《水产动物疾病学》实验教学大纲 实验课程号：2037B0 2.课程属性：必修 3.实验属性：非独立设课 4.实验应开学期：春季 5.先修课程：鱼类生理学、生物学、鱼类学、水产微生物学、水生生物学、水化学、水 产动物营养与饲料学、生物统计学、鱼类增养殖学，等 一、课程的性质与任务 本课程是水产养殖专业必修的主干专业课之一。本课程的主要任务是对水产动物疾病的相 关基础理论和对当前养殖生产危害严重而迫切需要解决的各种疾病进行讨论。使学生掌握 疾病的发病原因、病理机制、流行和消长规律以及诊断和防治的基本理论和基本方法，提 高学生综合应用所学基础蜘识的能力，掌握一些基本的研究和实际操作技能，为今后从事 实际工作打下良好基础。 二、实验的目的与基本要求 本课程共有20学时的实验教学，设置了7个验证性实验和1周综合性大实验，学生通过 实验课程的学习来增强对理论课程的感性认识和提高动手操作能力。实验课的教学主要以 学生自己动手为主，在实验开始时教师以10~15分钟的时间对实验要点进行讲解，实验材 料尽量使用新鲜材料，对于一些不能随时得到的病原标本则以固定材料作补充。 三、实验考核方式及办法 考核方式：考查；实验成绩评分办法或标准。 四、实验项目一览表 实验内容 学时 实验一水产动物疾病的常规检查与诊断方法 实验二常用水产药物观察及给药方法操作 实验三细菌、真菌、藻类性鱼病的病变标本及病原体的观察 实验四鞭毛虫、孢子虫病及病原体的观察 实验五纤毛虫病及其病原体的观察
《水产动物疾病学》实验教学大纲 ．实验课程号：2037B0 2．课程属性： 必修 3．实验属性：非独立设课 4．实验应开学期：春季 5．先修课程：鱼类生理学、生物学、鱼类学、水产微生物学、水生生物学、水化学、水 产动物营养与饲料学、生物统计学、鱼类增养殖学，等 一、课程的性质与任务 本课程是水产养殖专业必修的主干专业课之一。本课程的主要任务是对水产动物疾病的相 关基础理论和对当前养殖生产危害严重而迫切需要解决的各种疾病进行讨论。使学生掌握 疾病的发病原因、病理机制、流行和消长规律以及诊断和防治的基本理论和基本方法，提 高学生综合应用所学基础知识的能力，掌握一些基本的研究和实际操作技能，为今后从事 实际工作打下良好基础。 二、实验的目的与基本要求 本课程共有 20 学时的实验教学，设置了 7 个验证性实验和 1 周综合性大实验，学生通过 实验课程的学习来增强对理论课程的感性认识和提高动手操作能力。实验课的教学主要以 学生自己动手为主，在实验开始时教师以10~15 分钟的时间对实验要点进行讲解，实验材 料尽量使用新鲜材料，对于一些不能随时得到的病原标本则以固定材料作补充。 三、实验考核方式及办法 考核方式：考查；实验成绩评分办法或标准。 四、实验项目一览表 实 验 内 容 学 时 实验一水产动物疾病的常规检查与诊断方法 实验二常用水产药物观察及给药方法操作 实验三细菌、真菌、藻类性鱼病的病变标本及病原体的观察 实验四 鞭毛虫、孢子虫病及病原体的观察 实验五 纤毛虫病及其病原体的观察 3 3 3 3 3 3
