
上得日2医学Yol.6Nb.2197 *65· 绞股蓝对金地鼠颊囊癌前病变细胞动力学影响的研究 周曹网撑摊宁张水龙周米楼全芝青江静季伟国张星足 满要对德的病变的纤究是双克密症的重要领城之一。为了计究口臣名真密前肉变敦 %过程的发生机密,家寻有效的防墙用培荐物,术实酸采用3y达诱呼金垃数顿喜上皮海 发,以中卓药纹杜盐GP)行组斯试煎,并以光领材合增殖短扇核拉夏CNA)和滇粮氧果暗 爱(dU)等免变组化方法,动态现衰G的疗效,结果发现该药能社逃白斑的出家时间和陈 :出现水,井能明坐降任数德率。用药组的PCNA和BU阴性领略标识率明暴任于棋四组, 月始迩处于较低水平,迁实了GP的药瘤效果和对红酱丹常州磷的却制作月, 关健词饺成或金粒国 察并病变望的动力学 The studyf influcacing c山ular dynamiesof刀amstemm pestsph,ums船nldes hamster of Ora!Meditine,School of.M5.Shanghai 2000]1 Abstract Studying premalignaney is an importanmt field of conquering caneer.The aim to study the m:hunie ol oesl muecoul premalignant formation ard seek effective drng which could prevent and block eaneer,Gynastemma Puntaphyllum (GP)was spplies to block carring- mutous ecerveraice of golden hamter cheek ponch hy Salley's way.Using light microscopic ervticm and proliferating cell mdleor anige (PCNA)swll bromodcoxyurie (BedU)(PCNA and BrdU are immunohistochemistry techniques),GPs effect was observed dy- mamieally.We found that GP could delay the presen:e of and decrease the rate od presemne as well as cancer-causing rate The positive cells ol tkieg drg group PCNA and Br- dU were lower than model oup significuntly ad inlower eanditian all the time Iisu trated that GP has the effect of prevesting cancer and inhibiting clular dyaplanis Key words gsstemm pentaphyllum goldmn bamster premalignancy cellu- lar dynamics 癌症是严重戒胁人类坐命的主要疾病之 拘活性的中药额歌发(Gymostemma peni证 一,基于离住是出正常组织细胞渐变而成的 WmMa.GP)运用于猜前肩变阻断试 认识,近年来嘉前病变已成为重要研究领或. 验,通过光能诊断和殖细鬼核抗原(poli 复习国内外文献,发现对帝前病变发生机制, erating cell nuclear Artigene,PCNA) 防指方法尤其是中草药访癌阻癌的道不 脱氧尿座晚(Bromodexyuridine,BrdU)等免 多,因此,本文采用S山©7法诱导金地佩顿 竞组化方法,动志观察GP效果,探时其防籍 粪上皮癌变,将其有抗脚瘤,抗衰老等多种生 盟癌的组园动力学机理。 树料与方法 作着单位:11上为第二玉科大学口整思学烧口整内 科粒所宝 1材料 C 1995-2005 Tsingino Towgfing Opical Dirc Co.Ld Al rights reserved
