河北医科大学药学院 第5节三萜的提取与分离 Extraction Isolation 可北医大学有学李力更授 一、三萜苷元的提取与分离 Extraction Isolation of the genins 河北医科大学学院李力更教授 天然药物化学教研室李力更教授 2
河北医科大学药学院 天然药物化学教研室 李力更 教授 2 3 第5节 三萜的提取与分离 Extraction & Isolation 河北医科大学药学院 李力更 教授 4 一、三萜苷元的提取与分离 Extraction & Isolation of the genins 河北医科大学药学院 李力更 教授
河北医科大学药学院 利用苷元的溶解性质 设计提取分离方案 三萜苷元极性较低，易溶解在弱极性 的有机溶剂中。 》常用有机溶剂，如： 石油醚，苯，乙醚，氯仿，等 (在水或正丁醇中溶解较难)。 。见后介绍 1.先用乙醇或甲醇等溶剂提取，提取液浓缩 后直接用色谱法进行分离。 我运科大学学院李力受教长 天然药物化学教研室李力更教授
河北医科大学药学院 天然药物化学教研室 李力更 教授 3 5 利用苷元的溶解性质 设计提取分离方案 三萜苷元 极性较低，易溶解在弱极性 的有机溶剂中。 ▶ 常用有机溶剂，如： 石油醚，苯，乙醚，氯仿，等 （在水或正丁醇中溶解较难）。 ☞ 见后介绍 河北医科大学药学院 李力更 教授 6 1. 先用乙醇或甲醇等溶剂提取，提取液浓缩 后直接用色谱法进行分离。 河北医科大学药学院 李力更 教授
河北医科大学药学院 2.先用醇提，提取液浓缩后再用有机溶剂萃取 。所用有机溶剂极性由低至高分类萃取。 如：石油醚，乙醚，氯仿，乙酸乙酯，等。 ·最后用柱色谱等方法分离。 3.粗提物先制成衍生物，然后再选择色谱法 或其它合适的方法进行分离。 例：可先与CHN2、(CH3CO)20等 反应后，再进行分离。 河抵科大学学院力更装。 天然药物化学教研室李力更教授
河北医科大学药学院 天然药物化学教研室 李力更 教授 4 7 2. 先用醇提，提取液浓缩后再用有机溶剂萃取。 ☞ 所用有机溶剂极性由低至高分类萃取。 ▶ 最后用柱色谱等方法分离。 如：石油醚，乙醚，氯仿，乙酸乙酯，等。 河北医科大学药学院 李力更 教授 8 3. 粗提物先制成衍生物，然后再选择色谱法 或其它合适的方法进行分离。 例：可先与 CH2N2、(CH3CO)2O 等 反应后，再进行分离。 河北医科大学药学院 李力更 教授
河北医科大学药学院 4.先将皂苷水解成苷元后，再选用有机溶剂 分类提取、分离得到苷元。 中色 欲得原生苷元，一定要注意水解条件！ ●可采用：温和酸水解，Smith氧化裂解， 酶水解，等方法进行。 ★分离方法多采用色谱方法。] 例：硅胶柱色谱，pTLC,p-HPLC,等。 EA 天然药物化学教研室李力更教授 5
河北医科大学药学院 天然药物化学教研室 李力更 教授 5 9 4. 先将皂苷水解成苷元后，再选用有机溶剂 分类提取、分离得到苷元。 欲得原生苷元，一定要注意水解条件！ ▶可采用：温和酸水解，Smith 氧化裂解， 酶水解，等方法进行。 河北医科大学药学院 李力更 教授 10 ★ 分离方法多采用色谱方法。 例：硅胶柱色谱，p-TLC，p-HPLC，等。 河北医科大学药学院 李力更 教授
河北医科大学药学院 二、三萜皂苷的提取与分离 Extraction Isolation of the glycosides 河北医科大学药学院事力更教授 利用三萜皂苷的溶解性质以及特殊 的化学性质，设计提取分离方案！ 皂苷易溶解在热水、稀醇、甲/乙醇、 正丁醇、戊醇中，几乎不溶解在石油醚、乙 醚、氯仿、苯等低极性的有机溶剂中。 ◆主要采用醇或水提 取、提取液再采用适当 的方法进行分离。 。见下页实例 天然药物化学教研室李力更教授
