实验一录像药理学实验操作 【实验目的】 通过观看录像,掌握常用实验动物的特点与用途,同时掌握小白鼠、家兔及大白鼠等常 用实验动物的捉拿、固定、给药及处死方法。 【实验内容】 (一)常用实验动物的特点与用途 1.小鼠(Mous)是实验室最常用的一种动物,便于大量人工繁殖,适用于需要大 量动物的试验,如药物的筛选、药物的毒性试验、半数致死量的测定、药物效价的比较、避 孕药及抗肿瘤药等的试验研究。此外,还用于遗传性疾病、免疫学、微生物学等的研究。 2.大鼠(Rt)目前已成为肿瘤学、药理学、营养学、繁殖学、内分泌学、免疫学 医药、农药毒性等方面的重要实验动物。其主要用途有:①筛选新药及心血管药理研究:② 营养、代谢性疾病研究:③复制肿瘤模型用于抗肿瘤药物的研究:④利用大鼠足跖浮肿法筛 选抗炎药:⑤高级神经活动研究:⑥神经、内分泌研究:⑦用于避孕药、传染病、畸胎学及 遗传学等方面的研究。 3.豚鼠(Guine-pig)又名天竺鼠、荷兰猪、海猪,也是较常用的实验动物。其主 要用途有:①因其对组胺敏感,并以与致敏,故常被选用与平喘药、抗组胺药的研究:又因 其对结核杆菌高度敏感,感染后病变非常类似人的进行性结核病变,故也常用于结核病和抗 结核病药的实验治疗研究。②因其体内不能合成维生素C,对其缺乏非常敏感,故常用于坏 血病的实验研究:③还用于免疫学、微生物学的实验研究。 4.家兔(Rabbit)易饲养且温顺,繁殖率高,是医学研究中广泛采用的动物。主要用 于:①心血管疾病研究,观察药物对家兔心脏、血压、呼吸、胆固醇代谢和动脉粥样硬化的 影响:②眼科研究,如筛选治疗角膜瘢痕的有效药物等:③还用于胚胎学、免疫学、遗传学、 生理学等方面的研究。 5.猫(Ct)猫主要用于神经学、生理学和毒理学等方面的研究。目前,我国实验用 猫都是收购来的,个体差异较大。尚待进行纯化工作,将其优良遗传特征固定下来。主要用 于:①药理学研究,观察药物对呼吸系统、心血管系统的功能效应和药物代谢学的研究,如 常用猫进行冠状窦血流量的测定,观察药物对血压的影响等:②中枢神经系统研究,常用猫 脑室灌注法来研究药物作用部位,还用于观察神经递质等活性物质的释放及去大脑僵直,姿 势反射试验等:③循环功能急性实验研究,用于观察药物对血压的影响等:④在血液病研究 中用猫作白血病和恶病质者血液研究,还用于阿米巴痢疾等的研究。 6.狗(D0g)用狗做实验是从17世纪开始的,作为实验动物还是从20世纪开始的, 近年来已培育出实验专用动物,如小猎兔狗(Beagle)。主要用途有:①实验外科学研究, 如心血管外科、脑外科、断肢再植、器官或组织移植等:②药理血、毒理学研究,如心血管 药理、消化系统药理、药代学研究、新药临床前毒理研究等:③慢性实验研究。如条件反射 实验、高血压、放射病实验、内分泌腺摘除实验等:④营养学实验,如进行性蛋白质营养不 良、家族性骨质疏松、视网膜发育不全、高胆固醇血症、动脉粥样硬化等研究:⑤用于生理 学、病理生理学等基础医学实验研究。 7.猴(Monkey)猴类具有许多生物特征与人类极为相似,在生物医学研究中使用猴 类作做实验最理想。主要用途有:①药理学和毒理学研究,如避孕药研究、镇痛药的成瘾性 实验、药物代谢研究等:②复制疾病模型:③生理学研究,如进行脑功能、血液循环、呼吸 内分泌、生殖、老年生理研究:④传染病、寄生虫感染研究,如脊髓灰质炎、肝炎、麻疹 疟疾等的研究:⑤其他研究,如放射病、行为学、实验肿瘤学、口腔外科学、疫苗研制、器
