AMH检测技术 沈恺源14301050219 卵巢功能早衰(POF)是导致女性不孕症的直接原因之一,而造成POF的部分 原因是由于卵巢储备功能差。目前,激素检测是临床判断卵巢功能储备的一种方 法而AMH是激素检测临床研究中的常用指标之一。 1技术原理 (1)抗苗勒氏管激素(Antⅰ- Mullerian hormone,AMH)是一种糖蛋白,由 两个72kD的二聚体单体组成,属于转化生长因子-B(TGF-B)超家族成员, 能够反映整个生命周期的卵泡活性,AMH值会随着卵巢功能的变化呈起伏变化, AMH指数越高,说明卵子的库存量越大,生育能力自然就较强。AMH降低时, 就代表着卵巢正在老化,也就是女性生育力的衰退。通过检测AMH能够有效评 估卵巢储备功能,预测绝经期,将生育能力的保留进行个体化设计,帮助患者及 时制定生育计划 AMH随年龄增长而下降 02/00066 25262728293031323334353637383940414243 (2)AMH检测试剂盒采用三步夹心酶联免疫法定量检测:在第一步,将标准 品、质控品和样本加入到包被了抗体的微孔中并孵育。在第一次孵育和洗涤之后, 微孔中加入生物素标记的抗体并进行孵育。在第二次孵育和洗涤之后,微孔中加 入链霉亲和素-辣根过氧化物酶结合物(SHRP)进行孵育。在第三次孵育并且清 洗之后,加入显色液(TMB)进行孵育,随后加入酸性终止液结束反应。酶和底
AMH 检测技术 沈恺源 14301050219 卵巢功能早衰(POF)是导致女性不孕症的直接原因之一，而造成 POF 的部分 原因是由于卵巢储备功能差。目前，激素检测是临床判断卵巢功能储备的一种方 法而 AMH 是激素检测临床研究中的常用指标之一。 1.技术原理 （1）抗苗勒氏管激素（Anti-Müllerian hormone，AMH）是一种糖蛋白，由 两个 72kD 的二聚体单体组成，属于转化生长因子-β（TGF-β）超家族成员， 能够反映整个生命周期的卵泡活性，AMH 值会随着卵巢功能的变化呈起伏变化。 AMH 指数越高，说明卵子的库存量越大，生育能力自然就较强。AMH 降低时， 就代表着卵巢正在老化，也就是女性生育力的衰退。通过检测 AMH 能够有效评 估卵巢储备功能，预测绝经期，将生育能力的保留进行个体化设计，帮助患者及 时制定生育计划。 （2）AMH 检测试剂盒采用三步夹心酶联免疫法定量检测：在第一步，将标准 品、质控品和样本加入到包被了抗体的微孔中并孵育。在第一次孵育和洗涤之后， 微孔中加入生物素标记的抗体并进行孵育。在第二次孵育和洗涤之后，微孔中加 入链霉亲和素-辣根过氧化物酶结合物（SHRP）进行孵育。在第三次孵育并且清 洗之后，加入显色液（TMB）进行孵育，随后加入酸性终止液结束反应。酶和底
物反应程度由主波长为450nm,参考波长为630nm的双波长来测定,测得的 吸光度反应了样品与校准品中被检测物的浓度,且成正相关,通过建立对数-对 数标准曲线方程,求得待测样本的激素的浓度 SHRP 捕获抗体 信号获取 生物素 标记抗体 抗原 2技术的应用 (1)1999年,第一种AMH商业化检测试剂盒成功上市。 (2)国内首个全自动AMH检测——罗氏诊断 Elecsys AMH已于2015年4 月正式在中国获批上市,将对女性不孕症个体化诊疗及生殖健康等领域产生重要 意义,帮助临床医生准确评估女性生育能力,制定生育计划,进而将AMH检测 纳入常规临床实践 (3)2015年6月,北京华博不孕不育医院成为华北地区首家引进并配备全自 动AMH检测系统的医院,将全自动AMH检测技术正式运用到临床检测中,为 有生育要求的女性及不孕症患者提供全方位的生殖健康管理。 3技术的优缺点 (1)优点: ①检测迅速,仅18分钟便可得到可靠结果 ②需血量少,只需手肘内侧静脉抽血2m,且不必空腹抽血。 ③不受月经周期、药物和激素治疗的影响,随时可检查,任何时间的浓度都一样 稳定。 ④AMH存在于滤泡颗粒层细胞中,通过检测数值即可明确得知卵子库存量
