实验四油脂中脂肪酸含量测定 ,一气相色谱法测定大豆油中脂肪酸成分 一、目的与要求 油脂是食品加工中重要的原料和辅料，也是食品的重要组分和营养成分。必 需脂肪酸是维持人体生理活动的必要条件，人体所必需的脂肪酸一般取自食品用 油，即食用油脂。气象色谱法测定油脂脂肪酸组分是现在最常用的方法，也是一 些相关标准（如：GB/T17377)规定应用的检测方法。 甲酯化是分析动植物油脂脂肪酸成分的常用的前处理方法，也是常用的标准 方法(GB/T17376-1998)。 本实验要求了解气相色谱法测食用油脂肪酸组成的原理，掌握样品的前处理 方法，学习食用油脂中脂肪酸组分的色谱分析技术。 二、原理 本实验甲酯化方法采用国标-GB/T17376-1998,甘油酯皂化后，释出的脂肪 酸在三氟化硼存在下进行酯化，萃取得到脂肪酸甲酯用于气象色谱分析。 样品中的脂肪酸（甘油酯）经过适当的前处理（甲酯化）后，进样，样品在 汽化室被汽化，在一定的温度下，汽化的样品随载气通过色谱柱，由于样品中组 分与固定相间相互用的强弱不同而被逐一分离，分离后的组分，到达检测器 (detceter).时经检测口的相应处理（如FID的火焰离子化），产生可检测的信号。 根据色谱峰的保留时间定性，归一法确定不同脂肪酸的百分含量。 三、仪器与试剂 (一)仪器 1.气相色谱仪：具氢火焰离子化检测器(ID)。 2.恒温水浴锅 3.移液管 4.胶头滴管 5.小圆底烧瓶 6.冷凝管 7.样品瓶 (二)试剂 1.正己烷：分析纯，沸程60~90℃或30~60℃，重蒸。 2.氢氧化钾甲醇溶液
实验四 油脂中脂肪酸含量测定 ――― 气相色谱法测定大豆油中脂肪酸成分 一、目的与要求 油脂是食品加工中重要的原料和辅料，也是食品的重要组分和营养成分。必 需脂肪酸是维持人体生理活动的必要条件，人体所必需的脂肪酸一般取自食品用 油，即食用油脂。气象色谱法测定油脂脂肪酸组分是现在最常用的方法，也是一 些相关标准（如：GB/T17377）规定应用的检测方法。 甲酯化是分析动植物油脂脂肪酸成分的常用的前处理方法，也是常用的标准 方法（GB/T 17376-1998）。 本实验要求了解气相色谱法测食用油脂肪酸组成的原理，掌握样品的前处理 方法，学习食用油脂中脂肪酸组分的色谱分析技术。 二、原理 本实验甲酯化方法采用国标-GB/T 17376-1998，甘油酯皂化后，释出的脂肪 酸在三氟化硼存在下进行酯化，萃取得到脂肪酸甲酯用于气象色谱分析。 样品中的脂肪酸（甘油酯）经过适当的前处理（甲酯化）后，进样，样品在 汽化室被汽化，在一定的温度下，汽化的样品随载气通过色谱柱，由于样品中组 分与固定相间相互用的强弱不同而被逐一分离，分离后的组分，到达检测器 （detceter）时经检测口的相应处理（如FID的火焰离子化），产生可检测的信号。 根据色谱峰的保留时间定性，归一法确定不同脂肪酸的百分含量。 三、仪器与试剂 （一）仪器 1．气相色谱仪：具氢火焰离子化检测器（FID）。 2．恒温水浴锅 3．移液管 4．胶头滴管 5．小圆底烧瓶 6．冷凝管 7. 样品瓶 （二）试剂 1.正己烷：分析纯，沸程60～90℃或30～60℃，重蒸。 2.氢氧化钾甲醇溶液