河北医科大学药学院 天然药物化学教研室 李力更 教授 6 11 二、三萜皂苷的提取与分离 Extraction & Isolation of the glycosides 河北医科大学药学院 李力更 教授 12 ☞ 见下页实例 利用三萜皂苷的溶解性质以及特殊 的化学性质，设计提取分离方案！ ▶ 主要采用醇或水提 取、提取液再采用适当 的方法进行分离。 皂苷 易溶解在热水、稀醇、甲/乙醇、 正丁醇、戊醇中，几乎不溶解在石油醚、乙 醚、氯仿、苯等低极性的有机溶剂中。 河北医科大学药学院 李力更 教授
河北医科大学药学院 1.正丁醇萃取法 例：人参皂苷的提取。 人参根粗粉 甲醇或乙醇提取 提取液 」浓缩 浸青 ◆总皂苷再用硅 胶色谱法反复多次 加水，再用乙整萃取脱脂 分离并重结晶，才 水液 可能得到纯品。 用水饱和的正丁醇萃取 正丁醇液 。此法也是常用 】减压蒸干 提取皂苷的流程。 人参总皂苷 2.有机溶剂沉淀法 例：远志皂苷的提取。 远志粗粉 甲醇或乙醇提取 提取液 |适当浓缩，活性炭脱色，过滤 滤液 ,浓缩至一定体积 ↓加少等量丙酮，静置 |过滤 ★粗品皂苷再进行 沉淀（粗品皂苷） 重结晶即可得纯品。 天然药物化学教研室李力更教授 >
河北医科大学药学院 天然药物化学教研室 李力更 教授 7 13 例：人参皂苷的提取。 ▶ 总皂苷再用硅 胶色谱法反复多次 分离并重结晶，才 可能得到纯品。 ☞ 此法也是常用 提取皂苷的流程。 1. 正丁醇萃取法 人参根粗粉 甲醇或乙醇提取 提取液 浓缩 浸膏 加水，再用乙醚萃取脱脂 水液 用水饱和的正丁醇萃取 正丁醇液 减压蒸干 人参总皂苷 河北医科大学药学院 李力更 教授 14 例：远志皂苷的提取。 2. 有机溶剂沉淀法 ★粗品皂苷再进行 重结晶即可得纯品。 甲醇或乙醇提取 提取液 适当浓缩，活性炭脱色， 远志粗粉 过滤 滤液 浓缩至一定体积 加少等量丙酮，静置 过滤 沉淀（粗品皂苷） 河北医科大学药学院 李力更 教授
河北医科大学药学院 3.碱水提取法 利用三萜皂苷含有羧基的性质，可用 稀碱水溶液提取后，再加酸沉淀得到。 流程： 粗皂苷乙 稀NaOH溶液 醇浓缩液 碱水溶液 加HC调至酸性 液 (酸性皂苷) 争力更我 4.铅盐沉淀法 流程 粗皂苷的乙醇溶液 |过量饱和中性雕酸铅 加适量乙醇和水 过量饱和碱性暗酸 溶液 通HS 液 沉淀 乙醇和水 滤液 PbS沉淀 bS沉 问北科大学中性皂茸数 天然药物化学教研室李力更教授 8
河北医科大学药学院 天然药物化学教研室 李力更 教授 8 15 3. 碱水提取法 利用三萜皂苷含有羧基的性质，可用 稀碱水溶液提取后，再加酸沉淀得到。 粗皂苷乙 醇浓缩液 稀NaOH溶液 碱水溶液 加HCl调至酸性 滤液 沉淀 （酸性皂苷） 醇浓缩液 流 程： 河北医科大学药学院 李力更 教授 16 4. 铅盐沉淀法 粗皂苷的乙醇溶液 过量饱和中性醋酸铅 沉淀 加适量乙醇和水 溶液 通H2S 滤液 PbS沉淀 浓缩 酸性皂苷 滤液 过量饱和碱性醋酸铅 滤液 沉淀 加乙醇和水 溶液 PbS沉淀 浓缩 中性皂苷 通H2S 滤液 流 程： 河北医科大学药学院 李力更 教授
河北医科大学药学院 5.胆甾醇沉淀法 利用皂苷与胆甾醇形成分子不溶物的性质。 流程】 粗皂苷的水溶液 胆甾解 过鸿 沉淀 水液 虿卧瓷暖 (水溶性杂质) 酱) 注意门 皂苷可与含3-B-0H的甾醇生成复合物 卜甾醇的结构与形成复合物有如下规律：] 1、凡甾醇有3-B-OH、A/B环反式稠合或 有△56的近平面结构者，与皂苷形成 的分子复合物的溶度积最小。 河北医科大学药学院李力更散授 天然药物化学教研室李力更教授
