《鱼病简讯》1989年笫2—期 草鱼出血病胸腺组织病理的研究 卢全章郭琼林 (中国科学院水生生物研究所,武汉) 草鱼出血病是草鱼鱼种阶段危害最严重的一种病毒性鱼病。有关草鱼出血病的组织病理 和血液病理,国内已有报道,但对胸腺组织的疴理研宄,國内外未见报道。本文主要研究草 鱼出血病对胸腺兔疫器官和细胞的病变,从形忐学方面探讨该病对茸鱼免疫系统的影响。 材料和方法 人工感染用材料鱼取自本所鱼池,为健康当年草鱼,体长9厘米左右。人工感染用出血 病毒源来自武汉市东西湖水产养殖场自然发病的出血病草鱼,按常规方法制备病毒上清液, 用腹腔注射方法感染,对照鱼注射同量无菌生理盐水 人工感染3一4天后如开始出现症状,这时取无症状表现的人工感染鱼作为潜伏期病 鱼,而感染4天以后取症状表现明显或因出血病而趋于死亡的人工感染鱼作为发展期病鱼 光镜组织标本制作方法,病鱼胸腺用Bυuin's液固定,常规酒精系列脱水、石螬包埋, 6微米厚切片、HE染色。电镜标本制作方法:鱼胸腺用戍二醛、锇酸固定、酒精系列 脱*, Quito!651(EM社)树脂包埋、超薄切片、电子染色后进行电镜( Hitach;H-300) 观察。 结果 草鱼出血病病毒感染草鱼后,一般在第4天开始发病,5一7天后表塊出明显的出血病 症状,进入死亡高峰。在潜伏期和发展期,解剖检查人工感染病鱼,可见病鱼胸腺向下颞凹 伸入的突起明显缩短,使胸腺变得较为扁平,胸腺重量明显减少。其胸腺重量变化见表1。 光镜观察病鱼胸腺组织切片,可见感染4天后的潜伏期病鱼胸腺已开始出现病变,表现 为胸腺卟结缔组织区血管内皮细胞受损,血管壁出现裂口,大量血细胞散布于胸腺外围结缔 咀织间隙,胸腺内也有出血现象。胸腺皮质区諃巴细胞密度比对照鱼甥显下降,发展期病鱼 胸腺淋巴细胞衰减更为严重。 在感染第6天后的发展期病鱼中,可见胸腺内网状上皮细胞变性坏死,淋巴细胞体积变 小、核固缩、细胞死亡。育的病鱼胸腺组织出现局部坏死,而其坏死区周围梭形成纤维细胞 相对增多。有的病鱼整个胸腺弥漫性坏死,坏死区可见颗粒状物堆积、残跗的纤维和体积缩 小的濒死淋巴细胞。自然感染的出血病草鱼,其胸腺病身与人工感染疠鱼情况基本相同
《鱼病简讯” 1989年第2—3期 草鱼 出血病胸腺组织病理 的研 究 卢 奎章 郭琼 林 (中 国科学 院水生 生 物 研究所 ，武 汉 ) 草鱼出血病是 草鱼 鱼种 阶段 危害最严重 的 ‘种病毒性鱼病。有关 草鱼 出 血病的组织 病理 和 血液病理， 国内 已有报道，但对胸 腺组织 的病 理研 究，囤内外未 见报道。本文 主要研究 草 鱼 出血病对胸腺免疫器 官和 细胞 的病变，从形态 学方 面探 讨该病对草 鱼免蠖系统 的影响。 材料和方法 ， 九工感染 用材 料鱼取 自率所鱼池，为健 康 当年草 鱼， 体长 9厘米左右。 人工感染用 出血 病 毒源来 自武汉市东西湖水产养殖场 自然发病 的出血病 草鱼，按 常规方法制备病 毒上 清液， 用腹腔 注射方法感染，对 照鱼注射 同量无菌 生理 盐水。 人 工感染 3— 4天后如开始 出现症 状，这时取无症状 表现 的人工 感染 鱼作为潜伏期 病 鱼，而 感染 4天 以后取症 状表 现明显或因出血病而趋 于死 亡的人工 感染 鱼作为发 展期病鱼。 ’ 光镜组织标本制 作方法-病鱼胸腺用 Bouin s液固定 ，常规酒精系 列脱水、石蜡 包埋． 5— 6微米厚切片 HE染色。 