实验六蠕虫性疾病及其病原体观察 实验七甲壳动物性疾病及其病原体观察 实验八鱼类细菌性病原的分离鉴定及其疫苗制备（选做） 合计 五、实验项目的具体内容： 实验一疾病常规检查方法与诊断 1.实验的目的和要求： 通过对本实验课的学习，了解常规的肉眼检查和解剖镜、显微镜检查疾病的方法，对检查 结果进行分析、比较，做出疾病诊断。 2.实验内容 病鱼检查：肉眼检查，显微镜检查，解剖镜检查 3.需用的仪器或试剂 病鱼应是活的或刚死的。解剖镜，显微镜，解剖工具，生理盐水。 4.实验步骤： (1)体外检查 (2)体内检查 (3)检查顺序 1.体表粘液；2.鳍；3.鼻腔；4.鳃；5.血液；6.口腔；7.体腔；8.脂肪组织： 9.肠道：10.肝、脾、胆囊、心脏、鳔、肾、膀胱、性腺、眼、脑、骨髓、肌肉，等 应先用肉眼检查，以后用压片法进行镜检，并固定和保存标本。 5.病鱼检查诊断原则： 先肉眼后镜检先外后内先腔后实 6.检查时应注意事项 a.具有典型症状的活鱼或刚死的鱼。 b.鱼病检查诊断原则：先肉眼后镜检、先外后内、先腔后实。 c.检查的鱼体，解剖所取出的内器官，必须保持湿润。 d.检查时要按顺序进行，小心操作。解剖过程中应保持器官的完整，避免混淆和污染，影 响诊断的正确性
实验六 蠕虫性疾病及其病原体观察 实验七 甲壳动物性疾病及其病原体观察 实验八 鱼类细菌性病原的分离鉴定及其疫苗制备（选做） 合 计 2 20 五、实验项目的具体内容： 实验一疾病常规检查方法与诊断 1．实验的目的和要求： 通过对本实验课的学习，了解常规的肉眼检查和解剖镜、显微镜检查疾病的方法，对检查 结果进行分析、比较，做出疾病诊断。 2．实验内容： 病鱼检查：肉眼检查，显微镜检查，解剖镜检查 3．需用的仪器或试剂： 病鱼应是活的或刚死的。解剖镜，显微镜，解剖工具，生理盐水。 4．实验步骤： （1）体外检查 （2）体内检查 （3）检查顺序 1．体表粘液；2.鳍；3.鼻腔；4．鳃；5．血液；6．口腔；7．体腔； 8．脂肪组织； 9．肠道；10．肝、脾、胆囊、心脏、鳔、肾、膀胱、性腺、眼、脑、骨髓、肌肉，等， 应先用肉眼检查，以后用压片法进行镜检，并固定和保存标本。 5. 病鱼检查诊断原则： 先肉眼后镜检先外后内先腔后实 6. 检查时应注意事项： a. 具有典型症状的活鱼或刚死的鱼。 b. 鱼病检查诊断原则：先肉眼后镜检、先外后内、先腔后实。 c. 检查的鱼体，解剖所取出的内器官，必须保持湿润。 d. 检查时要按顺序进行，小心操作。解剖过程中应保持器官的完整，避免混淆和污染，影 响诊断的正确性
e.为了防止通过器械污染，每一器官接触的用具须洗净后，再使用。 f一时不能诊断的病象，要注意保留标本。 实验二常用水产药物观察及给药方法操作 1.实验的目的和要求： 识别和掌握常用鱼药的主要特征和基本性能。掌握防治鱼病的给药方法，即药浴法和注射 法。 2.实验内容： 常用鱼药识别；给药方法操作 3,实验材料、仪器或试剂： 鱼种；漂白粉、漂白精、二氯异氰尿酸钠（优氯净）、三氯异氰尿酸、硫酸铜、硫酸亚 铁、高锰酸钾、生石灰、食盐、呋喃唑酮、呋喃西林、磺胺六甲氧嘧啶、磺胺甲基嘧啶、 磺胺-5,6-二甲氧嘧啶、硫酸链霉素、土需素、氯霉素、碘、敌百虫、新洁尔灭、福尔马 林、孔雀石绿、亚甲基兰、大黄、五倍子等及其它各种剂型配方的鱼药。 用具：脸盆、药物天平、量筒(100.1000ml)培养皿、烧杯、玻璃棒、注射器、针头(6 号)、药勺、pH试纸、棉花、纱布等。 4.实验步骤 a.识别常见鱼药： b.