实验三食品中粗脂肪含量的测定（索氏抽提法） 一、目的与要求 1、学习索氏抽提法测定脂肪的原理与方法 2、掌握索氏抽提法基本操作要点及影响因素 二、原理 利用脂肪能溶于有机溶剂的性质，在索氏提取器中将样品用无水乙醚或石油醚等溶 剂反复萃取，提取样品中的脂肪后，蒸去溶剂，所得的物质即为脂肪或称粗脂肪。 三、仪器与试剂 1、仪器 (1)、索氏提取器如图3-3所示 (2)、电热恒温鼓风干燥箱 冷管 (3)、干燥器 (4)、恒温水浴箱 2、试剂 (1)无水乙酰（不含过氧化物）或石油酰（沸程30-60°C) (2)滤纸筒 四、测定步骤 悲纸 1、样品处理 (1)固体样品：准确称取均匀样品2-5g(精确至0.01g),装入 滤纸筒内。 (②)液体或半固体：准确称取均匀样品5-10g(精确至0.01mg), 图33索氏提取器 乙醚的脱脂棉擦净所用器皿，并将棉花也放入滤纸筒内。 2、索氏提取器的清洗 将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在103°C士2°C的烘 箱内干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg)。 3、样品测定 ()将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶，由抽提器 冷凝管上瑞加入乙醚或石油酰至瓶内容积的23处，通入冷凝水，将底瓶浸没在水浴中加 热，用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口。 (2)抽提温度的控制：水浴温度应控制在使提取液在每6-8mi回流一次为宜。 (3)抽提时间的控制：抽提时间视试样中粗脂肪含量而定，一般样品提取6-12h,坚 果样品提取约16h。提取结束时，用毛玻璃板接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。 (④)提取完毕。取下脂肪烧瓶，回收乙醚或石油酰。待烧瓶内乙醚仅剩下1 2mL时 在水浴上赶尽残留的溶剂，于95一105°C下千燥2h后，置于干燥器中冷却至室温，称量。 继续干燥30mi后冷却称量，反复干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg)
实验三 食品中粗脂肪含量的测定（索氏抽提法） 一、目的与要求 1、 学习索氏抽提法测定脂肪的原理与方法. 2、 掌握索氏抽提法基本操作要点及影响因素. 二、原理 利用脂肪能溶于有机溶剂的性质，在索氏提取器中将样品用无水乙醚或石油醚等溶 剂反复萃取，提取样品中的脂肪后，蒸去溶剂,所得的物质即为脂肪或称粗脂肪。 三、仪器与试剂 1、 仪器 （1）、索氏提取器 如图 3-3 所示 （2）、电热恒温鼓风干燥箱 （3）、干燥器 （4）、恒温水浴箱 2、试剂 （1）无水乙醚（不含过氧化物）或石油醚（沸程 30-60°C） （2）滤纸筒 四、测定步骤 1、样品处理 (1) 固体样品: 准确称取均匀样品 2-5g（精确至 0.01mg），装入 滤纸筒内。 (2) 液体或半固体: 准确称取均匀样品 5-10g（精确至 0.01mg）， 置于蒸发皿中,加入海砂约 20 g,搅匀后于沸水浴上蒸干,然 后在 95-105°C 下干燥。研细后全部转入滤纸筒内，用沾有 乙醚的脱脂棉擦净所用器皿，并将棉花也放入滤纸筒内。 2、 索氏提取器的清洗 将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在 103°C±2°C 的烘 箱内干燥至恒重（前后两次称量差不超过 2mg）。 3、 样品测定 (1) 将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶，由抽提器 冷凝管上端加入乙醚或石油醚至瓶内容积的 2/3 处，通入冷凝水，将底瓶浸没在水浴中加 热，用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口。 (2) 抽提温度的控制：水浴温度应控制在使提取液在每 6-8min 回流一次为宜。 (3) 抽提时间的控制: 抽提时间视试样中粗脂肪含量而定，一般样品提取 6-12h，坚 果样品提取约 16h。提取结束时，用毛玻璃板接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。 (4) 提取完毕。取下脂肪烧瓶，回收乙醚或石油醚。待烧瓶内乙醚仅剩下 1—2mL 时， 在水浴上赶尽残留的溶剂，于 95—105°C 下干燥 2h 后，置于干燥器中冷却至室温，称量。 继续干燥 30min 后冷却称量，反复干燥至恒重（前后两次称量差不超过 2mg）
五、结果计算 1.数据记录表 样品的质量/g 脂肪烧瓶的质量m/g 脂肪和脂肪烧瓶的质量m/g 第一次第二次第三次恒重值 1、计算公式 = m,-m×100 式中：X—一样品中粗脂肪的质量分数，% 一一样品的质量， m一一脂肪烧瓶的质量，g: m一一脂肪和脂肪烧瓶的质量，g 大、注意事项 1、抽提剂乙醚是易燃，易爆物质，应注意通风并且不能有火源。 2、样品滤纸色的高度不能超过虹吸管，否则上部脂肪不能提尽而造成误差。 3、样品和醚浸出物在烘箱中干燥时，时间不能过长，以防止极不饱和的脂肪酸受热 每化而增加质量】 4、脂肪烧瓶在烘箱中干燥时，瓶口侧放，以利空气流通。而且先不要关上烘箱门 与90°C以下鼓风干燥10一20min,驱尽残余溶剂后再将烘箱门关紧，升至所需 温度。 5、乙醚若放置时间过长，会产生过氧化物。过氧化物不稳定，当蒸馏或干燥时会发 生爆炸，故使用前应严格检查，并除去过氧化物。 (1) 检查方法：取5l乙醚于试管中，加K(100g/L)溶液1l,充分振摇1min。 静置分层。若有过氧化物则放出游离碘，水层是黄色（或加4滴5g/L淀粉 指示剂显蓝色)，则该乙醚需处理后使用。 (2)去除过氧化物的方法：将乙醚倒入蒸馏瓶中加一段无锈铁丝或铝丝，收集重 蒸馏乙醚。 6、反复加热可能会因脂类氧化而增重，质量增加时，以增重前的质量为恒重。 思考题： 1、简述索氏抽提器的提取原理及应用范用？ 使用乙醚作脂肪提取溶剂时，应注意的事项有哪些？为什么？
五、结果计算 1.数据记录表 1、 计算公式 X = m m1 m0 − ×100 式中：X-样品中粗脂肪的质量分数,%; m-样品的质量,g; m0 -脂肪烧瓶的质量,g; m1 -脂肪和脂肪烧瓶的质量,g. 六、注意事项 1、 抽提剂乙醚是易燃，易爆物质，应注意通风并且不能有火源。 2、 样品滤纸色的高度不能超过虹吸管，否则上部脂肪不能提尽而造成误差。 3、 样品和醚浸出物在烘箱中干燥时，时间不能过长，以防止极不饱和的脂肪酸受热 氧化而增加质量。 4、 脂肪烧瓶在烘箱中干燥时，瓶口侧放，以利空气流通。而且先不要关上烘箱门， 与 90°C 以下鼓风干燥 10—20min，驱尽残余溶剂后再将烘箱门关紧，升至所需 温度。 5、 乙醚若放置时间过长，会产生过氧化物。过氧化物不稳定，当蒸馏或干燥时会发 生爆炸，故使用前应严格检查，并除去过氧化物。 （1） 检查方法：取 5mL 乙醚于试管中，加 KI(100g/L)溶液 1mL，充分振摇 1min。 静置分层。若有过氧化物则放出游离碘，水层是黄色（或加 4 滴 5 g/L 淀粉 指示剂显蓝色），则该乙醚需处理后使用。 （2） 去除过氧化物的方法：将乙醚倒入蒸馏瓶中加一段无锈铁丝或铝丝，收集重 蒸馏乙醚。 6、 反复加热可能会因脂类氧化而增重，质量增加时，以增重前的质量为恒重。 思考题： 1、 简述索氏抽提器的提取原理及应用范围？ 2、 潮湿的样品可否采用乙醚直接提取？为什么？ 3、 使用乙醚作脂肪提取溶剂时，应注意的事项有哪些？为什么？ 样品的质量 m/g 脂肪烧瓶的质量 m0/g 脂肪和脂肪烧瓶的质量 m1/g 第一次 第二次 第三次 恒重值