第二十一章 基因诊晰与基因治疗 Genetic Diagnosis and Gene Therapy
第二十一章 基因诊断与基因治疗 Genetic Diagnosis and Gene Therapy
基因变异致病类型 内源基因的变异 基因结构突变 基因表达异常 外源基因的入侵
基因变异致病类型 内源基因的变异 基因结构突变 基因表达异常 外源基因的入侵
第一节基因诊断 >概念和特点 >基因诊断的常用技术方法 基因诊断的应用
第一节 基因诊断 ➢概念和特点 ➢基因诊断的常用技术方法 ➢基因诊断的应用
基因诊断的概念和特点 概念 利用现代分子生物学和分子遗 传学的技术方法，直接检测基因 结构及其表达水平是否正常，从 而对疾病作出诊断的方法
一、基因诊断的概念和特点 概念 利用现代分子生物学和分子遗 传学的技术方法，直接检测基因 结构及其表达水平是否正常，从 而对疾病作出诊断的方法
特点 >针对性强 >特异性高 >灵敏度高 >适用性强，诊断范围广
特点 ➢针对性强 ➢特异性高 ➢灵敏度高 ➢适用性强，诊断范围广
二、基因诊断的常用技术方法 >核酸分子杂交技术 1.限制性内切酶酶谱分析法 2.DNA限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism,RFLP 析 3.等位基因特异寡核苷酸探针（allele specific oligonucleotide,ASO)杂交法 >聚合酶链反应(PCR) >基因测序 > 基因芯片
二、基因诊断的常用技术方法 ➢ 核酸分子杂交技术 1.限制性内切酶酶谱分析法 2.DNA 限 制 性 片 段 长 度 多 态 性 （ restriction fragment length polymorphism，RFLP）分 析 3.等位基因特异寡核苷酸探针（allele specific oligonucleotide，ASO）杂交法 ➢ 聚合酶链反应（PCR） ➢ 基因测序 ➢ 基因芯片
(一)核酸分子杂交技术 来源不同、具有互补碱基序列的核酸 (DNA或RNA)单链在适宜条件下互补配 对形成杂化双链结构 选用已知顺序片段作为探针，经放射性同位 素或非放射性物质标记后，再与未知的目的 核酸链进行杂交反应。 分离已杂交和未杂交的标记核酸片段，通过 标记信号的检测对未知的目的核酸链进行定 性、定量分析
（一）核酸分子杂交技术 • 来源不同、具有互补碱基序列的核酸 （DNA或RNA）单链在适宜条件下互补配 对形成杂化双链结构。 • 选用已知顺序片段作为探针，经放射性同位 素或非放射性物质标记后，再与未知的目的 核酸链进行杂交反应。 • 分离已杂交和未杂交的标记核酸片段，通过 标记信号的检测对未知的目的核酸链进行定 性、定量分析
镰状红细胞贫血患者基因组的限制性酶切分析 MstⅡ酶切位点(GCTNAGG) ■ 5 1.15kb 正常基因 1.35kb 突变基因
× MstⅡ酶切位点(GCTNAGG) 5´ 3´ 正常基因 5´ 3´ 突变基因 1.15kb 1.35kb 镰状红细胞贫血患者基因组的限制性酶切分析
镰状红细胞贫血患者基因组的限制性酶切分析 1.35kb 1.15kb 0.2kb 正常人 突变携带着 患者
+ ﹣ 0.2kb 1.15kb 1.35kb 正常人 突变携带着 患者 镰状红细胞贫血患者基因组的限制性酶切分析
RLFP分析法 a ) HindⅢ酶切染色体DNA 凝胶电泳分析酶切片段 1 2 3 2 3① AAGCTT AAGCTT TTCGAA TTCGAIA 切点 切点 2 2 AAGCTT AGGCTT TTCGAA TCCGAA 长片段 短片段 切点 DNA DNA
RLFP分析法