河北北方大学：溶血性贫血的实验室检测练习题及参考答案_实验诊断学第二章.doc_大学文库

用安痛定、柴胡各注射一针，乏力更明显。出现面部及巩膜黄染，就诊。体检：贫血貌，巩膜黄染，心肺征（一），肝未及，脾肋下四指。实验室及其他检查 1.血象：b104g/L,WBC7.9×10/几分类：中性杆状核细胞5%，分叶核细胞45%，单核细胞5%，淋巴细胞43%，嗜酸粒细胞1%，嗜碱粒细胞1%，BPC158×10/L,网织红细胞9.5% 2.红细胞形态无明显异常。 3.骨髓象特征：红系轻度增生。 4.细胞化学染色：铁染色：内铁偏高，外铁+。 5.尿常规检查：尿呈深茶色，尿蛋白(-)，尿胆素（土），尿胆原（土），尿潜血(-)。 6.肝功能检查：正常，TBIL137.7μmol/L,DBIL13μmol/L,尿含铁血黄素试验(+)，直接抗人球蛋白试验(-)，酸化甘油溶血试验AGLT50>290s,糖水试验(-)，酸溶血试验(-)，高铁血红蛋白还原试验正常。 7.变性珠蛋白小体检查（煌焦油蓝沉淀法15分钟）：可见变性珠蛋白小体其姐，王建军，26岁，曾于99年以“脾亢”作脾切除，现一般情况良好，血象：b135g/L, WBC9.0×10/L,BP℃936×10/L,网织红细胞4.2%，分类：中性分叶核细胞63%，淋巴细胞23%，单核细胞10%，嗜碱粒细胞1%，嗜酸粒细胞3%。血片红细胞形态：可见明显靶形红细胞。变性珠蛋白小体检查：可见较多变性珠蛋白小体简述诊断思路，以后应进一步的实验检查。【参考答案】一、名词解释 1.溶血性贫血：各种原因导致红细胞寿命缩短(15~20天)或破坏加速，超过了骨髓造血的代偿能力时而表现的一组贫血称为溶血性贫血。 2.Rous试验：又称尿含铁血黄素试验，是利用普鲁氏蓝反应针对尿沉渣中的含铁血黄素及其细胞而进行的染色检查。慢性血管内溶血尤其是阵发性睡眠性血红蛋白尿病人该反应可查到阳性结果。二、简答 1.答：自身免疫性溶血性贫血是一组免疫系统异常的溶血性贫血，有温抗体型、冷抗体型及药物型等多种类型。如红细胞上吸附有冷抗体，则可直接激活补体而发生血管内溶血：若为温抗体，则红细胞流经单核-巨噬细胞系统时，其吸附的抗体下℃端被识别而发生血管外

用安痛定、柴胡各注射一针，乏力更明显。出现面部及巩膜黄染，就诊。体检：贫血貌，巩膜黄染，心肺征(-)，肝未及，脾肋下四指。实验室及其他检查 1．血象：Hb 104g/L，WBC 7.9×109 /L 分类:中性杆状核细胞 5％, 分叶核细胞 45％, 单核细胞 5％ ,淋巴细胞 43％ , 嗜酸粒细胞 1％, 嗜碱粒细胞 1％，BPC 158×109 /L，网织红细胞 9.5％。 2．红细胞形态无明显异常。 3．骨髓象特征：红系轻度增生。 4．细胞化学染色：铁染色:内铁偏高，外铁+。 5．尿常规检查: 尿呈深茶色，尿蛋白(-)，尿胆素(土)，尿胆原(土)，尿潜血(-)。 6．肝功能检查：正常，TBIL 137.7μmol/L，DBIL 13μmol/L，尿含铁血黄素试验(+)，直接抗人球蛋白试验(-)，酸化甘油溶血试验 AGLT50>290s，糖水试验(-)，酸溶血试验(-)，高铁血红蛋白还原试验正常。 7.