第一节 基因诊断
第一节 基因诊断 表型的改变是由基因异常造成的 表型的改变是由基因异常造成的
讲授内容及要求 一、基因诊断的基本概念 二、基因诊断的基本技术 三、基因诊断的应用
讲授内容及要求 一、基因诊断的基本概念 二、基因诊断的基本技术 三、基因诊断的应用
基因诊断基本概念 传统对疾病的诊断主要是以疾病的表型改 变为依据，如患者的症状、血尿各项指标 的变化，或物理检查的异常结果，然而表 型的改变在许多情况下不是特异的，而且 是在疾病发生的一定时间后才出现，因此 常不能及时作出明确的诊断 表型的改变是由基因异常造成的 基因的改变是引起疾病的根本原因
一 基因诊断基本概念 传统对疾病的诊断主要是以疾病的表型改 变为依据，如患者的症状、血尿各项指标 的变化，或物理检查的异常结果，然而表 型的改变在许多情况下不是特异的，而且 是在疾病发生的一定时间后才出现，因此 常不能及时作出明确的诊断 表型的改变是由基因异常造成的 基因的改变是引起疾病的根本原因
一概念 基因诊断：应用分子生物学技术， 从DNA/RNA水平检测分析致病基 因的存在，变异和表达状态从而对 疾病作出诊断的技术 DNA诊断 RNA诊断
传统对疾病的诊断主要是以疾病的 表型改变为依据，如患者的症状、 血尿各项指标的变化，或物理检查 的异常结果，然而表型的改变在许 多情况下不是特异的，而且是在疾 病发生的一定时间后才出现，因此 常不能及时作出明确的诊断 一 .概念 基因诊断：应用分子生物学技术, 从DNA/RNA水平检测分析致病基 因的存在,变异和表达状态从而对 疾病作出诊断的技术 DNA诊断 RNA诊断
基因诊断是病因的诊断，既特异 又灵敏，可以揭示尚末出现症状时 与疾病相关的基因状态，从而可以 对表型正常的携带者及某种疾病的 易感者作出诊断和预测，特别对确 定有遗传疾病家族史的个体或产前 的胎儿是否携带致病基因的检测具 有指导意义
基因诊断是病因的诊断，既特异 又灵敏，可以揭示尚未出现症状时 与疾病相关的基因状态，从而可以 对表型正常的携带者及某种疾病的 易感者作出诊断和预测，特别对确 定有遗传疾病家族史的个体或产前 的胎儿是否携带致病基因的检测具 有指导意义
适应性强：基因探针可为任何来源，任何种类，探针序 列可为已知亦可未知，检测目标可为内源基 因亦可外源基因，诊断范围广。 早期诊断：基因诊断不仅可对有表型出现的疾 病作出明确诊断，它还可产前早期 诊断遗传性疾病，可检出感染疾病潜 伏期的病原微生物、还可预测和早期 发现某些恶性肿瘤
早期诊断：基因诊断不仅可对有表型出现的疾 病作出明确诊断，它还可在产前早期 诊断遗传性疾病，可检出感染疾病潜 伏期的病原微生物、还可预测和早期 发现某些恶性肿瘤。 适应性强： 基因探针可为任何来源，任何种类，探针序 列可为已知亦可未知，检测目标可为内源基 因亦可外源基因，诊断范围广
三.基因诊断的基本流程 样品抽提 DNA RNA CDNA PCR扩增 分子杂交 杂交信号检测
样品抽提 PCR扩增 分子杂交 杂交信号检测 DNA RNA cDNA 三.基因诊断的基本流程
基因诊断的基本技术 核酸分子杂交 PCR 限制性片段长度多态性分析(RFLP) DNA序列测定 DNA芯片技术
基因诊断的基本技术 核酸分子杂交 PCR 限制性片段长度多态性分析(RFLP) DNA序列测定 DNA芯片技术
一、核酸分子杂交 (hybr idization) 这是应用最广泛的一类基因诊断技术 ■根据碱基互补配对原则，将样品 DNA/RNA双链经变性处理，加入已标记的 单链DNA/RNA探针，样品中与探针互补的 DNA/RNA序列可与探针形成杂交双链DNA, 通过显示标记物或其它方法来检测特定的核 酸片段
一、核酸分子杂交（hybridization） 这是应用最广泛的一类基因诊断技术 ◼ 根据碱基互补配对原则，将样品 DNA/RNA双链经变性处理，加入已标记的 单链DNA/RNA探针，样品中与探针互补的 DNA/RNA序列可与探针形成杂交双链DNA， 通过显示标记物或其它方法来检测特定的核 酸片段
分子杂交技术过程 ☆探针制备及标记（同位素或非同位素 ☆待测核酸样品制备（分离，纯化） ☆杂交（液相，固相） 火杂交后处理（去掉非特异杂交分子） ☆显示结课（显色，发光，放射自显影 火结果分析
分子杂交技术过程 ☆ 探针制备及标记（同位素或非同位素） ☆ 待测核酸样品制备（分离，纯化） ☆ 杂交（液相，固相） ☆ 杂交后处理（去掉非特异杂交分子） ☆ 显示结果（显色，发光，放射自显影） ☆ 结果分析
