《临床免疫学检验》理论教学大纲 (供医学检验、医学检验技术专业本科使用) I前言 临床免疫学是医学科学的一个分支。临床免疫学研究的对象是某些特定疾病过程中的检 验理论、临床应用、方法评价及实际应用的科学。 临床免疫学以基础免疫学、分子生物学、生物化学、细胞生物学、病理生理学等医学课 程为基础,通过检验理论及实验方法的学习,培养学生扎实的理论基础,科学的工作作风和 理论联系实际分析解决问题的能力。 本大纲适用于医学检验,医学检验技术专业本科使用。现将大纲使用中有关问题说明如 下: 一为了使教师和学生史好地掌握教材,大纲每一章节均山教学目的、教学要求和教学内容 三部分。教学目的注明教学日标,教学要求分掌握、熟悉和了解二个绒别,教学内容与 教学要求级别对应,并统一标示(核心内容即知识点以下划实线,重点内容以下划嘘线, 一般内容不标示)便于学生重点学习。 二教师在保证大纲核心内容的前提下,可根据不同教学手段,讲授重点内容和介绍一般内 容,有些内容刑给学生自学。 三总教学参考学时为90学时,其中理论6学时,实验1学时。理论与实验学时之比 1.05:1。课程代码903002 四教材:《临床免疫学检验》,人民卫生出版社,工兰兰、许化溪主编,第5版,2012 年5月。 临床微生物免疫检验教研室 2014年10月
Ⅱ正文 第一章绪论 一教学目的 介绍兔疫学发展简史。了解临床免疫学发展历程。熟悉临床免疫学的临床应用和现 代免疫学的发尼趋势, 二教学要求 1.掌握基本概念:临床免疫学、免疫应答、免疫组织与器官、免疫细胞、免疫分子。 2。熟悉临床免疫学基础理论的临床应用,现代免疫学检验的发展趋势,免疫学检测技术在 参与免疫性病理损伤的免疫细胞、免疫分子检测中的作用。 3.了解免疫学检验与方法在免疫性疾病的发病机制研究和临床诊断中的地位。 三教学内容 (一)免疫学简介:免疫学修念与免疫应答,免疫组织与器宜(中枢、外圆免疫器官、淋巴 细胞循环与归巢),兔疫细胞(淋世细胞、免疫辅助细胞),免疫分子(免疫球蛋白、补 体、细胞因子、黏附因子、CD抗原)。 (二)临床免疫学:慨念,兔疫病黑移植兔疼肿旗兔瘼感染鬼慕 (三)临床免疫学与免疫检验:免疫学技术发展,临床免疫学与免疫检验 第二章抗原抗体反应 一教学目的 通过本章学习,使学生认识和掌握抗原抗体反应的基础是抗原决定簇与相应抗体高变区 分子结构的互补性和亲和性。学习免疫反应的相关基本概念和特点,是进一步学习临床免疫 学的基础。 二教学要求 【.掌握抗原抗体反应的特点及影响因素:等价带、前带和后带现象的概念。 2.熟悉抗原抗体反应的概念,原理,抗原抗体结合力、亲和性和亲合力 3.了解抗原抗体反应的类型。 三教学内容
(一)抗原抗体反应的概念,原理:抗原抗体结食力亲和性和亲盒力。热原抗体反应是抗 愿点想盛抗体特是性的结仓反应,基基础是拉原热定藤点应热体高李区分子结构的万补 性与亲和性。抗原抗体反应发生在体内称为机体的体液免疫应答效应,在体外则主要用于免 疫学诊断。 (二)抗原抗体反应的特点:特异性、可逆性、比例性(等价带、前带、后带),阶段性。 (二)影响抗原抗体反应的因素:反应物自身因素(抗原、抗体),环境因素(中解质、酸 破度、温度)小 (四)抗原抗体反应的类型:凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应、标记免疫 反应。 