第七章 一、纸层析和薄层层 析分离过程 色谱分析法 二操作技术 三、特点及应用 第十节 纸层析和薄层层析法 下页 2024/9/13 帽动 越回
2024/9/13 第七章 色谱分析法 一、纸层析和薄层层 析分离过程 二、操作技术 三、特点及应用 第十节 纸层析和薄层层析法
纸层析和薄层层析分离过程 纸层析和薄层层析也属于色谱分析法。但与其它色谱 方法不同的是在分离过程中一般不使用动力源。 纸层析和薄层层析 流动相的移动是依靠毛 层析室 细作用。 将试样点在色谱滤纸 层析 或层析板的一端,并将 组份闭点 展开剂 层析拔 该端浸在作为流动相的 展开剂 溶剂(常称之为展开剂 纸层析装置 薄层层析装置 )中,随着溶剂向上的 移动,经过试样点时, 斑点中心移动的距离 带动试样向上运动。 R 溶剂前沿移动的距离 2024/9/3 下页 返回
2024/9/13 一、纸层析和薄层层析分离过程 纸层析和薄层层析也属于色谱分析法。但与其它色谱 方法不同的是在分离过程中一般不使用动力源。 纸层析和薄层层析 流动相的移动是依靠毛 细作用。 将试样点在色谱滤纸 或层析板的一端,并将 该端浸在作为流动相的 溶剂(常称之为展开剂 )中,随着溶剂向上的 移动,经过试样点时, 带动试样向上运动
二、操作技术 1.层析纸和层析板 特制的色层滤纸。按需要剪裁成长条形(或筒型)。层 析板是用专门的涂布器把浆状的吸附剂(硅胶或氧化铝 200250目)均匀地涂在长条形玻璃板上(厚度0.15 ~0.5mm)。干燥后即可使用。 亲。 2024/9/13 上页 下页返回
2024/9/13 二、操作技术 1.层析纸和层析板 特制的色层滤纸。按需要剪裁成长条形(或筒型)。层 析板是用专门的涂布器把浆状的吸附剂(硅胶或氧化铝 ,200~250目)均匀地涂在长条形玻璃板上(厚度0.15 ~0.5mm)。干燥后即可使用
2.展开剂 由一种或多种溶剂按一定比例组成。如用纸层析分离 氨基酸时,常用的展开剂组成和配比为:正丁醇:乙酸: 水=4:1:1。 06c0 2024/9/3 上页 下页 返回
2024/9/13 2.展开剂 由一种或多种溶剂按一定比例组成。如用纸层析分离 氨基酸时,常用的展开剂组成和配比为:正丁醇:乙酸: 水=4:1:1
3.点样 衫 用微量注射器或玻璃毛细管吸取 0 一定量试样点在原点上。试样点的直 径一般应小于5mm。可并排点多个试 样同时展开。 2024/9/3 上页下页了返回
2024/9/13 3. 点样 用微量注射器或玻璃毛细管吸取 一定量试样点在原点上。试样点的直 径一般应小于5mm。可并排点多个试 样同时展开
4.显色、检测 有些组份在紫外光照射下产生荧光,可在紫外灯下 用铅笔将组份斑点描绘出来。常用的显色方法有喷洒显 色剂、碘蒸气熏或氨水熏等。 20249/3 上页 下页 返回
2024/9/13 4.显色、检测 有些组份在紫外光照射下产生荧光,可在紫外灯下 用铅笔将组份斑点描绘出来。常用的显色方法有喷洒显 色剂、碘蒸气熏或氨水熏等
三、特点及应用 平板色谱简单、方便、及操作费用低, 0 可以在一块层析板上同时展开多个试样及 将多条滤纸同时展开。 采用方形薄层板还可以方便的进行二维展 开,即按一般方法展开后,改变方向和展开 剂再次展开,进一步改善分离效果。 试样一般不需要经过预处理即可分离。 二维展开 2024/9/13 下页 返回
2024/9/13 三、特点及应用 • 平板色谱简单、方便、及操作费用低, • 可以在一块层析板上同时展开多个试样及 将多条滤纸同时展开。 • 采用方形薄层板还可以方便的进行二维展 开,即按一般方法展开后,改变方向和展开 剂再次展开,进一步改善分离效果。 • 试样一般不需要经过预处理即可分离。 •
缺点: 缺点: 分离效率较低,不适用挥发性试 样分离。定性定量不便。 0 应用:平板色谱法在染料、农药、医药、 有机酸碱类化合物、糖类化合物、氨基酸、 蛋白质及中草药中有效成分的分离分析中经 常被使用。也可以用于无机离子的分离。还 经常作为高效液相色谱的一种预试方法。 二维展开 2024/9/3 上页 下页 返回
2024/9/13 缺点: • 缺点: 分离效率较低,不适用挥发性试 样分离。定性定量不便。 • 应用:平板色谱法在染料、农药、医药、 有机酸碱类化合物、糖类化合物、氨基酸、 蛋白质及中草药中有效成分的分离分析中经 常被使用。也可以用于无机离子的分离。还 经常作为高效液相色谱的一种预试方法