,再在任民液中加1:100000的乙酰 肌碱溶液1一2滴,观察心搏变化。 注意率项 1,制备蛙心标本时,勿伤及静林实。 2,上逃各实验项目,一且出现作用应立即用新鲜任民液换洗,以免心肌受规。而且必 须特心搏恢复正常后方能进行下一步实验。 3,蛙心插管内液面应保持红定,以免影利结果。 4,滴加药品和换取新鲜任氏液,须及时在记录纸上标记,以便观察分析。 5。吸新鲜任氏液和吸蛙心插管内溶液的吸曾应区分专用,不可混活使用,以免影响实 险结果。 6。化学药物作用不明显时,可再适量滴加,密切观察药物相量语加后的实验结果: 结果 记录和测量各项处理前后心脏活动的心率、心室的收缩和舒张张力,数据进行 绕计处理,分析讨论实验结果。 思考愿 1,正常蛙心搏动曲线的各个组成部分,分别反映了什么T 2.用0.65%aC1溶液灌注蛙心时,将观察到心搏曲线发生什么变化?为什么? 3,在任氏液中加入3%CC,溶液灌注蛙心时,将观察到心搏曲线发生什么变化了为什 么7 4,在任氏液中加入1%C1溶液灌注蛙心时,心搏曲线又将出现什么变化?为什么? 5。在任氏液中加入骨上粮素溶液灌注蛙心时,心搏由线将发生什么变化?为什么? 6,在任氏液中加入乙酰胆碱溶液灌注蛀心时,心搏由线又将发生什么变化?为什么?
(6)用新鲜的任氏液反复换洗,待曲线恢复正常后,再在任氏液中加 1:100000 的乙酰 胆碱溶液 1~2 滴,观察心搏变化。 注意事项 1.制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦。 2.上述各实验项目,一旦出现作用应立即用新鲜任氏液换洗,以免心肌受损,而且必 须待心搏恢复正常后方能进行下一步实验。 3.蛙心插管内液面应保持恒定,以免影响结果。 4.滴加药品和换取新鲜任氏液,须及时在记录纸上标记,以便观察分析。 5.吸新鲜任氏液和吸蛙心插管内溶液的吸管应区分专用,不可混淆使用,以免影响实 验结果。 6.化学药物作用不明显时,可再适量滴加,密切观察药物剂量添加后的实验结果。 结果 记录和测量各项处理前后心脏活动的心率、心室的收缩和舒张张力,数据进行 统计处理,分析讨论实验结果。 思考题 1.正常蛙心搏动曲线的各个组成部分,分别反映了什么? 2.用 0.65%NaCl 溶液灌注蛙心时,将观察到心搏曲线发生什么变化?为什么? 3.在任氏液中加入 3%CaCl2 溶液灌注蛙心时,将观察到心搏曲线发生什么变化?为什 么? 4.在任氏液中加入 1%KCI 溶液灌注蛙心时,心搏曲线又将出现什么变化?为什么? 5.在任氏液中加入肾上腺素溶液灌注蛙心时,心搏曲线将发生什么变化?为什么? 6.在任氏液中加入乙酰胆碱溶液灌注蛙心时,心搏曲线又将发生什么变化?为什么?