电镜标本制作方法 病鱼 胸 腺用戍二醛、锇 酸 固定 ，酒 精系列 脱水，Oueto[651(EM社 )树脂 包埋、超薄切片、 电子染色后进行 电镜 (H itach~日 -300) 观 察 。 结 果 草鱼 出血病病毒 感染草鱼后，一般在第 4天开始发病， 5— 7天后表现出明显 的出血病 症 状，进入死亡高峰 在潜伏期和发展期，解剖检 查人工感染病 鱼， 可见病鱼胸 腺向下颞 凹 仲入 的突起明显缩 短，使胸 腺变得较 为扁平，胸腺 重量 明显 减少 。其胸 腺重量 变化 见表 l。 光镜 观察病鱼胸腺组织切片，可见感染 4天后 的潜伏期病鱼胸 腺已开始 出现病 变，表现 为胸 腺外结缔组织 区血管 内皮细 胞受损， 血管 壁出现裂 口，大量血细胞散布于胸 腺外 围结缔 组织 间隙 ，胸 腺内也有出血 现象 胸腺 皮质 医淋 巴细胞 密度 比对照鱼 明显下降，发展期病鱼 胸腺淋 巴细胞衰减更为严重。 在感染第 6天后 的发展期痛 鱼中，可见胸 腺内 网状 上皮 细胞变性坏死，淋 巴细胞体积变 小、核固缩、细胞死亡 有 的病鱼胸腺组织出现局部坏死，而 其坏死 区周 围梭形成纤维细胞 相对增多。有 的病鱼整个胸腺弥漫性坏死，坏死区可见颗粒状 物堆积 、残 的纤 维和体积 缩 小 的 濒 死 淋 巴细 胞 自 然 感 染 的 出 血病 草 鱼 ， 其 胸 腺 病 变 与 人 工 感 染病 鱼 情 况 基 本 相 同。 74 维普资讯 http://www.cqvip.com
裊1出血病草鱼与鳍康草鱼脚康量量的比较 枪查项日查鱼尾数腺平均重量(毫克) 潜伙期病组 10 5,3 发展病组 试验对照组 1U,8 电镜下观察,鱼胸腺淋巴细胞胞膜收缩,与相邻细胞的胞质脱离接触,呈完全游离状 态,淋巴细胞圆形或椭圆形,与正常鱼的胸腺组织有明显的区别。淋巴细胞按出现裂沟、分 叶和多形态等交化,有的出现核袋蚬象。淋巴细胞胞体缩小,核固缩,线苞体肿胀、嵴断 裂,但未见核碎裂和溶解现象。 电镜下可查见交性淋巴细胞被巨噬细胞乔噬和消化 病鱼胸腺网状上皮细胞内线粒体肿胀,嵴断裂,内质网池扩张,核蛋白体颗粒脱落,细 胞质膜部分出现破裂。在有的病鱼中,上皮细胞胞浆内超微结构破坏、胞浆呈颗粒状,完全 失去正常细胞结构。 胸腺内微血管基底膜肥厚、内皮细胞出现胞吐小泡,微血管周围细胞变性坏死,可见许 多细胞碎片。 电镜下观察,在病鱼胸腺淋巴细胞和上皮细胞内未检查到焖毒样颗粒。 讨论 草鱼出血病病毒感染草鱼后,其胸腺器官出现明显病变。潜伏期主耍表恥为胸腺外结缔 组织和胸腺实质出血,胸腺皮质淋巴细胞密度明显下降,胸腺体积和重量明显减少。发展期 病变更为严重,胸腺淋巴细胞和网状上皮细胞变性坏死,巨噬细胞吞噬活跃,进一步发展为 胸腺组织局部或全部坏死。 据报道,感染出血病的草鱼,其血波淋巴细胞数量明显下降,作者分析有下列原因 1)病鱼造血组织受损,使造血功能低下,(2)病鱼血管内皮细胞受损导致血液淋巴细胞外 溢到组织间隙,(3)血液淋巴细胞变性,加速淋巴细胞死亡,草鱼胸腺组织学研究表明,草 鱼鱼种阶段胸腺淋巴器官处于增长旺盛时期,是淋巴细胞增殖和分化的主荽场所,大量胸腺 巴细胞最后被檜送到血液和外周淋巴器官。病鱼胸腺组织变性坏死,导致输入血液的淋巴 细胞数量下降或中止。因此可以推测,胸腺组织变性坏死可能是草鱼出血病血液淋巴细胞数 量下降的主要原因。 淋巴细胞不仅是高等脊椎动物也是低等脊椎动物一鱼类的主要免疫细胞。草鱼出血病引 起胸腺组织和淋巴细胞变性坏死,直接影响到鱼体细胞免疫和体液免疫的功能。病鱼免疫系 统受到损害后,必然进一步导致病情恶化和继发感染,加速病鱼死亡。因此,增强鱼体免疫 能力,无疑是防治草鱼出血病的重要途径。 作者在病鱼腺组织的电镜观察中未查见病毒样颗粒,提示胸腺组织和淋巴细胞的变性 坏死不是由于草鱼出血病病毒的直接作用,而可能是由于病毒感染后产生的一些可溶性因子 或由于出血而造成的