给药方法-药浴法和注射法的操作。 实验三细菌性、真菌性、藻类性鱼病的病变标本及其病原体的观察 1.实验目的与要求 通过对细菌性、真菌性、藻类性鱼病的病变标本和病原体的观察，掌握病变症状和病原体 的形态特征，为今后诊断传染性鱼病打下基础。 2.实验内容：病变标本观察；病原体的观察 3.实验材料、用具、药品 用具与药品： 显微镜解剖镜小镊子小剪刀解剖针凹玻片盖玻片酒精灯吸管火柴 载玻片草酸铵结晶紫液革兰氏碘液番红液95%酒精0.85%生理盐水蒸馏水 实验材料 .烂鳃病、肠炎病、赤皮病、肤霉病、鳃霉病、嗜酸卵甲藻等鱼类病变标本
e. 为了防止通过器械污染，每一器官接触的用具须洗净后，再使用。 f. 一时不能诊断的病象，要注意保留标本。 实验二常用水产药物观察及给药方法操作 1．实验的目的和要求： 识别和掌握常用鱼药的主要特征和基本性能。掌握防治鱼病的给药方法，即药浴法和注射 法。 2．实验内容： 常用鱼药识别；给药方法操作。 3．实验材料、仪器或试剂： 鱼种；漂白粉、漂白精、二氯异氰尿酸钠（优氯净）、三氯异氰尿酸、硫酸铜、硫酸亚 铁、高锰酸钾、生石灰、食盐、呋喃唑酮、呋喃西林、磺胺六甲氧嘧啶、磺胺甲基嘧啶、 磺胺-5，6-二甲氧嘧啶、硫酸链霉素、土霉素、氯霉素、碘、敌百虫、新洁尔灭、福尔马 林、孔雀石绿、亚甲基兰、大黄、五倍子等及其它各种剂型配方的鱼药。 用具：脸盆、药物天平、量筒（100.1000ml）培养皿、烧杯、玻璃棒、注射器、针头（6 号）、药勺、pH 试纸、棉花、纱布等。 4．实验步骤： a. 识别常见鱼药; b. 给药方法--药浴法和注射法的操作。 实验三 细菌性、真菌性、藻类性鱼病的病变标本及其病原体的观察 1.实验目的与要求 通过对细菌性、真菌性、藻类性鱼病的病变标本和病原体的观察，掌握病变症状和病原体 的形态特征，为今后诊断传染性鱼病打下基础。 2.实验内容:病变标本观察；病原体的观察 3.实验材料、用具、药品 用具与药品： 显微镜解剖镜 小镊子小剪刀解剖针 凹玻片盖玻片酒精灯 吸管火柴 载玻片草酸铵结晶紫液革兰氏碘液番红液95％酒精0 . 85％生理盐水蒸馏水 实验材料： a. 烂鳃病、肠炎病、赤皮病、肤霉病、鳃霉病、嗜酸卵甲藻等鱼类病变标本
b.水霉、鳃霉活体或固定标本。 c烂鳃、肠炎、赤皮等病原细菌活体或其他标本 d.嗜酸卵甲藻标本。 4.实验步骤 (1)病变标本观察： a.烂鳃病观察； b.肠炎病变观察 c.赤皮病的观察（又称出血性腐败病和赤皮瘟）： d.肤霉病： e.鳃霉病； í嗜酸卵甲藻病变标本和病原体的观察卵甲藻病（又称打粉病）： (2)病原体的观察 a.烂鳃病的病原体柱状屈桡杆菌； b.固定染色观察； c观察肤霉和鳃霉。 实验四鞭毛虫、孢子虫病及其病原体的观察 1.实验目的与要求： 观察鞭毛虫病、孢子虫病的病变标本及常见的鞭毛虫、孢子虫的形态。 2.实验内容：病变标本观察；病原体的观察 3实验材料、药物、用具： 药物与用具：香柏油二甲苯碘液甘油酒精显微镜镊子载玻片盖玻片吸管 材料 患孢子虫病的病变标本、艾美虫、粘孢子虫、微孢子虫的固定或活体标本。 黄鳝；草鱼种；鲢鱼种；鲤鱼 4.实验内容与步骤 a.艾美虫病 b.粘孢子虫病
