食品科学与工程实验教学中心视频案例简介 目录 一、《细菌的革兰氏染色》 二、《苹果酒的酿制》 3 三、《牛奶中钙含量的测定》.6
食品科学与工程实验教学中心视频案例简介 目 录 一、《细菌的革兰氏染色》.1 二、《苹果酒的酿制》.3 三、《牛奶中钙含量的测定》.6
《细菌的革兰氏染色》 一、实验目的 1.掌握细胞的革兰氏染色方法。 2.了解革兰氏染色的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。 二、实验原理 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法 可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G)和革兰氏阴性菌(G)两大类，是细菌学上 最常用的鉴别性染色法。 革兰氏染色法的主要步骤是先用结晶紫进行初染：再加媒染剂碘液，以增 加染料与细胞间的亲和力，使结晶紫和碘在细胞膜上形成分子量较大的复合物： 然后用脱色剂（乙醇或丙酮）脱色：最后用蕃红复染。凡细菌不被脱色而保留初染 剂的颜色（紫色）者为革兰氏阳性菌，如被脱色后又染上复染剂的颜色（红色）者为革 兰氏阴性菌。 该染色法所以能将细菌分为G+菌和G菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成 分的不同所决定的。G菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚 糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通 透性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就 成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后 反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。 三、实验仪器及材料 牛肉膏琼脂斜面28C培养24h的大肠杆菌(Escherichia coli)斜面菌种，牛肉膏 琼脂斜面28℃培养16h的枯草杆菌(Bacillus subtilis)斜面菌种：显微镜：载玻片： 香柏油：二甲苯：擦镜纸：吸水纸：染色缸：草酸铵结晶紫染色液：路哥氏(Lug) 碘液：95%乙醇：0.5%番红染色液。 四、操作步骤 1.涂片 在一张载玻片上加两滴蒸馏水后，分别涂布枯草芽孢杆菌和大肠杆菌（注意涂 片切不可过于浓厚)。 1
1 《细菌的革兰氏染色》 一、实验目的 1. 掌握细胞的革兰氏染色方法。 2. 了解革兰氏染色的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。 二、实验原理 革兰氏染色法是 1884 年由丹麦病理学家 C．Gram 所创立的。革兰氏染色法 可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G )和革兰氏阴性菌(G-)两大类，是细菌学上 最常用的鉴别性染色法。 革兰氏染色法的主要步骤是先用结晶紫进行初染；再加媒染剂-碘液，以增 加染料与细胞间的亲和力，使结晶紫和碘在细胞膜上形成分子量较大的复合物； 然后用脱色剂(乙醇或丙酮)脱色；最后用蕃红复染。凡细菌不被脱色而保留初染 剂的颜色(紫色)者为革兰氏阳性菌，如被脱色后又染上复染剂的颜色(红色)者为革 兰氏阴性菌。 