实验一 录像----药理学实验操作 【实验目的】 通过观看录像,掌握常用实验动物的特点与用途,同时掌握小白鼠、家兔及大白鼠等常 用实验动物的捉拿、固定、给药及处死方法。 【实验内容】 (一)常用实验动物的特点与用途 1.小鼠(Mouse) 是实验室最常用的一种动物,便于大量人工繁殖,适用于需要大 量动物的试验,如药物的筛选、药物的毒性试验、半数致死量的测定、药物效价的比较、避 孕药及抗肿瘤药等的试验研究。此外,还用于遗传性疾病、免疫学、微生物学等的研究。 2.大鼠(Rat) 目前已成为肿瘤学、药理学、营养学、繁殖学、内分泌学、免疫学、 医药、农药毒性等方面的重要实验动物。其主要用途有:①筛选新药及心血管药理研究;② 营养、代谢性疾病研究;③复制肿瘤模型用于抗肿瘤药物的研究;④利用大鼠足跖浮肿法筛 选抗炎药;⑤高级神经活动研究;⑥神经、内分泌研究;⑦用于避孕药、传染病、畸胎学及 遗传学等方面的研究。 3.豚鼠(Guine-pig) 又名天竺鼠、荷兰猪、海猪,也是较常用的实验动物。其主 要用途有:①因其对组胺敏感,并以与致敏,故常被选用与平喘药、抗组胺药的研究;又因 其对结核杆菌高度敏感,感染后病变非常类似人的进行性结核病变,故也常用于结核病和抗 结核病药的实验治疗研究。②因其体内不能合成维生素 C,对其缺乏非常敏感,故常用于坏 血病的实验研究;③还用于免疫学、微生物学的实验研究。 4.家兔(Rabbit) 易饲养且温顺,繁殖率高,是医学研究中广泛采用的动物。主要用 于:①心血管疾病研究,观察药物对家兔心脏、血压、呼吸、胆固醇代谢和动脉粥样硬化的 影响;②眼科研究,如筛选治疗角膜瘢痕的有效药物等;③还用于胚胎学、免疫学、遗传学、 生理学等方面的研究。 5.猫(Cat) 猫主要用于神经学、生理学和毒理学等方面的研究。目前,我国实验用 猫都是收购来的,个体差异较大。尚待进行纯化工作,将其优良遗传特征固定下来。主要用 于:①药理学研究,观察药物对呼吸系统、心血管系统的功能效应和药物代谢学的研究,如 常用猫进行冠状窦血流量的测定,观察药物对血压的影响等;②中枢神经系统研究,常用猫 脑室灌注法来研究药物作用部位,还用于观察神经递质等活性物质的释放及去大脑僵直,姿 势反射试验等;③循环功能急性实验研究,用于观察药物对血压的影响等;④在血液病研究 中用猫作白血病和恶病质者血液研究,还用于阿米巴痢疾等的研究。 6.狗(Dog) 用狗做实验是从 17 世纪开始的,作为实验动物还是从 20 世纪开始的, 近年来已培育出实验专用动物,如小猎兔狗(Beagle)。主要用途有:①实验外科学研究, 如心血管外科、脑外科、断肢再植、器官或组织移植等;②药理血、毒理学研究,如心血管 药理、消化系统药理、药代学研究、新药临床前毒理研究等;③慢性实验研究。如条件反射 实验、高血压、放射病实验、内分泌腺摘除实验等;④营养学实验,如进行性蛋白质营养不 良、家族性骨质疏松、视网膜发育不全、高胆固醇血症、动脉粥样硬化等研究;⑤用于生理 学、病理生理学等基础医学实验研究。 7.猴(Monkey) 猴类具有许多生物特征与人类极为相似,在生物医学研究中使用猴 类作做实验最理想。主要用途有:①药理学和毒理学研究,如避孕药研究、镇痛药的成瘾性 实验、药物代谢研究等;②复制疾病模型;③生理学研究,如进行脑功能、血液循环、呼吸、 内分泌、生殖、老年生理研究;④传染病、寄生虫感染研究,如脊髓灰质炎、肝炎、麻疹、 疟疾等的研究;⑤其他研究,如放射病、行为学、实验肿瘤学、口腔外科学、疫苗研制、器