第三章免疫原和抗血清的的制备 一教学目的 通过学习本章抗血清的制备及相关概念,了解抗体的特异性是免疫反应的基础,抗原的 纯化则是制备高效价特异性抗体的前提。 二教学要求 1,掌握抗血清的制备及鉴定方法:免疫原、半抗原、抗血清、多克隆抗体的概念 2.熟悉免疫佐剂的概念、种族及作用机制:颗粒性抗原的制备、细胞破碎方法、可溶性抗 原的提取纯化及鉴定。 3.了解人工结合抗原、人工合成抗原的制备,常用拔体的类型、半抗原与拔体的连接方法、 半抗原性免疫原的的鉴定、基因工程抗原的制备。 三教学内容 (一)免疫原的制备:颗粒性抗原制备可溶性热原抛备细购破碎友法可溶性热原煎据 取纯化点鉴滨)和人工抗原的制备(人工结合抗原、人工合成抗原和基因工程抗原的制备)。 (二)免疫佐剂:兔疫体剂是顶先惑点热原同时注入体内:…可增强机体对该热原的集疫应答 或弘变兔疼应瓷类型的物瓜种类包括细煦因子…卡介萬美毛服…波修石蜡和胞其酸能。 常用于物的兔疫佐剂是福氏佐剂:兔疫佐剂的作用机制。 (三)抗血清的制备:动物的选择、免疫方法、动物采血、抗血洁的纯化(亲和层折法,吸 附法、盐析法和离子交换层析法等、鉴定(特异性、效价、纯度和亲和力)和保存。 第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备技术
一教学目的 通过木章理论讲解,了解单克隆抗体特异性强,纯度高,易于大量制备,基因工程抗体 保州了原抗体的生物学活性,减少或去除了无关成分,是抗体制备技术的发育发尼。对单克 隆抗体和基因工程抗体有一个比较全面的理性认识。 二教学要求 1.学握单克隆抗体的概念、主婴特点及杂交瘤技术的原理。 2.熟悉单克隆抗体制备技术。 3.了解基因工程抗体的概念、技术和优点。单克隆抗体在医学中的应用和噬菌体抗体库技 术的原理与应用。 三教学内容 (一)杂交擅技术的基本原理(杂交瘤技术,阳性杂交瘤细胞的克降化培养与冻存)。单克 隆抗体的概念:山一株仪识别一种抗原表位的B细胞克隆产生的同源抗径。特异性强、纯 度及有效抗体含量高、制备抗体的批间差异小,易于标准化和大量制备。 (二)单克隆抗体的制备技术:单克隆抗体的产生纯化性质鉴定和特性。 (三)基因工程抗体技术:基因工程抗体是在基因水平上对编码g的分子基因切割、拼接 与修饰并导入受体细胞后表达出的新型抗体分子。基因工程抗体保州了原抗体的生物学活 性,减少或去除了无关结构,具有广泛的应用前录。隆低或消除排斥反应:分子量小,易于 穿透血管壁,进病灶核心:可根据需要制:成本低。基因工程抗体技术(人源化抗体、小分 子抗体、抗体融合蛋白、双特异性抗体、胞内抗体、噬南体抗体库技术)。 (四)单克隆抗体与基因工程抗体的应用。 第五章凝集反应和沉淀反应 (此章为自学章节) 第六章放射免疫技术 (此章为自学章节) 第七章荧光免疫技术 一教学目的 通过本章学习,了解荧光免疫技术是将抗原抗体反应的特异性与荧光技术的敏感性相结
