实验一 血液标本的采集(collection of blood) 改良牛鲍计数板的使用 (using Neubauer hemocytometer) ÷白细胞计数 (white blood cell count)
实验一 ❖血液标本的采集（collection of blood） ❖改良牛鲍计数板的使用 （using Neubauer hemocytometer） ❖白细胞计数 （white blood cell count）
血液标本的采集（毛细血管采血法) 。目的 掌握毛细血管采血法，了解不同部位采血对检验结果的影响。 。原理 采血针刺破毛细血管后，用微量吸管吸取所需量的血液。 。器材 一次性消毒采血针、一次性微量吸管（毛细管）、试管、2l 吸管、75%医用酒精棉球、无菌干棉球。 。试剂 白细胞稀释液：2%冰乙酸。 。标本来源 外周血
血液标本的采集（毛细血管采血法） ❖ 目的 掌握毛细血管采血法，了解不同部位采血对检验结果的影响。 ❖ 原理 采血针刺破毛细血管后，用微量吸管吸取所需量的血液。 ❖ 器材 一次性消毒采血针、一次性微量吸管（毛细管）、试管、2ml 吸管、75%医用酒精棉球、无菌干棉球。 ❖ 试剂 白细胞稀释液：2%冰乙酸。 ❖ 标本来源 外周血
操作步骤1 准备取试管一支，加入0.38ml白细胞稀释液。 采血部位按摩轻轻按摩受检者左手中指或无名指指尖腹内侧，使局部 组织自然充血。 消毒皮肤用75%医用酒精棉球擦拭采血部位，待干；否则血流出后会 四处扩散而不成滴。 针刺用左手拇指和食指固定采血部位，右手持一次性消毒采血针，自 指尖腹内侧迅速刺入，深度约为2~3mm,立即拔出采血针。 女 擦去第一滴血待血液自然流出后，用无菌干棉球擦去混有组织液的第 一滴血。 吸血血液自然流出时，用一次性微量吸管吸血至20y刻度，然后用无 菌干棉球压住伤口止血。如血流不畅，、可以左手自采血部位远端向指尖 稍施厌力至血液流出为宜。切勿用力挤压，造成组织液混入，影响结果 准确性。 释放血液以无菌干棉球擦净一次性微量吸管外部后，，将吸管插入含有 身细胞稀释液的武管底部，馒馒排虫吸管内的血液，并用上清冲洗管内 的余血2~3次，将试管内的液体混匀
操作步骤1 ❖ 准备 取试管一支，加入0.38ml白细胞稀释液。 ❖ 采血部位按摩 轻轻按摩受检者左手中指或无名指指尖腹内侧，使局部 组织自然充血。 ❖ 消毒皮肤 用75%医用酒精棉球擦拭采血部位，待干；否则血流出后会 四处扩散而不成滴。 ❖ 针刺 用左手拇指和食指固定采血部位，右手持一次性消毒采血针，自 指尖腹内侧迅速刺入，深度约为2～3mm，立即拔出采血针。 ❖ 擦去第一滴血 待血液自然流出后，用无菌干棉球擦去混有组织液的第 一滴血。 ❖ 吸血 血液自然流出时，用一次性微量吸管吸血至20μl刻度，然后用无 菌干棉球压住伤口止血。如血流不畅，可以左手自采血部位远端向指尖 稍施压力至血液流出为宜。切勿用力挤压，造成组织液混入，影响结果 准确性。 ❖ 释放血液 以无菌干棉球擦净一次性微量吸管外部后，将吸管插入含有 白细胞稀释液的试管底部，慢慢排出吸管内的血液，并用上清冲洗管内 的余血2～3次，将试管内的液体混匀
注意事项 所选择的采血部位应皮肤完整，不能有烧伤、冻疮、发绀、 水肿或炎症。 。婴、幼儿由于手指小，可自拇指、脚趾或足跟内、外侧缘采 血；严重烧伤者可选皮肤完整处采血。 ·本试验因是有创性检查，故要严格按无菌技术操作。防止采 血部位感染；做到一人一针，避免交叉感染。 。在进行多项目检查时，采取标本的顺序是血小板计数（不擦 美盈时是时：，来提 一滴血。 必 如取血用于自动化血细胞分析仪，最好以无菌纸巾片擦血， 以免棉球纤维混入，堵塞仪器
注意事项 ❖ 所选择的采血部位应皮肤完整，不能有烧伤、冻疮、发绀、 水肿或炎症。 ❖ 婴、幼儿由于手指小，可自拇指、脚趾或足跟内、外侧缘采 血；严重烧伤者可选皮肤完整处采血。 ❖ 本试验因是有创性检查，故要严格按无菌技术操作。防止采 血部位感染；做到一人一针，避免交叉感染。 ❖ 在进行多项目检查时，采取标本的顺序是血小板计数（不擦 第一滴血）、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数与分 类；出血时间Duke法测定时，应另刺一针，且不能拭去第 一滴血。 ❖ 如取血用于自动化血细胞分析仪，最好以无菌纸巾片擦血， 以免棉球纤维混入，堵塞仪器