变性珠蛋白小体检查(煌焦油蓝沉淀法 15 分钟):可见变性珠蛋白小体其姐，王建军, 26 岁，曾于 99 年以“脾亢”作脾切除，现一般情况良好，血象:Hb135g/L， WBC 9.0×109 /L，BPC 936×109 /L，网织红细胞 4.2％，分类:中性分叶核细胞 63％，淋巴细胞 23％，单核细胞 10％，嗜碱粒细胞 1％，嗜酸粒细胞 3％。血片红细胞形态: 可见明显靶形红细胞。变性珠蛋白小体检查:可见较多变性珠蛋白小体简述诊断思路,以后应进一步的实验检查。【参考答案】一、名词解释 1.溶血性贫血：各种原因导致红细胞寿命缩短（15～20 天）或破坏加速，超过了骨髓造血的代偿能力时而表现的一组贫血称为溶血性贫血。 2.Rous 试验：又称尿含铁血黄素试验，是利用普鲁氏蓝反应针对尿沉渣中的含铁血黄素及其细胞而进行的染色检查。慢性血管内溶血尤其是阵发性睡眠性血红蛋白尿病人该反应可查到阳性结果。二、简答 1.答：自身免疫性溶血性贫血是一组免疫系统异常的溶血性贫血，有温抗体型、冷抗体型及药物型等多种类型。如红细胞上吸附有冷抗体，则可直接激活补体而发生血管内溶血；若为温抗体，则红细胞流经单核-巨噬细胞系统时，其吸附的抗体 Fc 端被识别而发生血管外

溶血：即使红细胞未能被一次性破坏，但所发生的继发性球形化改变仍可使其再次流经脾脏时而被破坏掉。因此，AIA既可发生于血管内又可发生于血管外。 2.Coombs试验又称抗人球蛋白试验，其反应原理是： (1)抗人球蛋白血清中含有抗免疫球蛋白（多为IgG)及抗补体的抗体，多为IgM型。 (2)当抗人球蛋白血清与受检者红细胞在37℃直接作用时，如红细胞表面确实吸附有免疫性抗体IgG,则可与抗IgG的IgM结合发生肉眼可见的凝集反应，是为Coombs试验直接阳性，表示红细胞己被致敏。 (3)如果用受检者血清处理同血型正常人的红细胞后，再将该红细胞与抗人球蛋白血清相作用而发生肉眼凝集，表明正常人的红细胞上吸附了病人血清中的不完全抗体，是为间接反应阳性。临床意义： (1)温抗体型AIHA,直接反应阳性，间接反应阴性： (2)新生儿同种免疫溶血病，患儿直接反应阳性，间接反应阴性： (3)由甲基多巴或青霉素类药物所致AHA如为急性溶血则直接反应阴性而间接反应阳性，如为慢性则直接、间接均可阳性： (4)本试验阳性还可见于SLE、类风湿性关节炎、淋巴瘤及恶性肿瘤等。 3.答：PN阳的病因至今未明，概因某种原因刺激骨髓使之生成异常克隆而产生有膜缺陷的红细胞，该细胞对补体敏感，在低离子强度溶液或酸性环境中均可促使其激活补体而发生溶血。临床常用的体外试验中最敏感的方法是蔗糖水溶血试验，但其特异性差：最可靠的试验是酸溶血试验，特异性强。在Rous试验阳性的基础上进行筛查，提高诊断正确率。进行补体溶血敏感试验或用分子生物学方法检查GPI锚蛋白及PIG一A基因通常用于医学科研。 4.答：正常人血红蛋白绝大部分为HbA,其珠蛋白肽链组成为a2B2,其次为A2 (a2δ2)，含量最少的是bF(a2Yz)。如后两种珠蛋白定量增加则为异常。由于珠蛋白肽链合成速度异常而产生的异常珠蛋白还有：HbH(B,)、bbarts(Y4)。由于珠蛋白分子结构异常而产生的异常珠蛋白有bs、HbE、HbC等。 5.答：HS及温抗体型AIHA病人的血涂片上均可看到球形红细胞，因而二者红细胞渗透脆性试验均为阳性，但还有以下差别①前者Coombs试验直接、间接反应均为阴性，而后者根据不同原因所致溶贫可出现不同类型的阳性结果。②前者多有家族史，而后者多无家族史。③高渗蔗糖冷溶血试验，HS阳性而AIHA为阴性结果。 6.答：衰老红细胞破坏后释放出的血红蛋白在单核-吞噬细胞系统内降解铁、珠蛋白