官移植、遗传代谢性疾病等研究。 8.蟾蜍(Toad)和青蛙Frog 类心脏在离体的情识下,仍可右节奉地辅动很久 因而用于研究心脏的功能及药物 其的影响等。蛙类的 肠肌和坐骨神经可以用来观察外周 神经的生理功能,药物对周围神经、神经肌接头或横纹肌的作用等 。在临床检验工作中还可 用雌蛙作妊娠诊断实验。 (二)常用实验动物的性别鉴别法 使兔早饰卧位,自尾部向前观寥,肛门位于尾基部之前方。门前有滑猪孔 成年雄免的漫殖孔附近可见阴囊。雌免肛门前方有两个相距极近的孔,分别为尿道和阴道口。 此外, 雌兔的腹部尚有五对明显可见的乳头, 2.小鼠和大鼠 者性别鉴别方法相同。雄性者阴囊明显可见,性器官与肛门距离 较远,二者间有毛,雌性者性器官与肛门距离近,界线不清,腹部有乳头明显可见。 (三)常用实验动物的编号 兔等较大的动物可用特制的号码牌固定于耳上。小鼠、大鼠及白色家兔等可用黄 有两 种方法可供选用 1.适合110的编号:将小白鼠背部、腰部、后肢按左、中、右分为九个区,从左到 右标记19号,第10号不作标记。 2.适合10以上的编号:先将小白鼠背部分为前肢、后肢,按左右初步划为4个区, 从左到右标记14号,头部标5号,昆部标10号,背部正中央为20号。6以上的具体记号 方法是:(1)+(5)=6号,(4)+(5)-9号,(10)+(1)+(5)=16号,(10)+(4) )=19号. )号以上的编号方法同10以上。30号=(10)+(20),依此类推 (四)常用实验动物的捉章、固定方法 1.小白鼠:右手抓住鼠尾,放在台上或鼠笼盖铁纱网上,然后用左手拇指及食指沿其 背向前抓住双耳及颈部皮肤,并以左手中指或无名指和堂部夹住鼠尾,固定在手上。另一加 法是仅用左手,先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后,用无名指极小指夹住其尾部,再以拇指及 食指捉住其颈部皮肤。前 法易学 后一法稍鸡 但便于快速捉拿给药 2.大白鼠:将大白鼠放于粗造面上,用右手拉其尾部,左手的将指和食指抓其头部皮 肤及双耳,其余三指与掌部夹住其背腹部皮肤,对于身体特别大火凶狠要咬人的大白鼠,可 先用布巾包裹其身(露出口鼻),然后进行操作 3。家兔:右手抓住家兔预部皮肤,将兔捉起(抓的面积越大,其助重点越分散)。加果 家兔肥大,再以左手托住它的臀部,将吃重点承 在手上 (五)常用实验动物的给药方法 1.灌胃法 ①小白鼠灌胃法:以左手捉拿小白鼠,使腹部朝上,颈部拉直,右手持配有灌胃针头的 注射器,自口角处插入口腔,再从舌面紧沿上颚进入食管。如手法正确,不难成功:若遇阻 力,应退出后再插,不能用强力猛插,以免刺破食管和灌入气管,造成动物死亡 ②家兔灌胃法:需由两个人合作进行 个人取坐位,用两腿夹持兔身,左手握住家免 双耳,固定家兔头部,右手持开口器从口角插入口腔,压在舌面上,并向后翻转几下,使兔 舌伸直。