肢体远端缺血预处理对大鼠心 肌细胞线粒体膜通透性转换孔 开放的影响 基础医学系01系第1组 沈方许震宇 沈倩
肢体远端缺血预处理对大鼠心 肌细胞线粒体膜通透性转换孔 开放的影响 基础医学系01系第1组 沈方 许震宇 沈倩
888. 目的 ●●●●0 ●0●0 。缺血预处理是对心肌预先短暂缺血复灌几个循环后， 心肌可以耐受随后较长时间缺血的现象 ●心脏外脏器的短暂缺血可以在一定程度上使心脏耐受 缺血，缓解缺血对心脏的损害，这种现象被称为远距 离预处理 。线粒体在细胞死亡的调控中扮演重要角色，线粒体膜 通透性转换孔是调控细胞死亡的重要结构基础
⚫ 缺血预处理是对心肌预先短暂缺血复灌几个循环后， 心肌可以耐受随后较长时间缺血的现象 ⚫ 心脏外脏器的短暂缺血可以在一定程度上使心脏耐受 缺血，缓解缺血对心脏的损害，这种现象被称为远距 离预处理 ⚫ 线粒体在细胞死亡的调控中扮演重要角色，线粒体膜 通透性转换孔是调控细胞死亡的重要结构基础 目的
888. ●●●●● 远距离预处理 ●0●0 MPTP的开放 心肌保护
远距离预处理 MPTP的开放 心肌保护 ？
●●● 方法 远距离预处理模型建立 ●● 在体心肌缺血再灌注损伤 离体心脏灌流 心肌线粒体的制备与MPTP开放的检测
方法 远距离预处理模型建立 在体心肌缺血再灌注损伤 离体心脏灌流 心肌线粒体的制备与MPTP开放的检测
888 ●●●●● 远距离预处理模型建立 0 。雄性SD大鼠水合氯醛腹腔麻醉 ·分离双下肢股动脉 ·微血管钳钳夹5min,造成双下肢缺血 ·松开5min,恢复双下肢血液灌流 ·以上步骤重复3次
远距离预处理模型建立 ⚫ 雄性SD大鼠水合氯醛腹腔麻醉 ⚫ 分离双下肢股动脉 ⚫ 微血管钳钳夹5min，造成双下肢缺血 ⚫ 松开5min，恢复双下肢血液灌流 ⚫ 以上步骤重复3次
888 ●●●●● ●●●● 在体心肌缺血再灌注损伤 ·缺血再灌注模型建立：左冠状动脉结扎，收紧 结扎线，造成缺血40min,放松结扎线后行再 灌注180min ·心肌梗死范围的测定：Evan蓝TTC染色 ·生化指标测定：血清丙二醛与超氧化物歧化酶
在体心肌缺血再灌注损伤 ⚫ 缺血再灌注模型建立：左冠状动脉结扎，收紧 结扎线，造成缺血40min，放松结扎线后行再 灌注180min ⚫ 心肌梗死范围的测定 ：Evan蓝 TTC 染色 ⚫ 生化指标测定：血清丙二醛与超氧化物歧化酶
●●● 离体心脏灌流 ●● ·头部击昏，迅速开胸，取出心脏 ●主动脉套上Langendorff心脏灌流装置，以新 鲜K-H液逆行恒压灌流心脏 ·记录左室功能指标：左室收缩压与左心室内压 力最大上升速率 ●停搏液灌流30min
离体心脏灌流 ⚫ 头部击昏，迅速开胸，取出心脏 ⚫ 主动脉套上Langendorff心脏灌流装置，以新 鲜K-H液逆行恒压灌流心脏 ⚫ 记录左室功能指标：左室收缩压与左心室内压 力最大上升速率 ⚫ 停搏液灌流30min
心肌线粒体制备与检测线粒体 888 ●●●●0 ●●●● PTP开放 889 ·剪取心室肌，充分剪碎、匀浆，采用差速离心 法分离线粒体 ·Bradford法蛋白定量 ·分光光度仪检测线粒体在540nm处吸光度的变 化来测定PTP开放
心肌线粒体制备与检测线粒体 PTP开放 ⚫ 剪取心室肌，充分剪碎、匀浆，采用差速离心 法分离线粒体 ⚫ Bradford法蛋白定量 ⚫ 分光光度仪检测线粒体在540nm处吸光度的变 化来测定PTP开放
888. ●●●●● 预期结果 ·远距离预处理减轻缺血再灌注损伤？ 。远距离预处理改善左心室功能？ ·远距离预处理抑制线粒体PTP开放？
预期结果 ⚫ 远距离预处理减轻缺血再灌注损伤？ ⚫ 远距离预处理改善左心室功能？ ⚫ 远距离预处理抑制线粒体PTP开放？
●●● 结论 ● ● 远距离预处理 抑制MPTP的开放 心肌保护
结论 远距离预处理 抑制MPTP的开放 心肌保护