
复习-DNA甲基化2016
复习-DNA甲基化 2016

S复习-焦磷酸测序的技术原理在亚硫酸盐的作用下,所有未甲基化的胞嘧啶发生脱氨基反应转变成了尿嘧啶,但是5-甲基胞嘧啶不发生转变l.Bisulfitetreatmentof denaturedDNAmcmcCU2.PCRamplificationmCCUT一

3PolymeraseAGGATCTGAGCASTINY5TCCTAGACACCnaPPiCSulfurylaseApyraseATPcCLuciferaseLightQiagenQ96IDTime

A甲基化定焦磷酸测量序聚合酶链式反应亚硫酸(PCR)盐转化基因组DNA提取

Epilect BisulfiteConversionProcedure亚硫酸盐转化DNAond EpilectBisulite reoctionreaction buffersDNAconversion inthermal cycler (5 h)Transfer to 1.5ml microtubeCAdd BufferBL+ffffLood Spin ColumnBindWashAdd Buffer BW纯化DesulfonafionAdd BufferBDWash (× 2)AddBufferBW口Elute

第一组第二组第三组第四组第五组第六组marker

免疫印迹技术-Western blotting邓晓蓓2016.6.20
免疫印迹技术 -Western blotting 邓晓蓓 2016.6.20

复习-免疫印迹技术-westernblotting基本原理:将SDS-PAGE电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。WesternBlot操作关建步舞1.组织菜集或细墙养2.样品制备3.SDS-PAGE4.转胶5.一抗的群育6.二抗的群育7.星影
复习-免疫印迹技术-western blotting 基本原理:将SDS-PAGE电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移 到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的 一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗 体活性检测和疾病早期诊断等多个方面

?复习-SDS-聚丙烯酰胺凝胶制备原理聚内烯酰胺凝疑胶作为支持介质的一种常用电泳技术聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成聚合过程由自由基催化完成化学聚合以过硫酸铵(APS)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂在聚合过程中,TEMED催化过硫酸铵产生自由基,后者引发丙烯酰胺单体聚合,同时甲叉双内烯酰胺与内烯酰胺链间产生甲叉键交联,从而形成三维网状结构
聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。 聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成, 聚合过程由自由基催化完成。 化学聚合以过硫酸铵(APS)为催化剂,以四甲基乙二胺 (TEMED)为加速剂。 在聚合过程中,TEMED催化过硫酸铵产生自由基,后者引发丙 烯酰胺单体聚合,同时甲叉双丙烯酰胺与丙烯酰胺链间产生甲 叉键交联,从而形成三维网状结构。 复习-SDS-聚丙烯酰胺凝胶制备原理