方法学评价 毛细血管采血法操作方便，用血量少，.可满足对红细胞、，白 细胞、血小板及血红蛋百等的定量检查，但不能重复计数。 由王毛细血管可被组织液稀释， 如操作不当可造成血细胞计 数偏低。 冬 以往曾采用耳垂取血，虽痛感较轻，适用于反复采血，但 因耳垂末梢血循环较差，血细胞易停滞，常造成红细胞、白 细胞、血红蛋百和红细胞比积等的结果均比静脉血高，且严 寒、暴热等情况下可造成计数值波动较大。，手指采血虽痛感 较强，但能获得较充沛的血量；该法结果比较恒定，与静脉 血之间差异较小，是目前我国多数医院血细胞检验所采用的 菜流法 要获得更具代表性的血细胞检查结果，应首选静脉
方法学评价 ❖ 毛细血管采血法操作方便，用血量少，可满足对红细胞、白 细胞、血小板及血红蛋白等的定量检查，但不能重复计数。 由于毛细血管可被组织液稀释，如操作不当可造成血细胞计 数偏低。 ❖ 以往曾采用耳垂取血，虽痛感较轻，适用于反复采血，但 因耳垂末梢血循环较差，血细胞易停滞，常造成红细胞、白 细胞、血红蛋白和红细胞比积等的结果均比静脉血高，且严 寒、暴热等情况下可造成计数值波动较大。手指采血虽痛感 较强，但能获得较充沛的血量；该法结果比较恒定，与静脉 血之间差异较小，是目前我国多数医院血细胞检验所采用的 方法。如要获得更具代表性的血细胞检查结果，应首选静脉 采血法
改良牛鲍计数板的使用 。目的 掌握血细胞计数板的实用方法。 。原理 定倍数稀释的血液或体液，混匀后滴入具有固 定体积和精密分划刻度的血细胞计数板中，在显 微镜下对所选择方格中的细胞进行计数，再乘以 稀释倍数，即可换算成单位体积内的细胞数
改良牛鲍计数板的使用 ❖ 目的 掌握血细胞计数板的实用方法。 ❖ 原理 一定倍数稀释的血液或体液，混匀后滴入具有固 定体积和精密分划刻度的血细胞计数板中，在显 微镜下对所选择方格中的细胞进行计数，再乘以 稀释倍数，即可换算成单位体积内的细胞数
改良牛鲍计数板的结构 改良牛鲍计数板为优质厚玻璃制成。每块计数板由“H”型凹 槽分为两个同样的计数池。计数池两侧各有一条支持堤，比 计数池平面高出0.1mm。将特制的专用盖玻片覆盖其上，形 成高0.100mm的计数池。计数池长、宽各3.00mm,平均分 为9个大格，每个大格面积为1.00mm2,容积为0.1mm3 ()。在这9个大格中，中央大方格用双线分成25个中方 格，其中位于正中及四角的这五个中方格是红细胞和血小板 计数区。每个中方格又用单线分为16个小方格，便于计数。 位于四角的四个大方格是白细胞计数区，它们分别用单线划 分为16个中方格，便于计数
改良牛鲍计数板的结构 ❖ 改良牛鲍计数板为优质厚玻璃制成。每块计数板由“H”型凹 槽分为两个同样的计数池。计数池两侧各有一条支持堤，比 计数池平面高出0.1mm。将特制的专用盖玻片覆盖其上，形 成高0.100mm的计数池。计数池长、宽各3.00mm，平均分 为9个大格，每个大格面积为1.00mm2，容积为0.1mm3 （μl）。在这9个大格中，中央大方格用双线分成25个中方 格，其中位于正中及四角的这五个中方格是红细胞和血小板 计数区。每个中方格又用单线分为16个小方格，便于计数。 位于四角的四个大方格是白细胞计数区，它们分别用单线划 分为16个中方格，便于计数
1.计数板2.计数室与盖玻片间的距离为 0.1毫米3.盖玻片支柱4.盖玻片
注意事项 6改良牛鲍计数板在启用前和用后每隔一年都要鉴 定一次，以防不合格或磨损而影响计数结果的准 确性。 ó计数板和盖玻片如使用中污染血液，用后应依次 用95%乙醇、蒸馏水棉球擦拭，最后用清洁纱布 擦净。千万勿用粗糙织物擦拭，以免磨损计数板 上的刻度。 ó操作中勿让手指接触计数池表面，以防油腻污染， 致使充液时起泡
注意事项 改良牛鲍计数板在启用前和用后每隔一年都要鉴 定一次，以防不合格或磨损而影响计数结果的准 确性。 计数板和盖玻片如使用中污染血液，用后应依次 用95%乙醇、蒸馏水棉球擦拭，最后用清洁纱布 擦净。千万勿用粗糙织物擦拭，以免磨损计数板 上的刻度。 操作中勿让手指接触计数池表面，以防油腻污染， 致使充液时起泡