合的一种检测系统,包括荧光显微镜技术、时间分荧光免疫测定、荧光偏振免疫测定、荧 光酶免疫测定,其中荧光抗体技术在临床免疫检验中应用较为重要。 二教学要求 1.掌握荧光显微镜技术的主要类型及原理。荧光效率、荧光淬灭、荧光偏振、荧光寿命 激发光游、荧光抗体的概念。常用的荧光色素。 2.熟悉荧光显微镜技术的临床应用:荧光抗体的制备及鉴定:时间分辨荧光免疫测定的原 理及方法类型:荧光楠免疫测定的原理及方法类型。 3.了解荧光偏振免疫测定的原理及方法学评价:荧光免疫测定的应用。 三教学内容 (一)荧光免疫技术的特点:荧光效率,荧光淫灭、荧光信返,荧光寿血、激发光谱,荧光 抗体的概念。荧光物质种类及特点。 (二)荧光抗体的制备:抗体要求荣光素要求荣光素标记抗体的友法然化蒸光杭体 鉴定 (三)荧光显微镜技术的基本原理:①标本的制作。②荧光抗体染色与结果判断(直接法 间接法、双标记法、荧光抗体检测结果判断)。③荧光显微镜的基本结构。周相抗原与标本 中相应抗体反应结合,再与荧光素标记抗抗体结合在荧光显微镜下产生荧光。 (四)荧光免疫分析:时间分机茨光兔疫测定的原理方法类型:荧光偏振免疫测定的原理 及方法学评价:荣光腹兔疫测定的原黑收左法类黑。 (五)荧光免疫技术的应用:荣光显微镜技术的顺应用,荧光免疫测定的应用。 第八章酶免疫技术 教学目的 通过本章学习,了解椭免疫技术是最常用的免疫标记技术,广泛用于抗原抗体的检测及 免疫组化实验,对其分类及技术要点和实验原理的掌握是实验室工作者必备的基础知识, 二教学要求 1.掌握酶联免疫吸附试验(ELISA)的基本原理、方法类型及反应原理。常用的酶和作用的底 物。包被、封闭、均相酶免疫分析、EMT、CEDIA和牌结合物的概念。 2.熟悉酶免疫技术的分类,均相隋免疫分析和异相酶免疫分析的分类及原理。固相我体的 种类及特点
3.了解悔免疫技术的特点及发展史,酶标抗体或抗原的制备方法及鉴定。酶免疫技术的临 床应用。 三教学内容 (一)酶免疫技术的特点:Q德的要素:②常用的睡:③常用的底物。南标抗休或抗原的制 备方法及鉴定。圆相载体的种类悠选搓,包被与封团。 (二)膊免疫技术的分类:均相雕兔疫分斯(隙煞太兔疫分杯这术…克降腰供体兔疼分机) 和异想腹兔疫分杠(液想腹兔疫分机、固相酶兔疫分板)。 (二)酶联免疫吸附试验:基本原用,双抗体(原)必心法、双位点一步法、竞争法、创接 法、捕狄法的原理及特点。 (四)善免疫测定的应用 第九章化学发光免疫分析技术 一教学目的 通过本章学习,了解发光兔疫分析是将发光分析与兔疫反应相结合的一种新型标记技 术,主要用于微量抗原或抗体的检测,对其分类和技术要点及其原理的掌握较为重要。 二教学要求 1.掌握直接化学发光免疫分析及电化学发光免疫分析的概念、原理及特点。化学发光酶免 疫分析的分类及原理 2.熟悉发光的分类、化学发光产生的条件、化学发光效率及化学发光免疫技术的分类:鲁 米诺氧途径免疫分析的原理及特点:化学发光剂的分类及特点。化学发光免疫测定的临床应 用。 3.了解发光剂的常用标记方法及影响标记的因素。化学发光免疫分析的非均相分离方式。 三教学内容 (一)化学发光免疫的基本内容(概述):发光免疫分析是将发光分析与免疫反应相结合而建 立起来的一种新型检测微量抗原或抗体的标记技术。发光的公类化学发光产生的条.件化 学发光效率化学发光兔疫技术的分类。化学发光免疫分析的非均相分离方式。 (二)化学发光剂和标记技术:真接和接化学发光剂,发光剂的常用标记方法及影响标记 的因素: (三)化学发光免疫分析的类型:直接化学发光兔疫分机、电化学发光兔疫分机、化学发光