该染色法所以能将细菌分为 G菌和 G-菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成 分的不同所决定的。G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚 糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通 透性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就 成红色。G菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后 反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。 三、实验仪器及材料 牛肉膏琼脂斜面 28℃培养 24h 的大肠杆菌(Escherichia coli)斜面菌种，牛肉膏 琼脂斜面 28℃培养 16h 的枯草杆菌(Bacillus subtilis)斜面菌种；显微镜；载玻片； 香柏油；二甲苯；擦镜纸；吸水纸；染色缸；草酸铵结晶紫染色液；路哥氏(Lugol) 碘液；95%乙醇；0.5%番红染色液。 四、操作步骤 1. 涂片 在一张载玻片上加两滴蒸馏水后，分别涂布枯草芽孢杆菌和大肠杆菌(注意涂 片切不可过于浓厚)
2.固定 将制成的涂片干燥固定，固定时通过火焰12次即可，不可过热，以载玻片 不烫手为宜。 3.染色 ()初染将玻片置于玻片搁架上，加草酸铵结晶紫染色液（加量以盖满菌膜为 度)，染色1-2min。倾去染色液，用自来水小心地冲洗。 (2)煤染滴加Lugol)碘液，染1-2min,水洗。 (3)脱色滴加95%乙醇，脱色20-25s立即水洗，以终止脱色。 (④复染滴加蕃红，染色2-3min,水洗。最后用吸水纸轻轻吸干。 4.镜检 干燥后，置油镜观察。被染成紫色者即为革兰氏阳性菌(G);被染成红色者 是革兰氏阴性菌(G)。 五、注意事项 1.革兰氏染色成败的关键是脱色时间。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱 色而被误认为是革兰氏阴性菌：如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被认为是革 兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄、脱色时玻片晃动的快慢及乙醇用量 多少等因素的影响，难以严格规定。一般可用已知革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 作练习，以掌握脱色时间。当要确证一个未知菌的革兰氏反应时，应同时做一张 己知革兰氏阳性菌和阴性菌的混合涂片，以资对照。 2.染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染 色液被稀释而影响染色效果。 3.选用培养16-24h菌龄的细菌为宜。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使 革兰氏阳性菌转呈阴性反应。 2
