第三章薄层色谱法 。原理 冬吸附剂 。展开剂的选配 ·薄层板的制备 。点样与展开 冬检出 。定性分析 。定量分析
第三章 薄层色谱法 ❖ 原理 ❖ 吸附剂 ❖ 展开剂的选配 ❖ 薄层板的制备 ❖ 点样与展开 ❖ 检出 ❖ 定性分析 ❖ 定量分析
概念： 薄层色谱法又称薄层层析法，是利用色谱原 理在薄层板上对混合物中各组分进行分离、 纯化和分析的方法，是把吸附剂或载体均 匀地铺在玻璃板上形成厚度一致的薄层，在 其下端点加试样溶液后，放入底部带有溶剂 (展开剂或移动相)的层析缸中，展开剂在薄 层板上移动至一定高度，使样本中各组分得 到分离
概念： 薄层色谱法又称薄层层析法，是利用色谱原 理在薄层板上对混合物中各组分进行分离、 纯化和分析的方法，是把吸附剂 或载体均 匀地铺在玻璃板上形成厚度一致的薄层，在 其下端点加试样溶液后，放入底部带有溶剂 (展开剂或移动相)的层析缸 中，展开剂在薄 层板上移动至一定高度，使样本中各组分得 到分离
发展： 属液相色谱，从柱色谱和纸色谱发展而来，兼有两者的特点。 1938年伊马洛夫用氧化铝、氧化镁在薄层板上分离植物成分； 1949年梅赫特等首先用黏合剂研制性能稳定的薄层-挥发油： 1954年柯齐纳等以薄层板为支持体来制备薄层； 1957年斯塔尔改进了仪器，提出了吸附剂规格和操作方法： 60年代用于农药分析，1965年薄层色谱
发展： 属液相色谱，从柱色谱和纸色谱发展而来，兼有两者的特点。 1938年伊马洛夫用氧化铝、氧化镁在薄层板上分离植物成分； 1949年梅赫特等首先用黏合剂研制性能稳定的薄层-挥发油； 1954年柯齐纳等以薄层板为支持体来制备薄层； 1957年斯塔尔改进了仪器，提出了吸附剂规格和操作方法； 60年代用于农药分析，1965年薄层色谱
薄层色谱法的特点是： ①展开时间短；一般只需十至几十分钟； ②分离能力强，谱带集中； ③灵敏度高，样品量很少时，点样几-几 十微克即可以进行定性； ④显色方便； ⑤仪器简单，操作方便
薄层色谱法的特点是： ①展开时间短；一般只需十至几十 分钟； ②分离能力强，谱带集中； ③灵敏度高，样品量很少时，点样几-几 十微克即可以进行定性； ④显色方便； ⑤仪器简单，操作方便
、 原理 按分离机制可以分为吸附、分配、离子交换及凝胶色谱 券+南有来药务新年极少世角，分配色谱法在农药 1.分配色谱原理： (1)正相薄层分配色谱：以纤维素或水、缓冲液、 极性有机溶剂处理过的硅胶为固定相，使用极性较弱 的溶剂为移动相，对于极性较小的组分有较大的比移 值； (2)反相薄层分配色谱：使用硅酮、石蜡等非极性 的溶剂处理过的硅胶或纤维素作固定相，其极性很小， 使用极性较强的溶剂作移动相，极性强的组分有较大 的比移值
一、原理 按分离机制可以分为吸附、分配、离子交换及凝胶色谱 法等，后两者在农药分析中极少应用，分配色谱法在农药 分析中亦用得不多。 1．分配色谱原理： （１）正相薄层分配色谱：以纤维素或水、缓冲液、 极性有机溶剂处理过的硅胶为固定相，使用极性较弱 的溶剂为移动相，对于极性较小的组分有较大的比移 值； （２）反相薄层分配色谱：使用硅酮、石蜡等非极性 的溶剂处理过的硅胶或纤维素作固定相，其极性很小， 使用极性较强的溶剂作移动相，极性强的组分有较大 的比移值
2.吸附薄层色谱法：在农药分析中主要使用吸附薄 层色谱法 （1)原理：由于样本各组分的理化性质不同，它们 在吸附剂上的吸附作用也不同，在展开剂中的洗脱作 用也不同，各组分随展开剂由原点向预定的前沿移动 时，在两相间反复进行吸附和解吸附，吸附强的组分 难于被展开剂溶解下来，移动速度小，吸附弱的成分 较易被展开剂解吸附，移动速度较大，移动速度的差 别，使各成分分离。各组分经展开后在薄层板上迁移 距离的数值，可用比移值R来表示