另一人取10号导尿管从开口其中部小孔插入食道。插管时易误入气管,区别方法 主要是谨慎观察插管后动物的反应,插入气管时可引起则烈挣扎和呼吸困难,也可将导尿管 的外端浸入水中,加有气泡吹出,表明插在气管内,此时应拔管重插。当明导管确实插在 食管内以后 取注射器接在导管上,将药液缓慢推入。 再推注少量空气,使导尿 中不致有 药液残留,慢慢拔出导尿管,取出开口器。注意:在插管前一定要检查导尿管是否畅通。 2.注射法 ①皮下注射:小白鼠皮下注射可由两人合作,一人左手抓住小白鼠头部皮肤,右手拉住
官移植、遗传代谢性疾病等研究。 8.蟾蜍(Toad)和青蛙(Frog) 蛙类心脏在离体的情况下,仍可有节奏地搏动很久, 因而用于研究心脏的功能及药物对其的影响等。蛙类的腓肠肌和坐骨神经可以用来观察外周 神经的生理功能,药物对周围神经、神经肌接头或横纹肌的作用等。在临床检验工作中还可 用雌蛙作妊娠诊断实验。 (二)常用实验动物的性别鉴别法 1.兔 使兔呈仰卧位,自尾部向前观察,肛门位于尾基部之前方。门前有泄殖孔。 成年雄兔的泄殖孔附近可见阴囊。雌兔肛门前方有两个相距极近的孔,分别为尿道和阴道口。 此外,雌兔的腹部尚有五对明显可见的乳头。 2.小鼠和大鼠 二者性别鉴别方法相同。雄性者阴囊明显可见,性器官与肛门距离 较远,二者间有毛,雌性者性器官与肛门距离近,界线不清,腹部有乳头明显可见。 (三)常用实验动物的编号 犬、兔等较大的动物可用特制的号码牌固定于耳上。小鼠、大鼠及白色家兔等可用黄 色苦味酸涂于毛上标号。有两种方法可供选用: 1.适合 1~10 的编号:将小白鼠背部、腰部、后肢按左、中、右分为九个区,从左到 右标记 1~9 号,第 10 号不作标记。 2.适合 10 以上的编号:先将小白鼠背部分为前肢、后肢,按左右初步划为 4 个区, 从左到右标记 1~4 号,头部标 5 号,尾部标 10 号,背部正中央为 20 号。6 以上的具体记号 方法是:(1)+(5)=6 号,(4)+(5)=9 号,(10)+(1)+(5)=16 号,(10)+(4)+ (5)=19 号……20 号以上的编号方法同 10 以上。30 号=(10)+(20),依此类推。 (四)常用实验动物的捉拿、固定方法 1.小白鼠:右手抓住鼠尾,放在台上或鼠笼盖铁纱网上,然后用左手拇指及食指沿其 背向前抓住双耳及颈部皮肤,并以左手中指或无名指和掌部夹住鼠尾,固定在手上。另一抓 法是仅用左手,先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后,用无名指极小指夹住其尾部,再以拇指及 食指捉住其颈部皮肤。前一法易学,后一法稍难,但便于快速捉拿给药。 2.大白鼠:将大白鼠放于粗造面上,用右手拉其尾部,左手的拇指和食指抓其头部皮 肤及双耳,其余三指与掌部夹住其背腹部皮肤,对于身体特别大火凶狠要咬人的大白鼠,可 先用布巾包裹其身(露出口鼻),然后进行操作。 3.家兔:右手抓住家兔颈部皮肤,将兔捉起(抓的面积越大,其吃重点越分散),如果 家兔肥大,再以左手托住它的臀部,将吃重点承托在手上。 (五)常用实验动物的给药方法 1.