2 2. 固定 将制成的涂片干燥固定，固定时通过火焰 1-2 次即可，不可过热，以载玻片 不烫手为宜。 3. 染色 ⑴初染 将玻片置于玻片搁架上，加草酸铵结晶紫染色液(加量以盖满菌膜为 度)，染色 1-2min。倾去染色液，用自来水小心地冲洗。 ⑵媒染 滴加(Lugol)碘液，染 1-2min，水洗。 ⑶脱色 滴加 95%乙醇，脱色 20-25s 立即水洗，以终止脱色。 ⑷复染 滴加蕃红，染色 2-3min，水洗。最后用吸水纸轻轻吸干。 4. 镜检 干燥后，置油镜观察。被染成紫色者即为革兰氏阳性菌(G )；被染成红色者 是革兰氏阴性菌(G-)。 五、注意事项 1. 革兰氏染色成败的关键是脱色时间。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱 色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被认为是革 兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄、脱色时玻片晃动的快慢及乙醇用量 多少等因素的影响，难以严格规定。一般可用已知革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 作练习，以掌握脱色时间。当要确证一个未知菌的革兰氏反应时，应同时做一张 已知革兰氏阳性菌和阴性菌的混合涂片，以资对照。 2. 染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染 色液被稀释而影响染色效果。 3. 选用培养 16-24h 菌龄的细菌为宜。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使 革兰氏阳性菌转呈阴性反应
《苹果酒的酿制》 一、实验目的 了解苹果酒酿制原理，学习苹果酒酿制技术。 二、实验原理 苹果酒是一类营养丰富、含酒精度低的上乘饮料。它是用含一定糖分和水分 的果汁压汁，经微生物发酵而成。其生化作用，除酒精发酵的主产物外，还有甘 油、醋酸、琥珀酸、杂醇油等的形成：同时，陈酿期中，各种酸类与醇类的酯化 反应，赋予果酒特殊的香味：果酒中的单宁、色素、果屑微粒及蛋白质（包括酵 母尸体)等的饿氧化和下沉，使酒液澄清、风味增浓。 各种果酒以原料而称名。除坚果外，所有栽培果、野生果均可做酿果酒的原 料。本实验以苹果酒为例，学习其酿制方法。 三、实验仪器及材料 菌种在TBe麦芽汁琼脂斜面培养基上的葡萄酒酵母(S.cerevisae,.ra ellipsoieles):苹果汁培养基（附录一）：7pBe'麦芽汁培养基；10mlV管、100ml 三角瓶等装置：白糖：食用酒精：亚硫酸：果胶酶：发酵缸；破碎机：果汁分离 器等。 四、实验过程 1.酒母培养 )菌种活化（一级种）取装有10ml苹果汁或7Be'麦芽汁培养基1支， 按无菌操作法接种葡萄酒酵母菌一环，混匀后置28~30℃下培养2-5天（用苹果 汁活化菌种时需培养5天以上)，镜检酵母繁殖良好，无杂菌即可。 (2②)母发酵剂制备（二级种）在装有100ml苹果汁培养基的三角瓶中，接 入1-2ml经活化的葡萄酒酵母菌液，于28℃下培养2-3天，当培养液表面有气泡 产生，嗅之有酒香味、取样镜检无杂菌时即可使用。 (③)生产发酵剂的制备（三级种）方法与母发酵剂相同，只是采取更大的 容器。一般采用500-1000ml的三角瓶或卡氏罐，盛装占容积1/2-3/5的果汁培养 液，灭菌冷却后，按10%接种量接入母发酵剂，在25一28℃下培养2448小时， 待发酵正常，镜检无杂菌方可使用。 3