悔免疫分杠和鲁米诺氧途轮兔疫分机。 (四)化学发光兔疼温定的然应思。 第十章生物素-亲和素放大技术 (此章为自学章节) 第十一章固相膜免疫分析技术 一教学目的 通过本章学习,了解固相膜免疫分析技术是以微孔膜作为固相载体,利用液体可以流 过微孔膜也可通过毛细管作用在膜上向前移动的特性,以酶标记或各种有色微粒子(如胶体 金、彩色胶乳,胶体硒等)标记抗体或抗原作为标记物,通过抗原抗体反应进行抗原或抗体 检测的快速检验方法。对其主要掌握胶体金免疫技术,斑点膺免疫吸附试验和免疫印迹试验 二教学要求 1.掌握周相膜免疫分析技术的概念及类型。胶体金免疫技术、胶体金、免疫金的概念。斑 点金免疫渗滤试验、斑点金免疫层析试验、免疫印迹试验的原理及临床应用。 2.熟悉斑点酶免疫吸附试验的原理及临床应用。胶体金的特性,临床应用及评价。 3.了解胶体金和免疫金的制备及技术要点。 三教学内容 (一)胶体金免疫技术:是以胶体金作为示踪物标记或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种 标记免疫测定技术。固相膜免疫分析技术是以微孔膜作为周相载体,利用液体可以流过微孔 膜也可通过毛细管作用在膜上向前移动的特性,以膨标记或各种有色微拉子(如胶体金、彩 色胶乳、胶体钠等)标记抗体或抗原作为标记物,通过抗原抗体反应进行抗原或抗体检测的 快速检验方法。主要类型有胶体金免疫技术、斑点陟免疫吸附试验和免疫印迹试验。胶体金 的特性、胶体金的制备、免疫金的制备。胶体金免疫技术的方法学种类与原理(斑点金免疫 渗滤试验、斑点金免疫层析试验、临然应思收评价): (二)其他膜找体免疫分析技术;燕点酶兔疫吸发试验(DQtL1S4)和免疫印迹试验的原 理、技术要点和方法学评价。 第十二章免疫组织化学技术 (此章为自学章节)
第十三章免疫细胞分离与免疫细胞功能检测及应用 (此章为自学章节) 第十四章细胞因子与细胞黏附因子检测及应用 (此章为自学章节) 第十五章流式细胞仪分析技术及应用 一教学目的 通过本章学习,了解流式细胞术(C)是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确 的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术使学生对流式细胞仪工作原理 及细胞分选原理,基本组成及质量控制,在免疫学检验中的应用(涨心细胞及其亚群分析 淋心细胞功能分析)有一个初步的认识 二教学要求 1.掌握流式细胞术的概念,流式细胞仪分析的基本工作原理、数据的显示与分析。流式细 胞分析的样本制备、荧光免疫反应、仪器校准和免疫检验质量控制。 2.熟悉流式细胞仪的基本结构:液流系统、光路系统和数据处理分析系统。流式细胞仪分 析软件的数据显示方式及其应用:各种直方图及其设门方式。流式细胞术在免疫学检查中的 应用 3.了解流式细胞仪的细胞分选原理。免疫胶乳颗粒技术的原理及其应用。流式细胞仪免疫 分析荧光染料的选样与荧光标记。 三教学内容 (一)流式细胞术的概念,流式细胞仪的分析及分选原理:流式细胞仪的基本组感结构(液 滇系统光学系统和数握处理系统》,基本工作原理,细胞分选原理。 (二)数据的显示与分析:参数,散射光的测定(前向散射光(S)和侧向散射光(SS), 荧光测定(荧光信号测量、荧光补偿、单参数直方图、双参数散点图、三参数直方图和多参 分析),设门分板技术 (二)流式细胞仪免疫分析的技术要求:兔疫检测样本制益、免疫分析中常用的荧光染料与 标记染色、免疫胶乳颗粒技术的应用、流式细胞免疫学技术的质量控挝, (四)流式细胞术在免疫学检查中的应用:淋二细胞及县亚群的盆板港二细胞功熊分斯
