第十四章中药化学成分制备与鉴定实例 第一节糖和苷类化合物制备与鉴定实例 第二节醌类化合物制备与鉴定实例 第三节苯丙素类化合物制备与鉴定实例 第四节黄酮类化合物制备与鉴定实例 第五节萜类和挥发油制备与鉴定实例 第六节三萜类化合物制备与鉴定实例 第七节甾体类化合物制备与鉴定实例 第八节生物碱类化合物制备与鉴定实例 第九节鞣质类化合物制备与鉴定实例 第十节其他成分制备与鉴定实例
第十四章 中药化学成分制备与鉴定实例 第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 第二节 醌类化合物制备与鉴定实例 第三节 苯丙素类化合物制备与鉴定实例 第四节 黄酮类化合物制备与鉴定实例 第五节 萜类和挥发油制备与鉴定实例 第六节 三萜类化合物制备与鉴定实例 第七节 甾体类化合物制备与鉴定实例 第八节 生物碱类化合物制备与鉴定实例 第九节 鞣质类化合物制备与鉴定实例 第十节 其他成分制备与鉴定实例
第一节和苷类化合物制备与鉴定实例 糖和苷类化合物制备原理 (一)糖和苷类化合物的提取 1、苷类的提取 一般采用水或醇进行提取，提取时必须明确提取目的要求， 根据要求进行提取。 注意：提取原生苷时：（1)必须抑制或破坏酶的活性，可加 入一定量的碳酸钙，或采用甲醇、乙醇或沸水提取。 (2)提取过程中尽量避免与酸和碱接触，以兔苷类水解
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 一、糖和苷类化合物制备原理 （一）糖和苷类化合物的提取 1、苷类的提取 一般采用水或醇进行提取，提取时必须明确提取目的要求， 根据要求进行提取。 注意：提取原生苷时：（1）必须抑制或破坏酶的活性 ，可加 入一定量的碳酸钙，或采用甲醇、乙醇或沸水提取。 （2）提取过程中尽量避免与酸和碱接触，以免苷类水解
第一节糖和苷类化合物制备与鉴定实例 糖和苷类化合物制备原理 (一)糖和苷类化合物的提取 2、糖类的提取 > 单糖极性较大，一般采用水或稀醇提取。 >多糖溶于热水，一般难溶于冷水，不溶于乙醇及其他有机 溶剂，因此可在水提取液中加入乙醇使其沉淀，得到粗糖。 注意：多糖在提取过程中也必须抑制或破坏酶的活性，防止 聚合糖被水解
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 一、糖和苷类化合物制备原理 （一）糖和苷类化合物的提取 2、糖类的提取 ➢ 单糖极性较大，一般采用水或稀醇提取。 ➢ 多糖溶于热水，一般难溶于冷水，不溶于乙醇及其他有机 溶剂，因此可在水提取液中加入乙醇使其沉淀，得到粗糖。 注意：多糖在提取过程中也必须抑制或破坏酶的活性，防止 聚合糖被水解
第一节和苷类化合物制备与鉴定实例 糖和苷类化合物制备原理 (一)糖和苷类化合物的分离 1、苷类的分离 >苷类一般极性较大，分离较为困难。需在提取后先除杂，再 用色谱法进一步分离。苷元结构不同，所连接糖的数目和种类不 同，很难有统一的分离方法。用于糖的分离方法也可以用于分离 苷类。 常用色谱分离材料：硅胶、反相硅胶和葡聚糖凝胶等
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 一、糖和苷类化合物制备原理 （一）糖和苷类化合物的分离 1、苷类的分离 ➢ 苷类一般极性较大，分离较为困难。需在提取后先除杂，再 用色谱法进一步分离。苷元结构不同，所连接糖的数目和种类不 同，很难有统一的分离方法。用于糖的分离方法也可以用于分离 苷类。 ➢ 常用色谱分离材料：硅胶、反相硅胶和葡聚糖凝胶等
第一节糖和苷类化合物制备与鉴定实例 糖和苷类化合物制备原理 (一)糖和苷类化合物的分离 1、糖类的分离 >分离步骤：糖类提取后先除杂，然后进行下一步的分离。 >分离特点：对于多糖类化合物，分子量大，结构复杂，难以 分离。 >主要分离方法：活性炭柱层析、离子交换层析、凝胶过滤法、 分级沉淀法、蛋白质除去法
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 一、糖和苷类化合物制备原理 （一）糖和苷类化合物的分离 1、糖类的分离 ➢分离步骤：糖类提取后先除杂，然后进行下一步的分离。 ➢分离特点：对于多糖类化合物，分子量大，结构复杂，难以 分离。 ➢ 主要分离方法：活性炭柱层析、离子交换层析、凝胶过滤法、 分级沉淀法、蛋白质除去法
第一节糖和苷类化合物制备与鉴定实例 糖和苷类化合物制备原理 (一)糖和苷类化合物的分离 >活性炭柱层析：含糖的水溶液通过柱一水洗脱（无机盐、单 糖等)→不同浓度乙醇洗脱（依次洗出二糖、三糖以及更大的 低聚糖) >离子交换层析：阳离子和阴离子交换树脂对除去水提液中的 酸、碱性成分和无机离子，然后进一步分离糖和苷。 注意：分离时最好采用弱酸弱碱型的交联度比较小的离子交换树 脂