3 《苹果酒的酿制》 一、实验目的 了解苹果酒酿制原理，学习苹果酒酿制技术。 二、实验原理 苹果酒是一类营养丰富、含酒精度低的上乘饮料。它是用含一定糖分和水分 的果汁压汁，经微生物发酵而成。其生化作用，除酒精发酵的主产物外，还有甘 油、醋酸、琥珀酸、杂醇油等的形成；同时，陈酿期中，各种酸类与醇类的酯化 反应，赋予果酒特殊的香味；果酒中的单宁、色素、果屑微粒及蛋白质（包括酵 母尸体）等的饿氧化和下沉，使酒液澄清、风味增浓。 各种果酒以原料而称名。除坚果外，所有栽培果、野生果均可做酿果酒的原 料。本实验以苹果酒为例，学习其酿制方法。 三、实验仪器及材料 菌种 在 7 оBe’麦芽汁琼脂斜面培养基上的葡萄酒酵母（S.cerevisae.var ellipsoieleus）；苹果汁培养基（附录一）；7 оBe’ 麦芽汁培养基；10ml/管、100ml/ 三角瓶等装置；白糖；食用酒精；亚硫酸；果胶酶；发酵缸；破碎机；果汁分离 器等。 四、实验过程 1. 酒母培养 ⑴ 菌种活化（一级种） 取装有 10ml 苹果汁或 7 оBe’ 麦芽汁培养基 1 支， 按无菌操作法接种葡萄酒酵母菌一环，混匀后置 28～30℃下培养 2-5 天（用苹果 汁活化菌种时需培养 5 天以上），镜检酵母繁殖良好，无杂菌即可。 ⑵ 母发酵剂制备（二级种） 在装有 100ml 苹果汁培养基的三角瓶中，接 入 1-2ml 经活化的葡萄酒酵母菌液，于 28℃下培养 2-3 天，当培养液表面有气泡 产生，嗅之有酒香味、取样镜检无杂菌时即可使用。 ⑶ 生产发酵剂的制备（三级种） 方法与母发酵剂相同，只是采取更大的 容器。一般采用 500-1000ml 的三角瓶或卡氏罐，盛装占容积 1/2—3/5 的果汁培养 液，灭菌冷却后，按 10%接种量接入母发酵剂，在 25～28℃下培养 24—48 小时， 待发酵正常，镜检无杂菌方可使用
2.果酒生产 工艺流程： 活化酵母→母发酵剂→生产发酵剂→苹果→分选除杂→清洗→ 破碎一压榨一粗果汁一发酵→皮渣分离→后发酵→原酒一 换桶除渣(2-3次)→贮存陈酿→配制→贮存一澄清过滤一装瓶→巴 氏杀菌→封口一成品。 操作要点： ()分选取成熟苹果，除去腐烂、干疤和伤果。 (2②)清洗清水充分洗涤，除去果皮上的污物、杂质及药剂，以保证原料干 净卫生。 (3)破碎为易于压榨，提高出汁率，需进行破碎。用破碎机破碎至果块粒 度0.5cm2左右，并除去果籽。 由于苹果汁易被自身含有的多酚氧化酶氧化，故破碎时需加SO2还原剂抑制 酶活性，同时SO2也具有杀菌、防腐和澄清果汁作用。SO2来源，除工厂应用液 态SO2外，实验室常加入亚硫酸(HSO3)和重亚硫酸盐(Na2S2O或KS2O6), 其用量为果汁量的0.02%即可。 (④)压榨分离破碎后立即进行压榨分离。分离出的果汁中不得夹带果肉， 同时需添加适量柠檬酸及单宁调整含量（要求果汁总酸含量为5g儿，单宁为 0.5gL),并加入0.10.15gL的果胶酶促进果胶分解，使果汁澄清并提高酒的风 (⑤)前发酵取澄清果汁放入经干热灭菌的发酵缸中，装量占缸容积的4/5， 按3一5%的接种量接入酵母生产发酵剂进行发酵，保持品温在18~22℃之间，最 高勿超过25℃，发酵应在7一12天内结束。一般苹果汁糖分约为11%，经发酵后， 酒精含量约达6%以上，但此酒度仍低，易变质腐败，故需用食用酒精调整酒度。 前发酵结束后，原酒度应大于13%(V),残糖5gL。 (⑥)后发酵前发酵结束后，迅速将酒液与皮渣分离，酒汁转入经干热灭菌 的发酵缸中，进行后发酵，使残糖继续分解。期间，控制品温在18一22℃之间， 不要超过25℃，时间1个月，即得原酒。（要求残糖含量小于2gL,挥发酸[以醋 酸计]小于0.6gL,总酸[以苹果酸计]大于5gL) (⑦)换桶除渣为使已澄清的原酒与酒脚（沉淀物）及时分离，以免酒脚产 4