河北医科大学药学院 天然药物化学教研室 李力更 教授 9 17 5. 胆甾醇沉淀法 利用皂苷与胆甾醇形成分子不溶物的性质。 流 程 粗皂苷的水溶液 沉淀 水液 胆甾醇 石油醚或乙醚 （水溶性杂质） 索氏回流提取 醚液 （胆甾醇） 沉淀 （皂苷） 过滤 河北医科大学药学院 李力更 教授 18 皂苷可与含 3-β-OH的甾醇生成复合物! 注 意 1、凡甾醇有 3-β-OH、A/B 环反式稠合或 有△5(6) 的近平面结构者，与皂苷形成 的分子复合物的溶度积最小。 ▶ 甾醇 的结构与形成复合物有如下规律： HO R 河北医科大学药学院 李力更 教授
河北医科大学药学院 注意 2、凡甾醇有3-a-或3-B-0H经酯化或成苷， 不能与皂苷成难溶性分子复合物。 3、三萜皂苷与含3-B-0H甾醇形成的分子 复合物稳定性，要小于甾体皂苷与甾 醇形成的复合物。 ▲可用于三萜皂苷与甾体皂苷的分离！ 提示 胆甾醇沉淀法除可用于皂苷的分离 外，还可以用于甾体3-0H差向异构体 的分离、AB环顺/反异构体的分离。 提取时还应注意： 有些皂苷在植物体内即与其 共存的胆甾醇形成分子复合物： 而不能被稀醇或醇提取出来！ 河北医科大学药学统李力更教授 天然药物化学教研室李力更教授 10
河北医科大学药学院 天然药物化学教研室 李力更 教授 10 19 2、凡甾醇有3-α-或3-β-OH经酯化或成苷， 不能与皂苷成难溶性分子复合物。 3、三萜皂苷与含3-β-OH甾醇形成的分子 复合物稳定性，要小于甾体皂苷与甾 醇形成的复合物。 ▲ 可用于三萜皂苷与甾体皂苷的分离！ 注 意 河北医科大学药学院 李力更 教授 20 胆甾醇沉淀法除可用于皂苷的分离 外，还可以用于甾体3-OH差向异构体 的分离、A/B 环顺/反异构体的分离。 提 示 ▶ 提取时还应注意： 有些皂苷在植物体内即与其 共存的胆甾醇形成分子复合物， 而不能被稀醇或醇提取出来！ 河北医科大学药学院 李力更 教授
河北医科大学药学院 色谱分离法： 在上述粗分基础上进一步分离的常用方法！ 如：硅胶柱色谱 P-TLC P-HPLC 大孔吸附树脂 分配色谱 液滴逆流色谱(DCCC) 高速逆流色谱(HSCCC) 河北科大学学院李力更 附：分离方法的特点 方法 特 适用 备注 吸附色谱法 吸附剂：硅胶、氧化铝。 系统：混合低极性有机溶剂。 皂苷元 分配色谱法 皂苷 比例)等。 啦可可络扔性大 高效液相 多用反相色谱法，流动相为乙 的皂苷进 色谱法 腈水或甲醇水系统。 皂苷 生化物，用正 相色谱分离。 皂苷 条视全嘉#清活态先用 极性较 大孔树脂法 尚需配合其它 天然药物化学教研室李力更教授 11
河北医科大学药学院 天然药物化学教研室 李力更 教授 11 21 如： 硅胶柱色谱 p-TLC p-HPLC 大孔吸附树脂 分配色谱 液滴逆流色谱（DCCC） 高速逆流色谱（HSCCC） 在上述粗分基础上进一步分离的常用方法！ 色谱分离法： 河北医科大学药学院 李力更 教授 22 方 法 特 点 适用 备 注 吸附色谱法 吸附剂：硅胶、氧化铝。 系统：混合低极性有机溶剂。 皂苷元 分配色谱法 固定相：水、稀酸水溶液等。 流动相：氯仿-甲醇-水（不同 比例）等。 皂苷 高效液相 色谱法 多用反相色谱法，流动相为乙 腈-水或甲醇-水系统。 皂苷 也可将极性大 的皂苷进行衍 生化物，用正 相色谱分离。 液滴逆流 色谱法 氯仿-甲醇-正丁醇-水下层为固 定相，上层为流动相。 皂苷 大孔树脂法 反相色谱：样品溶于水，先用 水洗去糖等，再用醇洗脱。 极性较 大的皂 苷 尚需配合其它 层析法。 附：分离方法的特点 河北医科大学药学院 李力更 教授