灌胃法 ① 小白鼠灌胃法:以左手捉拿小白鼠,使腹部朝上,颈部拉直,右手持配有灌胃针头的 注射器,自口角处插入口腔,再从舌面紧沿上颚进入食管。如手法正确,不难成功;若遇阻 力,应退出后再插,不能用强力猛插,以免刺破食管和灌入气管,造成动物死亡。 ② 家兔灌胃法:需由两个人合作进行。一个人取坐位,用两腿夹持兔身,左手握住家兔 双耳,固定家兔头部,右手持开口器从口角插入口腔,压在舌面上,并向后翻转几下,使兔 舌伸直。另一人取 10 号导尿管从开口其中部小孔插入食道。插管时易误入气管,区别方法 主要是谨慎观察插管后动物的反应,插入气管时可引起剧烈挣扎和呼吸困难,也可将导尿管 的外端浸入水中,如有气泡吹出,表明插在气管内,此时应拔管重插。当判明导管确实插在 食管内以后,取注射器接在导管上,将药液缓慢推入,再推注少量空气,使导尿管中不致有 药液残留,慢慢拔出导尿管,取出开口器。注意:在插管前一定要检查导尿管是否畅通。 2.注射法 ① 皮下注射:小白鼠皮下注射可由两人合作,一人左手抓住小白鼠头部皮肤,右手拉住
鼠尾。另一人左手捏起背部皮肤,右手持注射器,将针头刺入背部皮下,如由一人操作,可 将小白鼠置于铁丝网上,左手抓小白鼠,以拇指和食指捏起背部皮肤, 右手持注射器刺入背 部皮下。其他动物皮下注射的部位均在背部皮下 大动物皮下注射时需固定。为避免药液外 溢,进针时要快速,退针时要将针旋转几周后再退 ②腹腔注射:小白鼠腹腔注射是以左手抓小白鼠(方法同灌胃),右手持注射器,取约 45角将针头从下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜太高,刺入不能太深,以免伤及内脏。 ③肌肉注射:肌肉注射部位一般多取后肢大腿外侧肌肉处,将动物固定,左手抓住大腿 右手持注射器 针头与皮肤表面垂直刺入肌肉(小动物斜刺),回抽无血 即可注药。 ④静脉注别 a小白鼠尾静脉注射 小白鼠尾部静脉注射可将小白鼠置特定固定筒内,使鼠尾外露,用酒精或二甲苯棉球涂 擦尾部,或将鼠尾在4050℃热水中浸泡半分钟,使血管扩张。用右手拉住鼠尾尖,选择一 条扩张最明显的静脉,右手持注射器,将针头刺入血管, 推入药液,如推注时有阻力,且局 部变白表明针头没有刺入血管,应拔针后重新穿刺,。穿刺血管时宜从鼠尾末端开始,以便 失败后可在第一次穿刺点的上方重新开始。 b.家免耳缘静脉注射 如两人合作,一人固定兔身,如一人操作,则用兔固定箱。选用耳缘静脉,剪去相毛 用手指轻弹耳壁,使血管扩张,以手指于一耳缘根部压住耳缘静脉,待血管明显充血以后 取抽好药液的 射器 从静脉近末端处插入血管,如见到针头 血管内 使以手指将针头 兔耳固定,不让针头滑动。放开耳根静脉手指压力,即可注入药液。如果注射进入血管内则 畅通无阻,并可见到血液被药液冲走:如注射在皮下,则耳壁肿胀。当注射完毕,立即用干 棉球按在针眼上,即可将针拔下,并继续按压片刻,以防出血。 (六)常用实验动物的处死方法 椎脱白法:用镊子或手压住小鼠的头后部,另一只手拉住尾巴,用力稍向后上方 拉,使之颈椎脱白,瞬间死亡。小鼠或大鼠均可用此法处死 2.空气栓塞法:用注射器将空气急速注入静脉(耳静脉、尾静脉、眶静脉等),可迅速 使动物死亡。