b. 水霉、鳃霉活体或固定标本。 c. 烂鳃、肠炎、赤皮等病原细菌活体或其他标本。 d. 嗜酸卵甲藻标本。 4．实验步骤 （1）病变标本观察： a. 烂鳃病观察； b. 肠炎病变观察； c. 赤皮病的观察（又称出血性腐败病和赤皮瘟）； d. 肤霉病； e. 鳃霉病； f. 嗜酸卵甲藻病变标本和病原体的观察卵甲藻病（又称打粉病）： （2）病原体的观察： a. 烂鳃病的病原体柱状屈桡杆菌； b. 固定染色观察； c. 观察肤霉和鳃霉。 实验四 鞭毛虫、孢子虫病及其病原体的观察 1.实验目的与要求： 观察鞭毛虫病、孢子虫病的病变标本及常见的鞭毛虫、孢子虫的形态。 2.实验内容:病变标本观察；病原体的观察 3.实验材料、药物、用具： 药物与用具：香柏油二甲苯碘液甘油酒精显微镜镊子载玻片 盖玻片吸管 材料： 患孢子虫病的病变标本、艾美虫、粘孢子虫、微孢子虫的固定或活体标本。 黄鳝；草鱼种；鲢鱼种；鲤鱼 4.实验内容与步骤： a. 艾美虫病： b. 粘孢子虫病：
二极虫(Myxidium): 四极虫(Chloromyxum): 单极虫(Thelohanellus): c孢子虫的检查： d.鞭毛虫的观察； 实验五纤毛虫病及其病原体的观察 1.实验目的与要求 识别寄生在鱼体上的各种纤毛虫如：车轮虫、小瓜子虫、斜管虫、半眉虫、肠袋虫、杯体 虫以及吸管虫类的毛管虫的形态构造。 2.实验内容：病变标本观察；病原体的观察 3.实验材料、药物、用具 药物与用具：生理盐水香柏油二甲苯显微镜解剖镜解剖剪弯头镊子尖头镊子盖玻片载 玻片烧杯小吸管纱布擦镜纸 材料：车轮虫、小瓜子虫、斜管虫、半眉虫、肠袋虫、杯体虫、毛管虫等的固定标本或活 体标本。 草鱼（含鱼种）；鲢鱼；鲤鱼；等。 4.实验步骤 a.车轮虫(Trichodina); b.小瓜子虫(Ichfhyophthirius Multifilis); c,斜管虫(Chilodonelia); d.半眉虫(Hemiophrys)i f鲩肠袋虫(Balantidium ctenopharyngodoi); g.筒形杯形虫(Apiosoma cylindriformis): h.中华毛管虫(Trichophyryasinensis)。 实验六蠕虫病及其病原体的观察 1.实验目的与要求： 观察吸虫在鱼体的寄生状况及虫体的形态与主要构造 2实验内容：病变标本观察；病原体的观察
二极虫（Myxidium ）： 四极虫（Chloromyxum）： 单极虫（Thelohanellus ）： c. 孢子虫的检查； d. 鞭毛虫的观察； 实验五 纤毛虫病及其病原体的观察 1.实验目的与要求： 识别寄生在鱼体上的各种纤毛虫如：车轮虫、小瓜子虫、斜管虫、半眉虫、肠袋虫、杯体 虫以及吸管虫类的毛管虫的形态构造。 2.实验内容:病变标本观察；病原体的观察 3.实验材料、药物、用具： 药物与用具：生理盐水香柏油二甲苯显微镜解剖镜解剖剪弯头镊子尖头镊子盖玻片 载 玻片 烧杯 小吸管纱布 擦镜纸 材料：车轮虫、小瓜子虫、斜管虫、半眉虫、肠袋虫、杯体虫、毛管虫等的固定标本或活 体标本。 草鱼（含鱼种）；鲢鱼；鲤鱼；等。 4.实验步骤： a. 车轮虫（Trichodina ）； b. 小瓜子虫（Ichfhyophthirius Multifiliis）； c. 斜管虫（Chilodonelia ）； d. 半眉虫（Hemiophrys） ； f. 鲩肠袋虫（Balantidiumctenopharyngodoi）； g. 筒形杯形虫（Apiosoma cylindriformis ）； h. 中华毛管虫（Trichophyrya sinensis）。 实验六 蠕虫病及其病原体的观察 1.实验目的与要求： 观察吸虫在鱼体的寄生状况及虫体的形态与主要构造 2.实验内容:病变标本观察；病原体的观察