溶血；即使红细胞未能被一次性破坏，但所发生的继发性球形化改变仍可使其再次流经脾脏时而被破坏掉。因此，AIHA 既可发生于血管内又可发生于血管外。 2.Coombs 试验又称抗人球蛋白试验，其反应原理是： (1)抗人球蛋白血清中含有抗免疫球蛋白（多为 IgG）及抗补体的抗体，多为 IgM 型。 (2)当抗人球蛋白血清与受检者红细胞在 37℃ 直接作用时，如红细胞表面确实吸附有免疫性抗体 IgG，则可与抗 IgG 的 IgM 结合发生肉眼可见的凝集反应，是为 Coombs 试验直接阳性，表示红细胞已被致敏。 (3)如果用受检者血清处理同血型正常人的红细胞后，再将该红细胞与抗人球蛋白血清相作用而发生肉眼凝集，表明正常人的红细胞上吸附了病人血清中的不完全抗体，是为间接反应阳性。临床意义： (1)温抗体型 AIHA，直接反应阳性，间接反应阴性； (2)新生儿同种免疫溶血病，患儿直接反应阳性，间接反应阴性； (3)由甲基多巴或青霉素类药物所致 AIHA 如为急性溶血则直接反应阴性而间接反应阳性，如为慢性则直接、间接均可阳性； (4)本试验阳性还可见于 SLE、类风湿性关节炎、淋巴瘤及恶性肿瘤等。 3.答：PNH 的病因至今未明，概因某种原因刺激骨髓使之生成异常克隆而产生有膜缺陷的红细胞，该细胞对补体敏感，在低离子强度溶液或酸性环境中均可促使其激活补体而发生溶血。临床常用的体外试验中最敏感的方法是蔗糖水溶血试验，但其特异性差；最可靠的试验是酸溶血试验，特异性强。在 Rous 试验阳性的基础上进行筛查，提高诊断正确率。进行补体溶血敏感试验或用分子生物学方法检查 GPI 锚蛋白及 PIG-A 基因通常用于医学科研。 4.答：正常人血红蛋白绝大部分为 HbA，其珠蛋白肽链组成为 α2β2，其次为 HbA2 （α2δ2），含量最少的是 HbF（α2γ2）。如后两种珠蛋白定量增加则为异常。由于珠蛋白肽链合成速度异常而产生的异常珠蛋白还有：HbH（β4）、Hbbarts（γ4）。由于珠蛋白分子结构异常而产生的异常珠蛋白有 Hbs、HbE、HbC 等。 5.答：HS 及温抗体型 AIHA 病人的血涂片上均可看到球形红细胞，因而二者红细胞渗透脆性试验均为阳性，但还有以下差别① 前者 Coombs 试验直接、间接反应均为阴性，而后者根据不同原因所致溶贫可出现不同类型的阳性结果。② 前者多有家族史，而后者多无家族史。③ 高渗蔗糖冷溶血试验，HS 阳性而 AIHA 为阴性结果。 6．答：衰老红细胞破坏后释放出的血红蛋白在单核-吞噬细胞系统内降解铁、珠蛋白