小鼠可注入0.3ml0.5ml,兔和猫注入10-20ml,犬可注入70-150ml。 3,大景放血法:鼠可采用眼匡动、静脉大量放血致死。猫与猴等在麻碎状态下,暴罗 出动物的颈动脉在两端用止血钳夹住,插入套管,然后放松心脏侧的钳子,轻轻压迫胸部 尽可能大量放血致死 【实验小结】 本次试验要求掌握常用实验动物小白鼠的捉拿、固定以及最常用的给药方法(如肌注、 皮下注射、腹腔注射及静脉注射等)。此外,注射器的使用常识亦是本实验内容,纠正学生 在实哈中的不正确操作手法
鼠尾。另一人左手捏起背部皮肤,右手持注射器,将针头刺入背部皮下,如由一人操作,可 将小白鼠置于铁丝网上,左手抓小白鼠,以拇指和食指捏起背部皮肤,右手持注射器刺入背 部皮下。其他动物皮下注射的部位均在背部皮下,大动物皮下注射时需固定。为避免药液外 溢,进针时要快速,退针时要将针旋转几周后再退出。 ② 腹腔注射:小白鼠腹腔注射是以左手抓小白鼠(方法同灌胃),右手持注射器,取约 45。角将针头从下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜太高,刺入不能太深,以免伤及内脏。 ③ 肌肉注射:肌肉注射部位一般多取后肢大腿外侧肌肉处,将动物固定,左手抓住大腿, 右手持注射器,针头与皮肤表面垂直刺入肌肉(小动物斜刺),回抽无血,即可注药。 ④ 静脉注射 a. 小白鼠尾静脉注射 小白鼠尾部静脉注射可将小白鼠置特定固定筒内,使鼠尾外露,用酒精或二甲苯棉球涂 擦尾部,或将鼠尾在 40~50℃热水中浸泡半分钟,使血管扩张。用右手拉住鼠尾尖,选择一 条扩张最明显的静脉,右手持注射器,将针头刺入血管,推入药液,如推注时有阻力,且局 部变白表明针头没有刺入血管,应拔针后重新穿刺,。穿刺血管时宜从鼠尾末端开始,以便 失败后可在第一次穿刺点的上方重新开始。 b. 家兔耳缘静脉注射 如两人合作,一人固定兔身,如一人操作,则用兔固定箱。选用耳缘静脉,剪去粗毛, 用手指轻弹耳壁,使血管扩张,以手指于一耳缘根部压住耳缘静脉,待血管明显充血以后, 取抽好药液的注射器,从静脉近末端处插入血管,如见到针头在血管内,便以手指将针头、 兔耳固定,不让针头滑动。放开耳根静脉手指压力,即可注入药液。如果注射进入血管内则 畅通无阻,并可见到血液被药液冲走;如注射在皮下,则耳壁肿胀。当注射完毕,立即用干 棉球按在针眼上,即可将针拔下,并继续按压片刻,以防出血。 (六)常用实验动物的处死方法 1.颈椎脱臼法:用镊子或手压住小鼠的头后部,另一只手拉住尾巴,用力稍向后上方 拉,使之颈椎脱臼,瞬间死亡。小鼠或大鼠均可用此法处死。 2.空气栓塞法:用注射器将空气急速注入静脉(耳静脉、尾静脉、眶静脉等),可迅速 使动物死亡。小鼠可注入 0.3ml~0.5ml,兔和猫注入 10~20ml,犬可注入 70~150ml。 3.大量放血法:鼠可采用眼眶动、静脉大量放血致死。猫与猴等在麻醉状态下,暴露 出动物的颈动脉在两端用止血钳夹住,插入套管,然后放松心脏侧的钳子,轻轻压迫胸部, 尽可能大量放血致死。 【实验小结】 本次试验要求掌握常用实验动物小白鼠的捉拿、固定以及最常用的给药方法(如肌注、 皮下注射、腹腔注射及静脉注射等)。此外,注射器的使用常识亦是本实验内容,纠正学生 在实验中的不正确操作手法