第三章邀生物的生化试验 3 4A 5
一、概述 (一)什么是微生物生化试验？ 通过利用生物化学的方法来测定微生物的代 谢产物、代谢方式和条件等来鉴别微生物的类 别、属种的试验
一、概 述 （一）什么是微生物生化试验? 通过利用生物化学的方法来测定微生物的代 谢产物、代谢方式和条件等来鉴别微生物的类 别、属种的试验
(二)生化试验的方法 1.在培养物中加入某种底物与指示剂，经接种、 培养后，观察培养基的pH值变化。 2.在培养物中加入试剂，观察它们同细菌代谢产 物所生成的颜色反应。 3.根据酶作用的反应特性，测定酶的存在。 4.根据细菌对理化条件和药品的敏感性，观察细 菌的生长情况
（二）生化试验的方法 1. 在培养物中加入某种底物与指示剂，经接种、 培养后，观察培养基的pH值变化。 2. 在培养物中加入试剂，观察它们同细菌代谢产 物所生成的颜色反应。 3. 根据酶作用的反应特性，测定酶的存在。 4. 根据细菌对理化条件和药品的敏感性，观察细 菌的生长情况
(三)生化试验的注意事项 1、待检菌应是纯种培养物。 2、待检菌应是新鲜培养物；培养18~24h。 3、遵守观察反应的时间。观察结果的时间，多为24 或48h。 4、应做必要的对照试验。 5、提高阳性检出率，至少挑取23待检的疑似菌落 分别进行试验
（三）生化试验的注意事项 1、待检菌应是纯种培养物。 2、待检菌应是新鲜培养物；培养18~24 h。 3、遵守观察反应的时间。观察结果的时间，多为24 或48 h。 4、应做必要的对照试验。 5、提高阳性检出率，至少挑取2~3待检的疑似菌落 分别进行试验
(四)检验细菌的生化试验范围 1、糖（醇）类代谢试验 2、氨基酸和蛋白质代谢试验 3、有机酸盐和铵盐的利用试验 4、呼吸酶类试验 5、毒性酶类试验
（四）检验细菌的生化试验范围 1、糖（醇）类代谢试验 2、氨基酸和蛋白质代谢试验 3、有机酸盐和铵盐的利用试验 4、呼吸酶类试验 5、毒性酶类试验
二、糖（醇）类代谢试验 2.1糖醇类发酵试验 2.2葡萄糖氧化发酵(0/)试验 2.3乙酰甲基甲醇试验 2.4甲基红（MR)试验 2.5七叶苷水解试验 2.6甘油品红试验
2.1 糖醇类发酵试验 2.2 葡萄糖氧化发酵（O/F）试验 2.3 乙酰甲基甲醇试验 2.4 甲基红（MR）试验 2.5 七叶苷水解试验 2.6 甘油品红试验 二、糖（醇）类代谢试验
2.1糖醇类发酵试验 2.1.1原理 不同的细菌对各种糖醇的分解能力及所产生的 代谢产物各不同。 口有的能分解多种糖醇，有的只能分解1~2种糖醇； ▣有的分解糖醇能产酸产气，有的分解糖醇只产酸 不产气，根据这些特点，可鉴别细菌
2.1 糖醇类发酵试验 不同的细菌对各种糖醇的分解能力及所产生的 代谢产物各不同。 有的能分解多种糖醇，有的只能分解1~2种糖醇 ； 有的分解糖醇能产酸产气，有的分解糖醇只产酸 不产气，根据这些特点，可鉴别细菌。 2.1.1 原理 二、糖（醇）类代谢试验
二、糖（醇）类代谢试验 2.1糖醇类发酵试验 常用的糖醇 单糖：葡萄糖、木糖、半乳糖、鼠李糖 双糖：乳糖、蔗糖、麦芽糖、蕈糖 三糖：棉子糖 多糖：菊糖、肝糖、淀粉 醇类：甘露醇、山梨醇、肌醇、卫茅醇
常用的糖醇 单糖：葡萄糖、木糖、半乳糖、鼠李糖 双糖：乳糖、蔗糖、麦芽糖、蕈糖 三糖：棉子糖 多糖：菊糖、肝糖、淀粉 醇类：甘露醇、山梨醇、肌醇、卫茅醇 2.1 糖醇类发酵试验 二、糖（醇）类代谢试验
二、糖（醇）类代谢试验 2.1糖醇类发酵试验 2.1.2试验方法 >用接种针或环移取纯培养物少许，接种于糖发酵管 中； >若为半固体培养基，则用接种针作穿刺接种； >置于36±1.0℃培养13天，每天观察结果
➢ 用接种针或环移取纯培养物少许，接种于糖发酵管 中； ➢ 若为半固体培养基，则用接种针作穿刺接种； ➢ 置于36±1.0℃ 培养1~3天，每天观察结果。 2.1 糖醇类发酵试验 2.1.2 试验方法 二、糖（醇）类代谢试验
2.1糖醇类发酵试验 2.1.3结果观察和记录 记录： >产酸不产气，阳性，以“+”表示 >产酸产气，阳性，以“⊕”表示 >不产酸产气，阴性，以“”表示
记录： ➢产酸不产气，阳性，以“+”表示 ➢产酸产气，阳性，以“⊕”表示 ➢不产酸产气，阴性，以“-”表示 二、糖（醇）类代谢试验 2.1 糖醇类发酵试验 2.1.3 结果观察和记录