3.实验材料、药物、用具： 药物与用具：解剖针解剖盘剪刀镊子（弯、直头各一把）载玻片盖玻片吸管培养皿烧 杯小吸管纱布擦镜纸显微镜解剖镜聚乙烯醇甘油酒精生理盐水。 材料：(1)寄生虫：指环虫(Dactylogyrus);三代虫(Gyroclactylus);双身虫 (Diplozcon);盾腹吸虫；双穴吸虫；扁弯口吸虫；道佛吸虫；线虫；缘虫；棘头虫的固 定标本或活体标本。 (2)材料鱼：草鱼；黄颡鱼；鲤鱼；鲶鱼；黄鳝；等。 4.实验步骤 a.肉眼观察线虫及病鱼标本； b.肉眼观察缘虫、棘头虫及病鱼标本； ℃显微镜或解剖镜观察：指环虫；三代虫；双身虫；盾腹吸虫/双穴吸虫/扁弯口吸虫/道 佛吸虫；线虫；绦虫；棘头虫等寄生虫。 实验七甲壳动物性疾病及其病原体观察 1.实验目的与要求： 观察锚头鳋、中华鳋、鱼鲺、鱼怪等寄生在鱼体情况，以及虫体的外形于主要构造。 2.实验内容：病变标本观察；病原体的观察 3.实验材料、药物、用具 实验用具：显微镜解剖镜解剖剪解剖针弯头镊子尖头镊子盖玻片载玻片小烧杯小吸 管纱布擦镜纸 实验材料：锚头鳋，中华鳋，鱼鲺鱼怪 4.实验步骤： a.病鱼整体标本的观察 b.显微镜/解剖镜观察：锚头鳋(Lernaea);中华鳋(Sinergsilus);鳗（Argnlus);鱼 怪((Ichthyoxerus)。 实验八病原菌的分离鉴定及其疫苗的制备 1.实验目的与要求 熟悉水产细菌性病原的分离、培养、纯化与鉴定的基本方法，了解所分离细菌性病原的形 态特征及培养特点，了解细菌性灭活疫苗制备的基本过程。 2.实验内容：病原菌的分离与鉴定；疫苗制备
3.实验材料、药物、用具： 药物与用具：解剖针解剖盘剪刀镊子（弯、直头各一把）载玻片盖玻片吸管培养皿 烧 杯 小吸管纱布 擦镜纸显微镜 解剖镜聚乙烯醇甘油酒精生理盐水。 材料：（1）寄生虫：指环虫（Dactylogyrus）；三代虫（Gyroclactylus）；双身虫 （ Diplozcon）；盾腹吸虫；双穴吸虫；扁弯口吸虫；道佛吸虫；线虫；绦虫；棘头虫的固 定标本或活体标本。 （2）材料鱼：草鱼；黄颡鱼；鲤鱼；鲶鱼；黄鳝；等。 4.实验步骤： a. 肉眼观察线虫及病鱼标本； b. 肉眼观察绦虫、棘头虫及病鱼标本； c. 显微镜或解剖镜观察：指环虫；三代虫；双身虫；盾腹吸虫/双穴吸虫/扁弯口吸虫/道 佛吸虫；线虫；绦虫；棘头虫等寄生虫。 实验七 甲壳动物性疾病及其病原体观察 1.实验目的与要求： 观察锚头鳋、中华鳋、鱼鲺、鱼怪等寄生在鱼体情况，以及虫体的外形于主要构造。 2.实验内容:病变标本观察；病原体的观察 3.实验材料、药物、用具： 实验用具：显微镜解剖镜解剖剪解剖针弯头镊子尖头镊子盖玻片载玻片小烧杯 小吸 管 纱布 擦镜纸 实验材料：锚头鳋,中华鳋,鱼鲺,鱼怪 4.实验步骤： a. 病鱼整体标本的观察； b. 显微镜/解剖镜观察：锚头鳋（Lernaea ）；中华鳋（Sinergsilus ）； 鲺 （ Argnlus）； 鱼 怪（ Ichthyoxerus）。 实验八 病原菌的分离鉴定及其疫苗的制备 1.实验目的与要求： 熟悉水产细菌性病原的分离、培养、纯化与鉴定的基本方法，了解所分离细菌性病原的形 态特征及培养特点，了解细菌性灭活疫苗制备的基本过程。 2.实验内容:病原菌的分离与鉴定；疫苗制备