２．吸附薄层色谱法：在农药分析中主要使用吸附薄 层色谱法 （１）原理：由于样本各组分的理化性质不同，它们 在吸附剂上的吸附作用也不同，在展开剂中的洗脱作 用也不同，各组分随展开剂由原点向预定的前沿移动 时，在两相间反复进行吸附和解吸附，吸附强的组分 难于被展开剂溶解下来，移动速度小，吸附弱的成分 较易被展开剂解吸附，移动速度较大，移动速度的差 别，使各成分分离。各组分经展开后在薄层板上迁移 距离的数值，可用比移值Rf 来表示
比移值(R值)= 农药谱带中心至原点的距离(cm) 展开剂前沿至原点的距离(cm) 原点即在薄层板上点加样本的位置，一般在玻 板下端约2cm处。展开剂前沿是指展开剂移动的终 止位置，同一农药在相同展开剂、吸附剂及相同环 境条件下的比移值是不变的，可以作为农药定性的 依据
原点即在薄层板上点加样本的位置，一般在玻 板下端约2cm处。展开剂前沿是指展开剂移动的终 止位置，同一农药在相同展开剂、吸附剂及相同环 境条件下的比移值是不变的，可以作为农药定性的 依据。 f 农药谱带中心至原点的距离(cm) 比移值(R 值)＝ 展开剂前沿至原点的距离(cm)
不被固定相吸附，所以压、 =时心值为0.2 海、/乐事上人 来作为薄层色谱的定性参数，R义100即♪】 R值 R,值 前沿 参比物i 被测物s B 原点 (a) (b) 图5-38薄层色谱示意图
(2) 影响分离效率的因素主要有以下4点： a.展开剂的选择和移动速度：展开剂在一定的吸附 剂上移动的速度与其极性和黏度有关，因此选择合适的 溶剂或混合溶剂作展开剂达到适宜的展开速度是很重要 的 b.吸附剂的颗粒大小：吸附剂颗粒小，分辨率好； 但展开速度慢，延长展开时间会增加分子横向扩散或拖 尾现象，影响分辨效率；为了获得较好的分离，吸附剂 颗粒大小与展开的长度要协调好；如果颗粒大展开剂推 动过速而影响分离效果，则展开距离要延长；市售预制 板颗粒直径为10~15微米，预制高效薄层板颗粒直径 5~7微米，自制板所用的吸附剂为30微米或更大些
（2） 影响分离效率的因素主要有以下4点： a.展开剂的选择和移动速度：展开剂在一定的吸附 剂上移动的速度与其极性和黏度有关，因此选择合适的 溶剂或混合溶剂作展开剂达到适宜的展开速度是很重要 的。 b.吸附剂的颗粒大小：吸附剂颗粒小，分辨率好； 但展开速度慢，延长展开时间会增加分子横向扩散或拖 尾现象，影响分辨效率； 为了获得较好的分离，吸附剂 颗粒大小与展开的长度要协调好； 如果颗粒大展开剂推 动过速而影响分离效果，则展开距离要延长；市售预制 板 颗粒直径为10~15微米，预制高效薄层板颗粒直径 5~7微米，自制板所用的吸附剂为30微米或更大些
c.合适的展开距离：吸附剂颗粒在30微米时， 展开距离以10~15cm为宜； d样点的浓度与大小：点样时应使用样本浓 缩液，样点的直径尽可能小：点样时应使用样本 浓缩液，样点的直径应尽可能小，如点样成条 状，则其宽度应窄，即一边点样一边用吹风吹 干。点样距板端2cm,板的点样一端浸在展开剂 中1cm
c.合适的展开距离:吸附剂颗粒在30微米时， 展开距离以10~15cm为宜； d.样点的浓度与大小：点样时应使用样本浓 缩液，样点的直径尽可能小:点样时应使用样本 浓缩液，样点的直径应尽可能小，如点样成条 状，则其宽度应窄，即一边点样一边用吹风吹 干。点样距板端2cm，板的点样一端浸在展开剂 中1 cm