和胆红素，释放出的铁进入全身铁代谢池供机体重新利用，珠蛋白肽链降解为氨基酸参与氨基酸代谢，胆色素则经肝代谢通过粪和尿排出。三、A型题 1.C2.D3.C4.C5.B6.C7.D8.D9.D10.B 四、X型题 1.ACDE 2.BE 3.ADE 4.CE 5.BE 五、病例分析病例一 1.临床表现贫血、黄疸、肝、脾肿大、网织红细胞增高提示溶血性贫血，可疑血红蛋白尿，应考虑PNI。 2.确定溶血性贫血和血红蛋白尿的检查：间接胆红素测定增高、Rous试验阳性、尿潜血试验阳性、血清结合珠蛋白降低。 3.蔗糖水溶血试验，敏感度高，但特异性差，仅能作为PN阳的过筛试验。酸化血清溶血试验，又称Ham试验。为本病的特异性确诊试验。蛇毒因子溶血试验敏感性比Ham试验强，特异性亦较强。最敏感、最特意的检查是通过流式细胞仪检测红细胞和粒细胞CD5、CD表达的降低程度。 4.本病是一种后天获得性造血干细胞基因突变引起的溶血病。其红细胞对自身补体(C) 敏感性增高，易遭补体攻击、溶解而引起血管内溶血，以血红蛋白尿为主要特征。病例二 1.贫血、黄疸、网织红细胞增高、间接胆红素增高可诊断溶血性贫血。 2.明显肝、脾肿大，溶血部位在血管外。 3.红细胞形态大部分为球形应考虑遗传性球形红细胞增多症，做酸化甘油溶血试验AGLT0 明显缩短，诊断该病。 4.本病为常染色体显性遗传，可做家系调查。 5.应与自身免疫性溶血性贫血鉴别病例三 1.贫血、黄疸、网织红细胞增高、间接胆红素增高可诊断溶血性贫血。 2.明显脾肿大，溶血部位在血管外。尿含铁血黄素试验(+)又支持慢性血管内溶血。 3.从常见病开始考虑：直接抗人球蛋白试验(~)排除自身免疫性溶血性贫血。酸化甘油溶血试验AGLT50>290s排除遗传性球形红细胞增多症。糖水试验(-)，酸溶血试验(-)排除

和胆红素，释放出的铁进入全身铁代谢池供机体重新利用，珠蛋白肽链降解为氨基酸参与氨基酸代谢，胆色素则经肝代谢通过粪和尿排出。三、A 型题 1．C 2．D 3．C 4．C 5．B 6．C 7．D 8．D 9．D 10．B 四、X 型题 1．ACDE 2．BE 3．ADE 4．CE 5．BE 五、病例分析病例一 1．临床表现贫血、黄疸、肝、脾肿大、网织红细胞增高提示溶血性贫血，可疑血红蛋白尿，应考虑 PNH。 2．确定溶血性贫血和血红蛋白尿的检查：间接胆红素测定增高、Rous 试验阳性、尿潜血试验阳性、血清结合珠蛋白降低。 3．蔗糖水溶血试验，敏感度高，但特异性差，仅能作为 PNH 的过筛试验。酸化血清溶血试验，又称 Ham 试验。为本病的特异性确诊试验。蛇毒因子溶血试验敏感性比 Ham 试验强，特异性亦较强。最敏感、最特意的检查是通过流式细胞仪检测红细胞和粒细胞 CD55、CD59 表达的降低程度。 4．本病是一种后天获得性造血干细胞基因突变引起的溶血病。其红细胞对自身补体（C3）敏感性增高，易遭补体攻击、溶解而引起血管内溶血，以血红蛋白尿为主要特征。病例二 1．贫血、黄疸、网织红细胞增高、间接胆红素增高可诊断溶血性贫血。 2．明显肝、脾肿大，溶血部位在血管外。 3．红细胞形态大部分为球形应考虑遗传性球形红细胞增多症，做酸化甘油溶血试验 AGLT50 明显缩短，诊断该病。 4．本病为常染色体显性遗传，可做家系调查。 5．应与自身免疫性溶血性贫血鉴别病例三 1．贫血、黄疸、网织红细胞增高、间接胆红素增高可诊断溶血性贫血。 2．明显脾肿大，溶血部位在血管外。尿含铁血黄素试验(+)又支持慢性血管内溶血。 3．从常见病开始考虑：直接抗人球蛋白试验(-)排除自身免疫性溶血性贫血。酸化甘油溶血试验 AGLT50>290s 排除遗传性球形红细胞增多症。糖水试验(-)，酸溶血试验(-)排除