物反应程度由主波长为 450nm，参考波长为 630nm 的双波长来测定，测得的 吸光度反应了样品与校准品中被检测物的浓度，且成正相关，通过建立对数-对 数标准曲线方程，求得待测样本的激素的浓度。 2.技术的应用 （1）1999 年，第一种 AMH 商业化检测试剂盒成功上市。 （2）国内首个全自动 AMH 检测——罗氏诊断 Elecsys® AMH 已于 2015 年 4 月正式在中国获批上市，将对女性不孕症个体化诊疗及生殖健康等领域产生重要 意义，帮助临床医生准确评估女性生育能力，制定生育计划，进而将 AMH 检测 纳入常规临床实践。 （3）2015 年 6 月，北京华博不孕不育医院成为华北地区首家引进并配备全自 动 AMH 检测系统的医院，将全自动 AMH 检测技术正式运用到临床检测中，为 有生育要求的女性及不孕症患者提供全方位的生殖健康管理。 3.技术的优缺点 （1）优点： ○1 检测迅速，仅 18 分钟便可得到可靠结果。 ○2 需血量少，只需手肘内侧静脉抽血 2ml，且不必空腹抽血。 ○3 不受月经周期、药物和激素治疗的影响，随时可检查，任何时间的浓度都一样 稳定。 ○4 AMH 存在于滤泡颗粒层细胞中，通过检测数值即可明确得知卵子库存量
⑤全自动AMH检测则可生成准确可靠的标准化结果来评估卵巢储备 ⑥在生殖医学方面具有发展潜力,透过AMH数值可以让医师斟酌使用排卵针剂、 药物的用量,面对患者咨询时也能提供较明确的建议。 AMH检测技术与其它检测卵巢储备功能的方法及特点对比 具体指标 自动A■H检测 AM数值 教感性和特异性高,周期内和 人工AH检测 检測稳定性不确定,易羹干扰 基础激素水平测定 ①基础促卵泡激素(FH)水平 临床灵敏度低,可性低,周 ③基础FH/黄体生成素(LH)比值 基础抑制(INH)水平 细胞因子检测 ②基础素(LBP)水平 预测測卵巢储备方面效果不理想 ①卵泡(AFC)计数 超声检查 卵血流观 棕茶达架图 瓢米芬刺激实验需 诱发性检测方法 氧米芬刺激实验 ③促性腺激素刺激实验 价格昂贵,临床应 直一般 (2)缺点:国内AMH检测技术尚未完全铺开,同时属于自费项目,可能对 些对象造成经济负担 4.总结及展望 AMH是一种最直接检査卵巢功能的检测,大龄女性若想要尝试试管婴儿 可以在现在常规的雌性激素六项检测后增加该项目的检测。此外,该检测还对试 管婴儿的个体化诊疗具有积极作用。由于在治疗不孕症前以及做试管婴儿时,需 要对女性的卵巢储备功能进行全面的了解,AMH检测可在促排卵前了解每一位 女性的个体差异,以定制最为适合的个体化治疗方式提高试管婴儿的成功率 美国斯坦福大学医学院教授罗兰·迪格曼( Roland Diggelmann)表示 “AMH检测能够同时为医生和女性提供具有指导意义的生育能力评分,检测女 性卵巢储备能力,从而进行生育规划,或为疾病治疗提供指导,对于现代晩婚晩 育的女性、不孕的女性及渴望二胎的高龄产妇具有重大意义,在不孕症治疗上有 巨大的应用前景
○5 全自动 AMH 检测则可生成准确可靠的标准化结果来评估卵巢储备。 ○6 在生殖医学方面具有发展潜力，透过AMH数值可以让医师斟酌使用排卵针剂、 药物的用量，面对患者咨询时也能提供较明确的建议。 AMH 检测技术与其它检测卵巢储备功能的方法及特点对比： （2）缺点：国内 AMH 检测技术尚未完全铺开，同时属于自费项目，可能对一 些对象造成经济负担。 4．总结及展望 AMH 是一种最直接检查卵巢功能的检测，大龄女性若想要尝试试管婴儿， 可以在现在常规的雌性激素六项检测后增加该项目的检测。此外，该检测还对试 管婴儿的个体化诊疗具有积极作用。由于在治疗不孕症前以及做试管婴儿时，需 要对女性的卵巢储备功能进行全面的了解，AMH 检测可在促排卵前了解每一位 女性的个体差异，以定制最为适合的个体化治疗方式提高试管婴儿的成功率。 美国斯坦福大学医学院教授罗兰·迪格曼(Roland Diggelmann)表示： “ AMH 检测能够同时为医生和女性提供具有指导意义的生育能力评分，检测女 性卵巢储备能力，从而进行生育规划，或为疾病治疗提供指导，对于现代晚婚晚 育的女性、不孕的女性及渴望二胎的高龄产妇具有重大意义，在不孕症治疗上有 巨大的应用前景
参考文献: [冂]席稳燕.血AMH与PCOS妇女辅助生殖技术结局的关系以及 AMH mRNA在 不同卵巢储备妇女颗粒细胞中的差异表达[D]中南大学2012-5 [2]Knauff et al. j Clin Endocrinol Metab, March 2009, 94 (3): 786-792 [3]王宇鹏年龄大未必卵巢衰老AMH检测帮助女性评估生育能力:人民网 2015-6-17 [4]图片来自百度
参考文献： [1]席稳燕. 血 AMH 与 PCOS 妇女辅助生殖技术结局的关系以及 AMH mRNA 在 不同卵巢储备妇女颗粒细胞中的差异表达[D] 中南大学.2012-5 [2] Knauff et al. J Clin Endocrinol Metab, March 2009, 94 (3):786 –792 [3]王宇鹏 年龄大未必卵巢衰老 AMH 检测帮助女性评估生育能力：人民网 2015-6-17 [4]图片来自百度