4 2. 果酒生产 工艺流程： 活化酵母 → 母发酵剂 → 生产发酵剂 → 苹果 → 分选除杂 → 清洗 → 破碎 → 压榨 → 粗果汁 → 发酵 → 皮渣分离 → 后发酵 → 原酒 → 换桶除渣（2-3 次） → 贮存陈酿 → 配制 → 贮存 → 澄清过滤 → 装瓶 → 巴 氏杀菌 → 封口 → 成品。 操作要点： ⑴ 分选 取成熟苹果，除去腐烂、干疤和伤果。 ⑵ 清洗 清水充分洗涤，除去果皮上的污物、杂质及药剂，以保证原料干 净卫生。 ⑶ 破碎 为易于压榨，提高出汁率，需进行破碎。用破碎机破碎至果块粒 度 0.5cm2左右，并除去果籽。 由于苹果汁易被自身含有的多酚氧化酶氧化，故破碎时需加 SO2还原剂抑制 酶活性，同时 SO2也具有杀菌、防腐和澄清果汁作用。SO2来源，除工厂应用液 态 SO2外，实验室常加入亚硫酸（H2SO3）和重亚硫酸盐（Na2S2O5或 K2S2O6）， 其用量为果汁量的 0.02%即可。 ⑷ 压榨分离 破碎后立即进行压榨分离。分离出的果汁中不得夹带果肉， 同时需添加适量柠檬酸及单宁调整含量（要求果汁总酸含量为 5g/L，单宁为 0.5g/L），并加入 0.1—0.15g/L 的果胶酶促进果胶分解，使果汁澄清并提高酒的风 味。 ⑸ 前发酵 取澄清果汁放入经干热灭菌的发酵缸中，装量占缸容积的 4/5， 按 3—5%的接种量接入酵母生产发酵剂进行发酵，保持品温在 18～22℃之间，最 高勿超过 25℃，发酵应在 7—12 天内结束。一般苹果汁糖分约为 11%，经发酵后， 酒精含量约达 6%以上，但此酒度仍低，易变质腐败，故需用食用酒精调整酒度。 前发酵结束后，原酒度应大于 13%（V），残糖5g/L。 ⑹ 后发酵 前发酵结束后，迅速将酒液与皮渣分离，酒汁转入经干热灭菌 的发酵缸中，进行后发酵，使残糖继续分解。期间，控制品温在 18～22℃之间， 不要超过 25℃，时间 1 个月，即得原酒。（要求残糖含量小于 2g/L，挥发酸[以醋 酸计]小于 0.6g/L，总酸[以苹果酸计]大于 5g/L） ⑺ 换桶除渣 为使已澄清的原酒与酒脚（沉淀物）及时分离，以免酒脚产
生异味而影响酒质，故需进行换桶（缸）。换桶次数新酒每年换三次。第一次换 桶时需添加食用酒精，使原酒酒度达14度以上，才能安全存放。 (⑧)贮存陈酿应满桶贮存。陈酿即酒的老熟，经长期密闭贮存，可使酒质 澄清、风味醇厚。贮存室温8~16℃，存期2年以上。 (9⑨)配制原酒贮存一年半后可开始配制。配制时，按工艺规定将不同原酒 按一定配比相混，然后添加适量的糖、酒精，继续贮存半年以上。 四澄清过滤可采用冷冻法使其澄清，即于-10℃左右存放7天，然后冷过 滤。澄清后的酒置-5~7℃下冷冻3天不发生混浊沉淀，或暴露空气中氧化4天 不变混浊即为合格。 D装瓶灭菌装瓶后需进行巴氏杀菌，即在70℃下处理15分钟，冷却后封 口保存。 五、实验报告 1.简述苹果酒的酿制法。 2.二氧化硫在果酒酿制中的作用是什么？生产中如何加入二氧化硫？ 六、思考题 1.酵母菌酿酒的原理是什么？ 2.果酒酿制中为何加入果胶酶？
5 生异味而影响酒质，故需进行换桶（缸）。换桶次数新酒每年换三次。第一次换 桶时需添加食用酒精，使原酒酒度达 14 度以上，才能安全存放。 ⑻ 贮存陈酿 应满桶贮存。陈酿即酒的老熟，经长期密闭贮存，可使酒质 澄清、风味醇厚。贮存室温 8～16℃，存期 2 年以上。 ⑼ 配制 原酒贮存一年半后可开始配制。配制时，按工艺规定将不同原酒 按一定配比相混，然后添加适量的糖、酒精，继续贮存半年以上。 ⑽ 澄清过滤 可采用冷冻法使其澄清，即于-10℃左右存放 7 天，然后冷过 滤。澄清后的酒置-5～-7℃下冷冻 3 天不发生混浊沉淀，或暴露空气中氧化 4 天 不变混浊即为合格。 ⑾ 装瓶灭菌 装瓶后需进行巴氏杀菌，即在 70℃下处理 15 分钟，冷却后封 口保存。 五、实验报告 1. 简述苹果酒的酿制法。 2. 二氧化硫在果酒酿制中的作用是什么？生产中如何加入二氧化硫？ 六、思考题 1. 酵母菌酿酒的原理是什么？ 2. 果酒酿制中为何加入果胶酶？
