《临床微生物学检验》实验教学大纲 (供医学检验、医学检验技术专业本科使用) I前言 本教学大纳是依据卫生部规划教材《临床微生物学检验实验指导》（第4版），并根据我 校医学检验及医学检验技术本科教学计划，为配合医学检验系木科专业课程“临床微生物学 检验”的实验教学而编写。 根据医学检验系本科教学计划，“临床微生物学检验”实验课共52学时。要求学生通 过实验课程的学习，一方面验证理论，进一步巩固已学到的理论知识：另一方面，通过亲自 动手操作，使学生能正确熟练地学握微生物检验的基本技术和基木技能，熟悉临床上常见病 原微生物，特别是病原性细菌的生物学特性及其鉴定方法，并能对常见临床标本进行细菌检 验并作出下确报告。同时，在实验过程中逐步培养学生独立操作、独立思考、分析问题和解 决问题的能力。 临床微生物免疫检验教研室 2014年10月 第1页共9页
Ⅱ正文 实验一细菌形态学检查技术 一、目的要求 1、掌握细南涂片的制备方法和革兰染色技术。 2、熟悉不染色标本的观察方法与用途 3、熟悉细筒基本形态 二、课时安排4学时 三教学内容 1、微生物实验室规则与生物安全防护 2、光学显微镜的使用 3、细菌染色方法分类与选择 4、革兰染技术的原理、染色方法步骤 5、常见细菌及临标本涂片方法。 6、细菌压滴法 7、细菌悬滴法 8、细菌形态观察 实验二培养基的制备及细菌培养方法与接种技术 一、目的要求 1、掌握培养基制备的基本技术及细菌培养方法 2、熟悉常用培养基的基本成份、种类和用途 3、熟悉细菌分离培养、接种技术和接种用具 4、了解压力蒸汽灭南器的使用 二、时间安排4学时 三、教学内容 1、常用培养基的成份及制备技术 第2负共9页
(1)血半板的制备 (2)巧克力的制备 (3)SS半板的制备 (4)麦康凯琼脂平板的制备 (5)KIA的制备 2、细菌培养方法 3、细菌接种的基本程序 4、压力蒸汽灭菌器的使用 实验三球菌的分离培养和鉴定 一、目的要求 1、掌握常见简萄球菌、肠球菌屈、链球菌属、奈瑟南属和布兰汉菌属的菌洛特点、菌 体形态及染色性。 2、掌握常见葡萄球南、肠球菌属、链球菌属、奈南属和布兰汉南属的分离培养和鉴 定方法。 3、掌握数宁编码鉴定技术的原理和结果判断。 、熟悉ATB NEW的燥作流程。 5、了解细菌鉴定技术的发展过程， 二、时间安排8学时 三、教学内容 1、细菌鉴定技术的发辰过程 2、数码鉴定法基本原理 3、全自动和半自动化细菌鉴定和药敏分析系统 A、细南形念观察和鉴定程序 5、触酶试验 6、血浆凝固忡试验 7、胆汁-七叶甘试验 8、65g/LNaC1生长试验 第3页共9页
9、奥普托欣试验 10、杆菌肽敏感试验 11、CAMP试验 12、氧化酶试验 13、DNA,实验 实验四肠杆菌科细菌的分离培养及鉴定 一、目的要求 1、掌握肠杆菌科细菌的形态、染色特点、培养特性、生化反应及检验方法。 2、掌握各种生化反应的原理、燥作方法 3、熟悉编码鉴定方法。 4、熟悉血清学鉴定方法 5、熟悉半自动化ATB仪器细菌鉴定和药敏分析方法 二、时间安排4学时 三、教学内容 1、肠杆菌科编码鉴定 2、半自动化ATB仪器细南鉴定 3、大肠埃希氏菌的生物学特性与鉴定方法 4、肺炎克雷伯菌的生物学特性与鉴定方法 5、变形杆茵的生物学特性与鉴定方法 6、伤寒沙门氏的生物学特性与鉴定方法 实验五不发酵革兰阴性杆菌分离培养及鉴定 一、目的要求 1、掌捏假单胞菌属、不动杆菌属细菌的形态染色、培养特性、菌落特征和主要生化反 应。 2、熟悉编码鉴定方法 3、熟悉半自动化ATB仪器细菌鉴定 第4负共9页
二、时间安排4学时 三、教学内容 1、铜绿假单胞菌的生物学特性与鉴定方法 2、嗜麦芽窄食单胞菌的生物学特性与鉴定方法 3、饱曼不动杆菌的生物学特性与鉴定方法 实验六弧菌属细菌分离培养及鉴定 一、目的要求 1、掌握弧菌属细菌的分离培养与鉴定方法 2、掌握弧菌属细菌的形态染色、培养特性、菌落特征和主要生化反应。 二、时间安排4学时 三、教学内容 1、细南的形态染色、前落特征。 2、生化鉴别试验 (1)氧化悔试验 (2)克氏双韩试验 (3)0/F试验 (4)0/129试验 3、微量生化管鉴定 4、ATB半自动鉴定试验 实验七真菌实验室检查 一、目的要求 1、掌握不染色标本直接镜检技术。 2、掌捏真茵检查染色技术和墨汁负染技术 3、掌握常见其菌培养方法和鉴定要点 第5共9