袭 1 出血病草鱼与■靡草鱼胸脾t■的比较 椅 查 项 日 幢 查 鱼 尾 数 胸 腺 平均 重量 (毫 克 ) — — I — — — — — — — — 潜茯 期 病组 l0 5．3 发 展 瑚病 组 23 5．{8 试 验 对 照 组 8 10．8 电镜下观察，病 鱼胸 腺淋巴细胞 胞膜收缩，与相邻细胞 的胞质 脱离接触，呈完全游离状 态 ， 淋 巴细 胞 圆形 或 椭 圆形 ， 与正 常 鱼 的胸 埔{组 织 有 明 显 的 区 别。 淋 巴细 胞 棱 出 现 裂 淘 、 分 叶 和多形 态等变化，有 的出现 核袋 现象。淋 巴 细胞腿体缩小，棱固缩，线粒 体肿胀 、靖断 裂 ，但 束见棱碎裂和溶解现 象 电镜下 可查 见变性 淋 巴细胞被 巨噬细胞吞噬和消化 病鱼胸 腺网状上 皮细胞内线粒 体肿胀，嵴断裂， 内质 网池扩张 ，棱 蛋 白体颗粒脱落，细 胞质膜部分 出现 破裂 在 有的病鱼中，上皮 细胞 胞浆 内超 教结 构破 坏，胞浆呈颗粒状，完 全 失 去 正 常 细 胞 结 构 。 胸 臁内微血管基底膜肥厚、内皮细胞出现胞吐小泡，微血管周围细胞变性 坏死， 可见许 多 细 胞碎 片 电镜 下 观 察， 在病 鱼胸 腺 淋 巴细 胞和 上 皮 细 胞 内未 检 查 到病 毒 样 颗 粒 。 讨 论 草鱼出血 病病 毒感染草鱼后，其胸腺器官 出现 明显病变。潜伏期 主要 表现 为胸腺外 结缔 组织 和胸腺实质 出血 ，胸 腺皮质淋巴细胞密度明显下 降，胸腺 体积 和重量明显减少。发展期 病变更 为严重 ，胸 腺淋巴细胞手日网状上皮细胞变性环 死，巨噬细胞吞 噬活跃 ，进一步发展为 胸 腺 组 织 局 部 或 全 部 坏 死 。 据报道，感染 出血病 的草 鱼，其血 液淋巴细胞 数量 明显下降，作者 分析 有 下列 原因t (1)病 鱼造血组织受损， 『史造血功 能低 下， (2)病鱼 血管 内皮 细胞受损 导致 血液淋巴细胞 外 溢 到组织间 隙， (3)血 液淋巴细胞变性，加速淋 巴细胞死 亡，草鱼胸腺 组织 学研 究表明， 草 鱼鱼种 阶段胸腺 淋巴 器官处于增 旺盛时期，是 淋 巴细胞增殖 和分化 的主要 场所， 大量胸腺 淋 巴细胞最后被 输送 到血 液和外周 淋 巴器官。病 鱼胸 腺组织变性坏 死， 导致输入血液 的淋 巴 细胞数量 下降或 中止。因此 可以推铡，胸 腺组织变性坏死 町能是草 鱼出血病血液淋 巴细胞数 量 下 降 的主 要 原 因 。 淋巴细胞 不仅是 高等脊 椎动 物也是低等脊 椎动 物一 鱼类的主要免疫细胞 草鱼 出血病引 起胸腺组织和淋 巴细胞变性 坏死，直接影 响到鱼体 细胞 免疫 和体 液免疫 的功能 。病 鱼免疫系 统 受 到损害后，必 然进一步 导致病情 恶化和继发感染，加速病鱼死亡。因此，增强鱼体 免疫 能力，无疑是 防治草鱼 出血病 的重要逾 径。 作者 在病 鱼 睬 组 织 的电镜 观察 中束查见病毒 样颗粒，提示胸腺 组织和 淋巴细 胞的变性 坏死不是 由于草鱼 出血 病病毒 的直接 作用，而可能是 由于病毒感染后产生 的一些可港性因子 或 由 于 出 血而 造 成 的。 维普资讯 http://www.cqvip.com