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 一、糖和苷类化合物制备原理 （一）糖和苷类化合物的分离 ➢ 活性炭柱层析：含糖的水溶液通过柱 水洗脱（无机盐、单 糖等 ） 不同浓度乙醇洗脱（依次洗出二糖、三糖以及更大的 低聚糖）。 ➢ 离子交换层析：阳离子和阴离子交换树脂对除去水提液中的 酸、碱性成分和无机离子，然后进一步分离糖和苷。 注意：分离时最好采用弱酸弱碱型的交联度比较小的离子交换树 脂
第一节和苷类化合物制备与鉴定实例 糖和苷类化合物制备原理 (一)糖和苷类化合物的分离 >凝胶过滤法： 凝胶类型：葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶等。 分离方法：低聚糖和苷类一般用孔隙小的凝胶分离。多糖先用孔 隙小的凝胶除去无机盐和小分子化合物，再用大孔隙的凝胶进行 分离。 >分级沉淀法：在混合多糖的高浓度水溶液中，逐步加入乙醇或 丙酮，收集不同浓度下析出的沉淀，得到不同的多糖组分
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 一、糖和苷类化合物制备原理 （一）糖和苷类化合物的分离 ➢凝胶过滤法： 凝胶类型：葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶等。 分离方法：低聚糖和苷类一般用孔隙小的凝胶分离。多糖先用孔 隙小的凝胶除去无机盐和小分子化合物，再用大孔隙的凝胶进行 分离。 ➢分级沉淀法：在混合多糖的高浓度水溶液中，逐步加入乙醇或 丙酮，收集不同浓度下析出的沉淀，得到不同的多糖组分
第一节糖和苷类化合物制备与鉴定实例 糖和苷类化合物制备原理 (一)糖和苷类化合物的分离 >蛋白质除去法：用分级沉淀法得到的多糖，常伴有较多的蛋白 质，必须予以去除。 试剂：选择使蛋白质沉淀而多糖不沉淀的试剂，如三氟三氯乙烷 法和Sevag法（用氯仿-正丁醇按4：1混合) 。 注意：要达到除尽游离蛋白质的目的仍需反复多次处理。因此配 合加入蛋白质水解酶，使蛋白质大分子进行一定程度降解后，再 用Sevag法处理，效果会更好
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 一、糖和苷类化合物制备原理 （一）糖和苷类化合物的分离 ➢蛋白质除去法：用分级沉淀法得到的多糖，常伴有较多的蛋白 质，必须予以去除。 试剂：选择使蛋白质沉淀而多糖不沉淀的试剂，如三氟三氯乙烷 法和Sevag法（用氯仿-正丁醇按4∶1混合）。 注意：要达到除尽游离蛋白质的目的仍需反复多次处理。因此配 合加入蛋白质水解酶，使蛋白质大分子进行一定程度降解后，再 用Sevag法处理，效果会更好
第一节和苷类化合物制备与鉴定实例 二、 含有糖和苷类化合物的中药制备与鉴定实例 黄芪-黄芪多糖 黄芪为豆科植物蒙古黄芪(Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge)Hsiao)或膜荚黄芪 (Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge)的干燥根。 >黄芪的化学成分：主要有多糖、黄酮和皂苷类等，多糖的成分 主要为葡聚糖和杂多糖。 >2010年版《中国药典》规定：含黄芪甲苷不得少于0.04%， 毛 蕊异黄酮葡萄糖苷不得少于0.02%。 >黄芪多糖提取分离：利用其易溶于热水、难溶于乙醇的特点进 行提取分离（如下图）
第一节 糖和苷类化合物制备与鉴定实例 二、含有糖和苷类化合物的中药制备与鉴定实例 黄芪---黄芪多糖 黄芪为豆科植物蒙古黄芪（Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var.mongholicus (Bge) Hsiao）或膜荚黄芪 （Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge）的干燥根。 ➢黄芪的化学成分：主要有多糖、黄酮和皂苷类等，多糖的成分 主要为葡聚糖和杂多糖。 ➢ 2010年版《中国药典》规定：含黄芪甲苷不得少于0.04%，毛 蕊异黄酮葡萄糖苷不得少于0.02%。 ➢黄芪多糖提取分离：利用其易溶于热水、难溶于乙醇的特点进 行提取分离（如下图）
黄芪饮片 12倍水煎煮3次，每次1.5h,过滤 药渣 合并水提液 ↓减压浓缩 浓缩液 加95%乙醇搅拌，使醇浓度至80%，放置过夜 上清液 沉淀 加水溶解、过滤 减压浓缩，加95%乙醇，搅拌，使 滤液 不溶物 醇浓度至80%，放置过夜，抽滤 上清液 沉淀 ↓95%乙醇洗涤，减压干燥 黄芪多糖