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·66: 上海口壁医学V©l.6Nc-21997 1.1实验动物:叙利亚品系地氟品种金地眼 在5,经欢人复核无误后作出记录和途断。 17只:由上海西普尔一BK实验动物有限 2.5PCNA检测:取标本胡片,经脱附水化 公司提供。清洁毁。封阳形,周龄4一8周。 一单抗孵育一ABC薇导育一11,O,基质溶流 体重80-100g.饲养条件:空气流道,室温23 培养一染色一梯度乙醇脱水透明封片等步 一26℃,相对组度75%一85%,分笼饲养,每 果,完成免整组化染色后高侪镜(×C)下视 笼运1心只,食该公可出品的金地氟金份霄养 赛,每剂3个视野,测试网格法计数阳生泪 履粒饲料和雜生素C溶液(1mg/1ml), 电,技公式计算阳性细张标识率: 1.2致糖剂:将分装好的二甲基茉并兽 阳性组胞意 标识本一两可首餐×]80% (dimethylbenzanthracene,DMBA Ig 并依北分级,0%~25%【级:26%- 下加入到200ml丙酮液,报荡,待溶,装度, 50%1级:51%一75%1额:76%一100%W 备用,每次实羟取比0.5%的DMBA少量涂 级, 用。 2.6BeU校测:将处死前作过体内标记的 1.3免疫组化甘剂:采用DAKO公司提供 频囊标本常规切片,经脱情水化一腹降消化 的ABC试利盘,PBs级中液按常规自行配 一中和一免疫组化律规处用,高倍镜下观察 剖. 计数(方法同PNA),按阳性据胞标识率分 1.4中药剂剂:云南产纹股营全草,经上海 极:%一10%为1级;11%…20%为2级: 医科大学生药学教研室鉴定总优含量为 21%一30%为3级:31%一40%为4毁:> 1,264%,云南产灯鉴知辛全草,按常规泡制, 40%为5级. 并以1:1比榔配制复方GP. 2方法 结果 2.1列钓分组:分空白对组,模型组,用药 1岗眼现察GP对金越凰烦囊篇前刺变的 组.学白对型组昌只,徐生理盐水,带规饲养 于实粒开始和钻来时处死,模型组105只,涂 凰断效米,见表1一3和图1. 表1频青粘酬均质廿白痕塞结暴 布DMBA2~9周后分批处死,用药组1M 型到甘出悦表第7两时的白分率(⅓】 只,限眼单方或复方GP,涂布DMBA,2~9 伸型 21.4 周后分批处死。该组中细分为边涂边联和先 边章边聚 5a,0 最后涂等不同用药组。 先服后象《单方) 的.0 先服后除(夏方) 2.2模梨制作:乙醚麻醉后大直概榨开领囊 口,用1号消面笔取少量DMBA,以短囊 路F和b阳睛清每率沈检验澳自一拉徐边聊运P>Q5山 模红一先聚后聋(氯方)国P<001,站学边象氨一无眼 前静脉为中心作图商运动10次,徐后禁食禁 S游(复方里P<0.L。也着边要州一先要后象(单去)型 水2小时,每周相同部位徐布3次, P心05,光最后第(单方)一(复方)F06. 2.3给药方式:摘摩吸取GP制剂,按 从表1看出用药姐均质型白斑出现的时 10mgkg计算给药量,经口灌州,每日1次。 问明显就于棋型组,复方组的白班出现率最 限药后禁食茶水2小时, 低,明量优于单方祖(P<005).表2反陕出 24光镜税察:取金地以双侧频囊组织块, 川药组的疣状和颗粒状白斑比模型组出现 草规固定聪水包里切片染色,于低倍(×) 晓,出观卡低,其中先服后涂组比边徐边服氢 和高倍(×40)光镜下无察,每例3个视野,参 效果更加显著。表3是光镜观案用药各组件 照WHO口壁癌前病变德作中心诊断标 本合并后的总体疗效,反陕出用药组的癌变 C 1995-2005 Taingho Yowgfang Opveal Dirc Co.Lnd All righrs resened
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上潭口臣医学Val.6N6.217 67 书和重度上皮异#增生爱生率大大低于桃型 响苗果见表4,5和图2, 组, 图2是用药组与模型组各级PCNA阳 图1是光镜观寡涂DMBA6周时客组 性细单有方图,从中可以直观地反扶出GP 位籍及重度上皮异附增生发生率比较。各最 的防效果。 药组均比被型组低. 表5是部分标本BrU按测站果,反浪 2GP对金贴限领囊瓶变过程细胞动力影 出用药组在4一5两级的差别, 专?刻请书飘线状及顺轮状白匠现事结果 短倒 第6汽 示7魔 第月周 第P 出权秦(⅓)P的·一出现米(⅓)P值 出%米1%?P黄 出规(⅓)P鱼 柄型 4 72052限0门nG1 109 1≤0.叫 18D 1<a.1 边塘也吸 PD 05 P50.05 2<0.6 20 20.0l 究银后金 P2086 P8001 0 P3001 P30,0l 门为制留组一边橡边图里之P值,P2为山常进里细一先后数用之P值.P四为模玉组一先眼后组之P值 表1位议置总体疗效的光线规席结果止较《州数,) 韵 组用 得版正日感表整。上皮绿京圳华 经,电成置 愿位当 品 等名 州5里104222L,298762541】186 4拥1052019.015162454232821.9 力国种 颗4层历超2一周NA分服动达宝化情况(同数,⅓) 估和边佛 C方行 FCNA餐 DMBA I 州数18一▣其名▣另 阳】6周时各出高变之重贵异青带生些观率 33m0770g110.00910 18期.02369000919 4220.06504220.003.10 5526.810583315,815.s19 67383281323.100 13 30 7100.0】323210.015.0 600330820.0450610 20 5。