《食品中钙含量的测定》 一、实验目的 1.学习和了解火焰原子吸收法的测试基本原理。 2.掌握火焰原子吸收的使用方法及注意事项。 二、实验原理 火焰原子化器：原子化器的功能是提供能量，使试样干燥、蒸发和原子化。 入射光束在这里被基态原子吸收，因此也可把它视为吸收池”。对原子化器的基 本要求：必须具有足够高的原子化效率：必须具有良好的稳定性和重现形：操作 简单及低的干扰水平等。其结构如下图所示。 零化 试样溶液废液 火焰原子化器结构示意图 火焰原子化法中，常用的是预混合型原子化器，它是由雾化器、雾化室和燃 烧器三部分组成。用火焰使试样原子化是目前广泛应用的一种方式。它是将液体 试样经喷雾器形成雾粒，这些雾粒在雾化室中与气体（燃气与助燃气）均匀混合， 除去大液滴后，再进入燃烧器形成火焰。此时，试液在火焰中产生原子蒸气。 雾化器：原子吸收法中所采用的雾化器是一种气压式、将试样转化成气溶胶 的装置。当气体从喷嘴高速喷出时，由于伯努利(Bernoumlli)效应的作用，在喷咀 附近产生负压，使样品溶液被抽吸，经由吸液毛细管流出，并被高速的气流破碎 成为气溶胶。气溶胶的直径在微米数量级。直径越小，越容易蒸发，在火焰中就 能产生更多的基态自由原子。雾化器的雾化效率对分析结果有着重要影响。在原 子吸收分析中，对试样溶液雾化的基本要求是：喷雾量可调，雾化效率高且稳定： 气溶胶粒度细，分布范围窄。一个质量优良的雾化器，产生直径在5~10um范围 6
6 《食品中钙含量的测定》 一、实验目的 1. 学习和了解火焰原子吸收法的测试基本原理。 2. 掌握火焰原子吸收的使用方法及注意事项。 二、实验原理 火焰原子化器：原子化器的功能是提供能量，使试样干燥、蒸发和原子化。 入射光束在这里被基态原子吸收，因此也可把它视为“吸收池”。对原子化器的基 本要求：必须具有足够高的原子化效率；必须具有良好的稳定性和重现形；操作 简单及低的干扰水平等。其结构如下图所示。 火焰原子化器结构示意图 火焰原子化法中，常用的是预混合型原子化器，它是由雾化器、雾化室和燃 烧器三部分组成。用火焰使试样原子化是目前广泛应用的一种方式。它是将液体 试样经喷雾器形成雾粒，这些雾粒在雾化室中与气体（燃气与助燃气）均匀混合， 除去大液滴后，再进入燃烧器形成火焰。此时，试液在火焰中产生原子蒸气。 雾化器：原子吸收法中所采用的雾化器是一种气压式、将试样转化成气溶胶 的装置。当气体从喷嘴高速喷出时，由于伯努利(Bernoumlli)效应的作用，在喷咀 附近产生负压，使样品溶液被抽吸，经由吸液毛细管流出，并被高速的气流破碎 成为气溶胶。气溶胶的直径在微米数量级。直径越小，越容易蒸发，在火焰中就 能产生更多的基态自由原子。雾化器的雾化效率对分析结果有着重要影响。在原 子吸收分析中，对试样溶液雾化的基本要求是：喷雾量可调，雾化效率高且稳定； 气溶胶粒度细,分布范围窄。一个质量优良的雾化器，产生直径在 5～10μm 范围