3.实验材料、药物、用具： 药物与用具：2216E琼脂平板、2216E琼脂斜面、福尔马林、无菌蒸馏水、生理盐水、磷 酸缓冲液、接种环、解剖刀、剪刀、镊子、滴管、纱布、白瓷盘、酒精棉球、灭菌试 管、96孔板、注射器、酒精灯、离心机（包括离心管）、水族箱、记号笔。 材料：患细菌性疾病的水产动物 4.实验步骤： (一)病原菌的分离与鉴定 A.培养基的制备 (1)普通肉汤培养基： (2)普通营养琼脂培养基 B.病原菌的分离与培养 C,病原菌的鉴定 (二)疫苗制备 a.病原菌的扩大培养与分离 b.灭活 c安全性检测 d效果检测 (三)致病菌的人工感染 “水产动物疾病学”综合实验大纲 1.目的与要求 使学生系统掌握水产动物防病、治病的知识和技术，在课堂讲授或实验中一些实践性 较强， 而完成时间又长的内容原则上安排在综合实验即教学实习中进行。 2.实验内容： ①.水产动物疾病诊断技术：包括现场调查和镜检病原体 ②.池塘防治水产动物疾病给药方法现场操作； ③.鱼用中草药的野外采集、识别、标本制作；
3.实验材料、药物、用具： 药物与用具：2216E琼脂平板、2216E琼脂斜面、福尔马林、无菌蒸馏水、生理盐水、磷 酸缓冲液、接种环、解剖刀、剪刀、镊子、滴管、纱布、白瓷盘、酒精棉球、灭菌试 管、 96孔板、注射器、酒精灯、离心机（包括离心管）、水族箱、记号笔。 材料：患细菌性疾病的水产动物 4.实验步骤： （一）病原菌的分离与鉴定 A. 培养基的制备 （1）普通肉汤培养基： （2）普通营养琼脂培养基 B. 病原菌的分离与培养 C．病原菌的鉴定 （二）疫苗制备 a. 病原菌的扩大培养与分离 b. 灭活 c. 安全性检测 d. 效果检测 （三）致病菌的人工感染 “水产动物疾病学”综合实验大纲 1.目的与要求 使学生系统掌握水产动物防病、治病的知识和技术，在课堂讲授或实验中一些实践性 较强， 而完成时间又长的内容原则上安排在综合实验即教学实习中进行。 2.实验内容： ①. 水产动物疾病诊断技术：包括现场调查和镜检病原体； ②. 池塘防治水产动物疾病给药方法现场操作； ③. 鱼用中草药的野外采集、识别、标本制作；
④.病鱼、病原体标本收集、固定、保存及病原体染色制片技术操作。 3.教学方式 先教师讲解演示，然后学生动手操作。 4.考核要求： ①.写一份详细的实验报告】 ②.现场操作水产动物疾病防治给药方法 ③.显微镜或解剖镜下辨别病原体 ④.中草药识别： ⑤.交所染寄生虫切片标本；
④. 病鱼、病原体标本收集、固定、保存及病原体染色制片技术操作。 3.教学方式： 先教师讲解演示，然后学生动手操作。 4.考核要求： ①. 写一份详细的实验报告； ②. 现场操作水产动物疾病防治给药方法； ③. 显微镜或解剖镜下辨别病原体； ④. 中草药识别； ⑤. 交所染寄生虫切片标本；