a.3k57日00912 2格胺:P<0.0防 1 表;(暖附各组44检测结果例 Pdu分级 能 合计 周2用两组可复云烟吾线℃NA阳件妇胸率直方周 3145 讨论 先取日隆q 5 20 边操边服1 1218 1关于GP的药精效果评价 2绘脸:P0.0巧 GP又名七叶胆、小苦药等,味苦,性寒、 (下轮第110可) 1995-200)5 Tringima Towgfang Opveal Dine Ca,Luf Al righes reserwd
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·1104 上海口症医学Vl.8Na.2107 最,一程慢柱领骨件等荧系少0次,对于死骨清除 老人经高瓜氧消疗会邵华意 求后的限新考求到都分坏死膏质已清除,故减至12 次,对于X线帮片发现有死骨形成的病树侧给予下 壶考文献 术冲疗,因手术能从根本上清降死膏,清称州灶在 !解雪涛,领骨数射牡骨不双的)涂厅理状,密领外料 所有2例思者始自后二年用访,无一复发,所以 朵表,108,5(2):124 我们还是是售以高压氧为主的缩合疗达油疗樱性额 ?州师图。额骨点创性骨怀死的临床观度.中华口整玉学 什什盈克, 杂志,139,24:114 从隆末上我门还现家到,高压氧潘疗尤其话合 ,将广才,临宋在压氧民学.北京,华文出银仁1所 年老体利的件件筒炎男者,出其能是免干术的风 农福,139阶一01一2丝链民,193了一03一2 臣,可件达到准意的效果,本能共有6位65多以上 (上接第57页) 合成的DNA单链中,它的出现也能标志S 无薄,有消炎解毒,咳状锁的功效。,近 别饵孢活妖和细甩增殖情况。本实羟发现桃 20年我国与日本学界对GP的化学成份、动 里组在致獰剂刺下,伴商上皮异幕增生至 物实松和临床疗效选行了大量研究,在离体 籍,同步出现FCNA和BdU阳性卸胞率增 仰辖实验中发现GP对S一10肉着饵跑株, 高,面用药组印能打破这种趋势,和性细阻标 文氏腹水癌细电校等有即制作月,木实验 识率控制在较低水平,说明GP的防籍抑痛 首次采用在动物实整手段将GP用于口粒塘 机制与物制细胞异常增箱有关。至于GP对 的病变治疗和阻癌试致,经以联现案和光流 需前腐变细脑动力学积极彭利的内在机理俏 论断,发现GP衡桩迟和降低白斑出现率(表 待深入探付, 1,2)并能降低倍变率1倍以上(表3,图1)说 参考文献 明GP在阵内条件下具有阻止德前制变转化 为艳的效果,对用西组进一步分如联宾,发现 】slyJ上rmeog4 sin the cheek 复方疗效优于单方,先取品涂比边段边涂好. pouch of tbe Syrias hossier-I Destel Res.1954.33. 说明GP具有对正常组织的某种保护作月, 253 2期府同作水克,棕窗宁,中武位程蓄饼寒进区。上将中 2关于GP阻密的氧胞动力学机料 还西价志,19州,7:245 细真动力学是研究针南的重要手段,正 3覆未冉,曹空晓口拉墙前有型上左银客中的组织标记, 常细跑在致煌同素作用下,会在癌变过星中 上每口酸联学,195,5(1》.44-47 出现核浆比例增大,有笼分菱增如等形态学 Rianoy P.et al.Here xalmeratrin secretirn and ce 变化。在细胞动力学范斯内期表现为DNA :ii探isevepuretius alklin po4小ete ad malrrix 合成璃率增大,细胞周期喻短,S期纽胞活默 depeuitina.J Hivirchem ard Cytochom.1993,41 () 和顿率增如等特狂。F℃NA是分子量为 13-14P 38KD的核蛋白,是DNA多聚傅的韩助发 5 wHO collatoraung centre for oral precancerours lesion 白,它的出现能特异地反肉S期钳形的活默 0datt,l94,6,518 程度,BrdU是一种人工合成的核酸前体,可 6正万新医学段,中两大?我:第一根。上等:上得料枝出 吸社.195,16 被S期细胞重群经核酸务路摄取,整合入新 (收喻:196一10-2别意回:157-04-01》 Ci9952005Thr了onging Opncal D3cCa,Ld4Wr心h的eserve过
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