4、熟悉真菌的南落特点、南丝和孢子的形态、结构特点及分离培养与鉴定 二、课时安排4学时 三、教学内容 1、真菌不染色直接检查法 2、新型隐球菌革兰染色和显汁负染实验 3、假丝酵母菌革兰染色、培养特征和芽管形成实验 4、临床常见真菌显色培养基接种培养鉴定 5、其菌半自动化细菌鉴定和药敏分析方法 6、丝状真茵形念观察和鉴别要点（示教） 实验八嗜血杆菌、革兰阳性杆菌分离培养及鉴定 一、目的要求 1,掌握嗜血杆菌的形念染色、培养特性、菌落特征和主要鉴定方法 2、熟悉革兰阳性杆菌形态染色特点、菌涂特点 二、课时安排2学时 三、教学内容 1、流感嗒血杆菌革兰染色、菌涤形态及卫星现象观察 2、流感嗜血杆菌V因子、X因子实验 3、流感嗜血杆菌半自动化鉴定和药敏分析 4、流感啼血杆菌B-内酰胺酶检测 5、枯草茅孢杆菌、蜡样茅胞杆菌染色、笛落形态观察 实验九分枝杆菌检验 一、目的要求 1、掌捏抗酸染色原理、方法和分枝杆菌的基本形态观察 2,熟悉金“0”染色染色原理、方法和染色形态 第6负共9页
3、熟悉抗酸染色结果和报告方式、结果解释 二、课时安排2学时 三、教学内容 1,抗酸染色检查 2.金“0”染色 3,抗酸染色结果报告方式、结果解释 实验十抗菌药物敏感性实验与细菌耐药性检测 一、目的要求 1,掌握药敏纸片琼脂扩散法(K-B法)的原理、操作方法、结果判断 2、熟悉液体稀释法药敏试验的原理、操作方法、影响因素、结果判读和临床意义 3、熟悉E-Test的原理、操作方法、结果判读及E-Test的注意事项。 A、掌握头孢西丁检测耐甲氧西林葡萄球南(MRS)的方法 5、熟悉苯唑西林琼脂稀释法检测耐甲氧西林葡萄球菌】 6、学挥头孢硝噻吩纸片检测B-内酰胺南。 7、学猩超广讲B-内酰胺酶(ESBL)检测的方法（双纸片法）、结果判读。 8,掌挥碳肖需烯类筛选试验-改良Hoge试验的方法、结果判读。 二、课时安排8学时 三、教学内容 1,纸片琼脂扩散法(K-B法)的原理、操作方法、结果判断及临床意义 2、液体稀释法药敏试验的原理、操作方法、影响因素、结果判读和临床意义 3、熟悉E-Test的原理、操作方法、结果判读及E-Test的注意事项。 4、射甲氧西林简萄球南(RS)的检测方法 5、熟悉苯唑西林琼脂稀释法检测耐甲氧西林葡萄球菌 6、头孢硝噻吩纸片检测B-内酰胺南。 7,超广谱B-内酰胺博(SBL)的检测方法（双纸片法）入、结果判读。 8、碳青霉烯类筛选试验-改良Hodge试验的方法、结果判读。 第7页共9页
实验十一医院感染中生物监测与消毒灭菌 目的要求 1、掌捏高压蒸汽灭茵和紫外线灭菌原理和灭茵效果监测方法及结果评价 2、熟悉空气、水及体表细菌学监测方法。 3、了解空气、水、物体表面及体表细菌学监测的意义。 二、课时安排4学时 三、教学内容 1、高压蒸汽灭南效果监测。 2、紫外线灭菌效果监测。 3、饮用桶装水、自来水、污水细南数监测 4、室内空气室外空气细菌学监测。 5、物体体表细南学监测 6、人体体表细菌学监测 实验十二临床标本的细菌学检验 一、目的要求 1、掌程临床标本细菌学检验的一般程序及检验方法。 2、熟悉各种临床标本中的常见病原菌及其鉴定方法。 二、时间安排4学时 三、教学内容 1、血液标本的细南学检验 2、尿液标本的细菌学检验 3、脓补标本的细南学检验 4,粪便标本的细菌学检验 第8负共9贞
Ⅲ教学组织与方法 一实施机构：山医学检验系临床微生物免疫检验教研室执行 二组织内容：教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、多媒体教学手段等。 三教学方法： 1.实验教学：注重培养学生动手能力和应用所学知识分析问题和解决问题的能力，培养 学生严谨、实事求是的科学作风。通过实验使学生扎实地掌程临床微生物学 检验技术的基本原理、方法和注意事项，掌猩应用所学知识分析问题和解决 问题的本领。实验教学强调规范性、严谨性和创新性。以技能性实验加强学 生基本技能训练，以综合性试验加强学生综合思维和创新能力的培养。 2教学地点：医学检验学实验室，教学教师山临床微生物免疫检验教研室安排， 3.辅导形式：课学答疑、讨论、示教等结合。 四考核办法：实验成绩占期木总评成绩的20%。 V教学时数分配表 实验课 学时数 类型 实验室规范、细茵形念学检查 验证型 培养基制备、细菌培养方法 验证型 球菌分离培养与鉴定 综合型 肠杆菌科分离培养与鉴定 综合型 不发脖革兰阴性杆菊分离培养与鉴定 家合型 弧菌属分离培养与鉴定 综合型 真南实验室检查 验证型 塔杆菌、革兰阳性杆菌培养与鉴定 2 验证型 分书杆档检查 验证型 抗菌药物敏感性实验与细菌耐药性检测 8 综合型 医院感染中生物监测与消毒灭菌 验证型 厌氧菌的培养与鉴定 验证型 临休标本的细菌学检验 示合里 合计 52学时 第9页共9页