的气溶胶应占大多数。调节毛细管的位置即可改变负压强度而影响吸入速度。装 在喷雾头末端的撞击球的作用就是使气溶胶粒度进一步细化，以有利于原子化。 雾化器是火焰原子化器中的重要部件。它的作用是将试液变成细雾。雾粒越 细、越多，在火焰中生成的基态自由原子就越多。目前，应用最广的是气动同心 型雾化器。喷出的雾滴碰到玻璃球上，可产生进一步细化作用。生成的雾滴粒度 和试液的吸入率，影响测定的精密度和化学干扰的大小。目前，雾化器多采用不 锈钢、聚四氟乙烯或玻璃等制成。 空气入口 夜体入口 撞击球 雾化器结构图 雾化室：雾化室的作用主要是去除大雾滴，并使燃气和助燃气充分混合，以 便在燃烧时得到稳定的火焰。其中的扰流器可使雾滴变细，同时可以阻挡大的雾 滴进入火焰。一般的喷雾装置的雾化效率为5~15%。 燃烧器：试液的细雾滴进入燃烧器，在火焰中经过干燥、熔化、蒸发和离解 等过程后，产生大量的基态自由原子及少量的激发态原子、离子和分子。通常要 求燃烧器的原子化程度高、火焰稳定、吸收光程长、噪声小等。燃烧器有单缝和 三缝两种。燃烧器的缝长和缝宽，应根据所用燃料确定。目前，单缝燃烧器应用 最广。 燃烧器多为不不锈钢制造。燃烧器的高度应能上下调节，以便选取适宜的火 焰部位测量。为了改变吸收光程，扩大测量浓度范围，燃烧器可旋转一定角度。 三、实验仪器及材料 TAS-990AFG系列原子吸收分光光度计，钙空心阴极灯，钙标准储备液 7
7 的气溶胶应占大多数。调节毛细管的位置即可改变负压强度而影响吸入速度。装 在喷雾头末端的撞击球的作用就是使气溶胶粒度进一步细化，以有利于原子化。 雾化器是火焰原子化器中的重要部件。它的作用是将试液变成细雾。雾粒越 细、越多，在火焰中生成的基态自由原子就越多。目前，应用最广的是气动同心 型雾化器。喷出的雾滴碰到玻璃球上，可产生进一步细化作用。生成的雾滴粒度 和试液的吸入率，影响测定的精密度和化学干扰的大小。目前，雾化器多采用不 锈钢、聚四氟乙烯或玻璃等制成。 雾化器结构图 雾化室：雾化室的作用主要是去除大雾滴，并使燃气和助燃气充分混合，以 便在燃烧时得到稳定的火焰。其中的扰流器可使雾滴变细，同时可以阻挡大的雾 滴进入火焰。一般的喷雾装置的雾化效率为 5 ~ 15%。 燃烧器：试液的细雾滴进入燃烧器，在火焰中经过干燥、熔化、蒸发和离解 等过程后，产生大量的基态自由原子及少量的激发态原子、离子和分子。通常要 求燃烧器的原子化程度高、火焰稳定、吸收光程长、噪声小等。燃烧器有单缝和 三缝两种。燃烧器的缝长和缝宽，应根据所用燃料确定。目前，单缝燃烧器应用 最广。 燃烧器多为不不锈钢制造。燃烧器的高度应能上下调节，以便选取适宜的火 焰部位测量。为了改变吸收光程，扩大测量浓度范围，燃烧器可旋转一定角度。 三、实验仪器及材料 TAS-990AFG 系列原子吸收分光光度计，钙空心阴极灯，钙标准储备液
(1mg/mL),优级纯硝酸，50mL容量瓶6个，样品瓶2个 四、实验步骤 4.1溶液配制 4.1.1标准使用液 移取钙标准储备液(1mgmL)按照10倍的体积关系（最大不可超过100倍） 逐级稀释至100ugml. 4.1.2标准系列 用含量为100ugmL标准使用液按下表配制标准溶液各浓度梯度溶液。 标准系列序号 浓度mgL So 0.000 5.000 2 10.000 g 15.000 S4 20.000 4.2测试条件的设置 原子吸收测定条件如下图所示： 分析参数： 波长 光谱带宽 灯电流 滤波系数积分时间 燃烧器高度 (nm) (nm) (mA) (秒) (mm) 422.7 0.4 3.0 0.3 3 6 火焰类型 Air (Mpa.mL/min) C2H2(Mpa,mL/min) N2O(Mpa,mL/min) Air-CH2,富燃焰 0.20 0.05,1700 标准曲线 注意