3.三氟化硼甲醇溶液 4.饱和食盐水 5.市售大豆油 四、实验步骤 (一)样品预处理 甲酯化： 取2~4滴大豆油样品于xml的圆底烧瓶中，加入3ml的K0H甲醇溶液，70℃水 浴加热回流5min:取出冷却至室温（可用水冷），加入5ml三氟化硼溶液，70℃ 水浴加热回流5mim:取出冷却至室温，加入3ml正己烷，70℃水浴加热回流5mim: 取出冷却至室温，加入适量饱和食盐水溶液，静止3~5min,取上层油样1ml于试 样瓶中，进GC分析。 测定： (1)气相色谱条件 ①色谱柱：石英弹性毛细管柱，0.25mm(内径)×60m,内膜厚度0.32。 ②程序升温：150℃保持3mim,5℃min升温至220℃，保持10mim:进样口 温度250℃：检测器温度300℃。 ③气体流速：氮气：40 mL/min,氢气：40mL/min,空气：450mL/min,分 流比30：1。 ④柱前压：25kpa (2)色谱分析 自动进样，吸取14L试样液注入气相色谱仪，记录色谱峰的保留时间和峰 高。利用标准图谱确定每个色谱峰的性质（定性），利用软件自带的自动积分方 法计算各脂肪酸组分的百分含量。 五、注意事项 1.本法检测灵敏度高，在分析时应注意防止由于色谱柱中高沸点固定液、样品 净化不完全及载气不纯等带来的污染，使其灵敏度下降。 2.本方法采用极性色谱柱，样品处理时应尽力保证脱水彻底。 3.本实验采用自动进样，序列采集，工作站在序列运行之后不再允许更改序列 采集方法，所以在运行某一序列之前应确认程序编辑无误。 4.为了保护毛细管柱，一定要确认升温程序在该型号色谱柱的温度允许范围内。 七、思考题 1.气象色谱的原理，适用范围
3.三氟化硼甲醇溶液 4.饱和食盐水 5.市售大豆油 四、实验步骤 （一）样品预处理 甲酯化： 取2~4滴大豆油样品于xml的圆底烧瓶中，加入3ml的KOH甲醇溶液，70℃水 浴加热回流5min；取出冷却至室温（可用水冷），加入5ml三氟化硼溶液，70℃ 水浴加热回流5min；取出冷却至室温，加入3ml正己烷，70℃水浴加热回流5min； 取出冷却至室温，加入适量饱和食盐水溶液，静止3~5min，取上层油样1ml于试 样瓶中，进GC分析。 测定： （1）气相色谱条件 ①色谱柱：石英弹性毛细管柱，0.25mm（内径）×60m，内膜厚度0.32。 ②程序升温： 150℃保持3min，5℃/min升温至220℃，保持10min；进样口 温度250℃；检测器温度300℃。 ③气体流速：氮气：40mL/min，氢气：40mL/min，空气：450mL/min，分 流比30﹕1。 ④柱前压：25kpa （2）色谱分析 自动进样，吸取1μL试样液注入气相色谱仪，记录色谱峰的保留时间和峰 高。利用标准图谱确定每个色谱峰的性质（定性），利用软件自带的自动积分方 法计算各脂肪酸组分的百分含量。 五、注意事项 1．本法检测灵敏度高，在分析时应注意防止由于色谱柱中高沸点固定液、样品 净化不完全及载气不纯等带来的污染，使其灵敏度下降。 2．本方法采用极性色谱柱，样品处理时应尽力保证脱水彻底。 3．本实验采用自动进样，序列采集，工作站在序列运行之后不再允许更改序列 采集方法，所以在运行某一序列之前应确认程序编辑无误。 4．为了保护毛细管柱，一定要确认升温程序在该型号色谱柱的温度允许范围内。 七、思考题 1.气象色谱的原理，适用范围
2检测某一样品脂肪酸组成常用的分离、分析方法
2.检测某一样品脂肪酸组成常用的分离、分析方法