淋二潭血系统分化抗原点日血病兔瘩分黑肿瘤药相去蛋白分杠:ADS疯检测史的应思: 自身兔疫性蓝想去LA拉愿分板移植兔痉中的应思 第十六章免疫球蛋白检测及应用 一教学目的 通过本章学习,了解和掌握免疫球蛋白测定方法的原理及免疫球蛋白检测的临床意义。 二教学要求 L,掌握血,尿和脑脊液gG、gA、【gM、血清IgE的检测方法及临床意义 2.熟悉M蛋白的检测方法及临床意义,选择性蛋白尿指数、白蛋白商值的概念及应用价值。 脑脊液生成指数公式及临床意义。 3.了解血液gG亚类测定及临床意义。血液gD的检测方法及临床意义。免疫球蛋白的 本结构和功能以及检测技术发展。 三教学内容 (一)体液中gG、IgA、【gM测定的临床应用:血液、尿液和脑脊液免疫球蛋白(G、A MD测定及临床意义 (二)血液gD和gE的检测及临床应用:血液gD的测定方法及临床意义,血液E的测 定方法及临床意义。 (三)血液gG亚类测定及脸床意义。 (四)M蛋白的测定及临床意义:血洁蛋自区带忠泳血波兔痉球蛋白定量测定兔疫电 泳、.兔疫周定电泳杰-周蛋自测定g和入g定量测房、冷球蛋日测定, 第十七章补体检测及应用 (此章为自学章节) 第十八章免疫自动化仪器分析及应用 一教学目的 通过本章学习,了解免疫检验自动化分析仪的基本设计原理、主要技术参数,掌握免疫 比浊分析、化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析、时间分讲荧光免疫分析、全自动,联 免疫分析系统的原理及特点。 二教学要求
1.掌握免疫透射比浊法、免疫散射比浊法、免疫胶乳比浊法的原理,抗原过量检测设计原 理:化学(或电化学)发光免疫分析仪、全自动酶联免疫分析仪和时间分辨荧光免疫分析仪 的检测原理及技术要点。 2.熟悉免疫检验自动化的概念和所涉及免疫学技术,免疫比浊分析的影响因素及方法学评 价。酶联发光免疫分析仪、荧光侧振免疫分析仪的原理及技术要点。 3.了解免疫自动化仪器分析选择与应用。 三教学内容 (一)自动化免疫浊度分析系统:免疫透射比浊法、免疫胶乳比浊法、免疫散射比浊法(定 时、速率)的原理、仪卷工作湛程和方法评价:兔疹北浊分杠的影因素。 (二)自动化发光免疫分析系统:吖啶酯标记化学发光免疫分析仪,藤联发光兔疫分析悠 电化学发光兔疫分析仪的原理及仪器检测技术要点。 (三)自动化荧光免疫分析系统:时回分耕荧光免疫分析仪、荧光幽振兔痉分析仪的检测原 理及技术要点 (四)自动化酶联免疫分析系统的组成、性能和评价, (五)免疫自动化仪器分析选择与应用:选择原则、应用。 第十九章临床免疫检验的质量保证 一教学目的 通过本章学习,认识和掌捏临床免疫检验的质量控制原则、意义、基本概念和实验室信 息系统在免疫检验质量控制管理中的应用。 二教学要求 1.掌程免疫学检验分析前、分析中、分析后质量控制的主要内容和影响因素。Westgand多 规则质控图常用的规则及判断失控的多规则程序。室内质量控制失控的常见原因及局限性。 质量保证、室内质量控制、室间质量评价、标准品、质控品的概念, 2.熟悉质掉品的基本条件、常用质控图及特点、室间质评品靶值的确定、室间质量评价同 限性及分析中质量控制内容。 3.了解检测系统性能确认的基本内容:报告审核和发放制度:分析前质量的影响因素:标 准品值的溯源。 三教学内容