《临床分子生物学检验》实验教学大纲 (供医学检验、医学检验技术专业本科使用) I前言 分子生物学检验技术是运用分子生物学技术分析疾病基因，从分子水半分析疾病发生的 原因、跟踪疾病发辰过程、检验感染人类的病原生物以及根据基因多态性指导个体化治疗的 一门学科。通过实验课程的学习，主要是加强本课程的实际操作技能，为学生进入临休实习 和临床工作打下良好的理论基础和实验室动手能力。 本大到适用于医学检验专业本科学生使用。现将大纲使用中有关向题说明下： 一、为了使教师和学生史好地掌握教材，每一实验均山教学目的、教学要求和教学内容三部 分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解二个级别，教学内容与 教学要求级别对应。 二、使教师在保证大核心内容的前提下，可根据不同教学手段，讲授重点内容和介绍一般 内溶。 三、总教学参考学时为20学时。 教材：《分子诊断学实验指导》，黄韻祝，科学出版社，2012年6月 临床微生物免疫检验教研室 2014年10月
Ⅱ正文 实验一全血基因组DNA提取及核酸浓度、纯度鉴定 一教学目的 通过对人全血基因组DNA的提取，掌握基因组DNA的提取原理和方法步骤及紫外 分光北度计法检测核酸浓度和纯度的实验操作。 二教学要求 (一)掌挥基因组DNA分离纯化的原则和方法步骤 (二)掌握基因组DNA的提取原理和方法步骤： (三)掌握紫外分光光度计法检测核酸浓度和纯度的实验燥作 (四)熟悉分子生物学实验常用仪器的操作 三教学内容 (一)DNA分离纯化的原则： (二)提取M的原理： (三)操作要点讲解： (四)紫外分光光度计法的定义和原理及结果分析： (五)经验分享： 实验二真核细胞RNA制备及核酸浓度、纯度鉴定 一教学目的 掌握真核细胞RNA Trizole法提取的原理和方法，应用紫外分光光度计法检测核酸浓度 和纯度。 二教学要求
(一)掌握Tioe法提取真核细胞RNA的原理和方法步骤： (二)熟悉其核细胞RNA提取前对原材料的预处理方法： (三)了解真核细胞RNA提取的方法及适用范用和优点。 三教学内容 (一)RNA研究的重要性及提取步骤： (二)实验所需仪器及设备： (二)学生实验： (四)紫外分光光度计法的定义和原理及结果分析： (五)小结。 实验三荧光定量PCR技术检测 乙型肝炎病毒(HBV)核酸 一教学目的 通过对人血清中HBV的提取，掌握HBV-DNA实时荧光定量PCR的原理和基本步骤， 能够独立分析实验结果。 二教学要求 (一)掌程人血清中BVNA的提取方法及原理和实时荧光定量PCR实验操作及结果分析 (二)熟悉IBV-DNA实时荧光定量PCR的测定原理； （三)了解核酸测定引物设计原理 三教学内容 (一)实时荧光定量PCR的测定原理： (二)人血泸中病毒DNA的提取方法和原理： (三)HBV-DNA荧光定量PCR试剂组成、反应液配制及PCR反应条件： (四)荧光定量PCR仪的操作步骤及结果分析：
实验四荧光定量PCR技术检测 丙型肝炎病毒(HCV)核酸 教学目的 通过对人血清中HCV的提取，掌握HCV-RNA实时荧光定量PCR的原理和基本步骤， 能够独立分析实验结果。 二教学要求 (一)掌程人血清中HCV-A的提取方法及原理和实时光定量PCR实验操作及结果分析 (二)熟悉HCV-NA实时荧光定量PCR的测定原理： (三)了解RNA病毒和DNA病毒的区别 三教学内容 (一)什么是RNA病待： (二)人血清中病毒RNA的提取方法和原理： (三)HCV-RNA荧光定量PCR试剂组成、反应液配制及PCR反应条件： (四)荧光定量PCR仪的操作步骤及结果分析： 实验五反向点杂交法进行人乳头瘤病毒(PV)分型检测 一教学目的 通过反向点杂交法进行人乳头瘤病青(HPV)分型检测实验操作，掌握核酸分子杂交的基 本原理和方法 二教学要求 （一)掌握反向点杂交法进行HV分型检测的原理和方法： (二)熟悉HPV种类分型和应用领域 （三)了解分子探针的概念和原理。 三教学内容 (一)核酸分子杂交的基本原理及应用：
(二) HPV诊断的临床意义及HPV的分型： (三) 反向点杂交法进行HPV分型诊断的原理： (四) 实验流程： (五)小结。 Ⅲ教学组织与方法 一实施机构：山医学检验系临床生物化学教研室执行。 二组织内容：教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、多媒体教学手段应用。 三教学方法 1理论教学：采用启发式、讨论式、互动式课堂教学形式，辅助现代教育技术和传统 教学手段。 2.实验教学：实验分组(8个组)，每组合作操作。 3.辅导形式：课堂答疑、讨论、复习等结合。 四考核办法：实验报告占总评成绩的20%，实验课平时成绩占总评成绩的10%。 V 教学时数分配表 实验内容 时数 实验类型 实验一 企血基因组DNA的提取及核酸浓度、纯度鉴定 4 验证型 实验二 企血RNA的制备及核酸浓度、纯度鉴定 4 验证型 实验二 荧光定量PCR技术检测乙型肝炎病毒核酸 4 验证型 实验四 荧光定量PCR技术检测丙型肝炎病毒核酸 4 验证型 实验五 核酸杂交技术分析(HPV病毒分型) 4 验证型