8 （1mg/mL），优级纯硝酸，50mL 容量瓶 6 个，样品瓶 2 个 四、实验步骤 4.1 溶液配制 4.1.1 标准使用液 移取钙标准储备液（1mg/mL）按照 10 倍的体积关系（最大不可超过 100 倍） 逐级稀释至 100ug/ml。 4.1.2 标准系列 用含量为 100ug/mL 标准使用液按下表配制标准溶液各浓度梯度溶液。 标准系列序号 浓度 mg/L S0 0.000 S1 5.000 S2 10.000 S3 15.000 S4 20.000 4.2 测试条件的设置 原子吸收测定条件如下图所示： 分析参数： 波长 （nm） 光谱带宽 （nm） 灯电流 （mA） 滤波系数 积分时间 （秒） 燃烧器高度 （mm） 422.7 0.4 3.0 0.3 3 6 火焰类型 Air（Mpa,mL/min） C2H2(Mpa,mL/min) N2O(Mpa，mL/min) Air-C2H2,富燃焰 0.20 0.05，1700 标准曲线 注意
在空气一乙炔火焰 标样浓度 序号浓度u/】■吸光度 中常受溶液中PO,3 0.659 0469 Si0等阴离子的干 扰，故应在标准及样 0.069 品溶液中加入“释放 厂隐流0 浓度ae/] 剂”以克服干扰。常用 计算 曲线方程 一次【A=C]+ 的释放剂为锶盐和 ■启用误差校正功能 盐。加入的浓度S 上自动升然方程 最小相关性0.00000 为5000ugmL-, 误在 La10.000ug-mL. 打印) 确定☐ 取消 帮助 测试表格 序号 测量对象样品编号 Abs 浓 度SD RSD% ng*mL-1 标准样品Cal 0.001 00 00003 标准样品Ca2 0.119 2.0 0.0003027 标准样品Ca3 0.234 14.0 0.001910.82 标准样品Ca4 10.335 160 10.00111033 标准样品Ca5 0.434 80 0.00220.50 标准样品Ca7 0.783 15.0 0.0020026 分析结果： 线性相关系数 特征浓度gmL 检出限gmL 相对标准偏差 0.9992 0.084 0.017 0.27 注意事项：必须注意分析试剂、器皿及室内环境造成的污染。溶液应保持一定酸度。 4.3注意仪器能量值的变化，将能量控制在90%以上。 五、实验注意事项 1.实验过程中使用的容器均使用20%的硝酸（优级纯）浸泡过夜，再用去离 子水冲洗干净，以防影响实验结果的准确性， 2.原子吸收分光光度计使用前预热30分钟以上
9 在空气－乙炔火焰 中常受溶液中 PO4 3-、 SiO3 2-等阴离子的干 扰，故应在标准及样 品溶液中加入“释放 剂”以克服干扰。常用 的释放剂为锶盐和 镧盐。加入的浓度 Sr 为 5000μg•mL-1 ， La10,000μg•mL-1。 测试表格 序号 测量对象 样品编号 Abs 浓 度 ng•mL-1 SD RSD[%] 1 标准样品 Ca1 -0.001 0.0 0.0003 — 2 标准样品 Ca2 0.119 2.0 0.0003 0.27 3 标准样品 Ca3 0.234 4.0 0.0019 0.82 4 标准样品 Ca4 0.335 6.0 0.0011 0.33 5 标准样品 Ca5 0.434 8.0 0.0022 0.50 6 标准样品 Ca7 0.783 15.0 0.0020 0.26 分析结果： 线性相关系数 特征浓度μg•mL-1 检出限μg•mL-1 相对标准偏差 0.9992 0.084 0.017 0.27 注意事项：必须注意分析试剂、器皿及室内环境造成的污染。溶液应保持一定酸度。 4.3 注意仪器能量值的变化，将能量控制在 90%以上。 五、实验注意事项 1. 实验过程中使用的容器均使用 20%的硝酸（优级纯）浸泡过夜，再用去离 子水冲洗干净，以防影响实验结果的准确性。 2. 原子吸收分光光度计使用前预热 30 分钟以上