Zhe ji ang University Press http://www.zjupress.com 药物分析 mma0e0aa06%° 姚彤炜 2021/1229 第2章第4,5,6节-光谱、色谱鉴别法,影响鉴别试验的因素
药物分析 pharmaceutical analysis 姚彤炜 2021/12/29 第2章第4，5，6节-光谱、色谱鉴别法，影响鉴别试验的因素 1
第2章药物的鉴别试验(3) 主要内容 1.概述 2.性状 3.化学鉴别法 4.光谱鉴别法 5.色谱鉴别法 6.影响鉴别试验的因素 2021/1229 第2章第4,5,6节-光谱、色谱鉴别法,影响鉴别试验的因素
2021/12/29 2 第2章 药物的鉴别试验(3) 1. 概述 2. 性状 3. 化学鉴别法 4. 光谱鉴别法 5. 色谱鉴别法 6. 影响鉴别试验的因素 主要内容 第2章第4，5，6节-光谱、色谱鉴别法，影响鉴别试验的因素
·本章学习要求 掌握: 典型化学法要外光谱法、红外光谱法和色谱 法鉴别药物的原理和应用 熟悉: 药物的溶解度、晶型、重要的物理常数的定义 及测定方法;影响鉴别试验的因素鉴别试验 的专属性和灵敏度的意文与考察方法 了解: 药物的其它鉴别方法 2021/1229 第2章第4,5,6节-光谱、色谱鉴别法,影响鉴别试验的因素
本章学习要求 掌握： 典型化学法、紫外光谱法、红外光谱法和色谱 法鉴别药物的原理和应用 熟悉： 药物的溶解度、晶型、重要的物理常数的定义 及测定方法；影响鉴别试验的因素；鉴别试验 的专属性和灵敏度的意义与考察方法 了解： 药物的其它鉴别方法 2021/12/29 第2章第4，5，6节-光谱、色谱鉴别法，影响鉴别试验的因素 3
4.光谱鉴别法 4.1紫外可见光谱法吸 峰 入 末端 max min 受入-A 光度A 入-吸收系数 肩 峰 COA1/A2 化学处理后测定产物 的光谱特性 入nm 对于一个药物多个吸收峰的峰值相差较大时,采用单 浓度不易观察到全部吸收哞,可采用两种浓度的供 试液分别测定其最大吸收波长 2021/12/29 第2章第4,5,6节-光谱、色谱鉴别法,影响鉴别试验的因素
2021/12/29 4 4.光谱鉴别法 4.1紫外-可见光谱法 max，min -A -吸收系数 A1 / A2 化学处理后测定产物 的光谱特性 对于一个药物多个吸收峰的峰值相差较大时，采用单 一浓度不易观察到全部吸收峰，可采用两种浓度的供 试液分别测定其最大吸收波长 峰 峰 峰 谷 谷 谷 肩 末 端 nm 吸 光 度 A 第2章第4，5，6节-光谱、色谱鉴别法，影响鉴别试验的因素
·应用举例 ⑧硝西泮鉴别:取本品的无水乙醇溶液测定,λmax 220nm、260mm与310mm;A20A310=1.45~1.65 ③盐酸普罗帕酮鉴别:取本品的无水乙醇溶液测定, 入max210nm、248nm与304nm ③苯妥英钠鉴别:用高锰酸钾氧化,正庚烷提取后 测定,λmax248nm ③氯贝丁酯鉴别:取本品无水乙醇溶液①(.10mg/ 1m)和溶液②(10g/1m)分别测定,溶液①^max 280nm与288nm;溶液②λmax226nm 2021/1229 第2章第4,5,6节-光谱、色谱鉴别法,影响鉴别试验的因素
2021/12/29 5 应用举例 硝西泮鉴别：取本品的无水乙醇溶液测定，max 220nm、260nm与310nm；A260/A310=1.45～1.65 盐酸普罗帕酮鉴别：取本品的无水乙醇溶液测定， max 210nm、248nm与304nm 苯妥英钠鉴别：用高锰酸钾氧化，正庚烷提取后 测定，max 248nm 氯贝丁酯鉴别：取本品无水乙醇溶液(0.10mg/ 1ml)和溶液(10g/1ml) 分别测定，溶液 max 280nm与288nm ；溶液 max 226nm 第2章第4，5，6节-光谱、色谱鉴别法，影响鉴别试验的因素
UV鉴别方法比较 示例1较为严谨,不仅规定了最大吸收波长,同时 规定了两个波长处的吸光度比值 USP采用对照品法,将供试品与对照品按同法处理, 在200~400m波长范围內扫描两溶液,比较两者的 光谱特征,要求在相同的波长处有最大吸收、最小 吸收和相同的吸收系数,或吸光度比值在规定的限 度内 ⑧JP测定方法与ChP方法相似,但也采用对照品法 BP规定一定波长范围内仅有一个入max或一个mn 2021/1229 第2章第4,5,6节-光谱、色谱鉴别法,影响鉴别试验的因素
2021/12/29 6 UV鉴别方法比较 示例1较为严谨，不仅规定了最大吸收波长，同时 规定了两个波长处的吸光度比值 USP采用对照品法，将供试品与对照品按同法处理， 在200～400nm波长范围内扫描两溶液，比较两者的 光谱特征，要求在相同的波长处有最大吸收、最小 吸收和相同的吸收系数，或吸光度比值在规定的限 度内 JP测定方法与ChP方法相似，但也采用对照品法 BP规定一定波长范围内仅有一个max或一个min 第2章第4，5，6节-光谱、色谱鉴别法，影响鉴别试验的因素
4.2红外光谱法(R) ⑧红外光谱鉴别法是一种专属性强、应用广(固体、液 体、气体样品)的鉴别方法,特别适合于用其他方法 不易区分的同类药物 鉴别方法: chP和国家药品标准中不收载红外光谱图)集》, ChP—标准图谱对照法(见《药品红外光谱 USP对照品比较法 BP——标准图谱对照法 亲JP——除以上两种方法外,还采用规定条件下测定 定波数处的特征吸收峰 2021/1229 第2章第4,5,6节-光谱、色谱鉴别法,影响鉴别试验的因素 7
2021/12/29 7 4.2 红外光谱法（IR） 红外光谱鉴别法是一种专属性强、应用广（固体、液 体、气体样品）的鉴别方法，特别适合于用其他方法 不易区分的同类药物 鉴别方法： ChP——标准图谱对照法（见《药品红外光谱集》， ChP和国家药品标准中不收载红外光谱图） USP——对照品比较法 BP——标准图谱对照法 JP ——除以上两种方法外，还采用规定条件下测定 一定波数处的特征吸收峰 第2章第4，5，6节-光谱、色谱鉴别法，影响鉴别试验的因素
·仪器校正 3000cm1附近≤+5cm1 波数误差要÷10cm1附近≤±1cm1 ⑧波数校正:绘制聚苯乙烯薄膜光谱图,用3027cm1, 2851cm1,1601cm1,1028cm1,907cm1处的吸收 峰对仪器的波数进行校正 ⑧分辨率:在聚苯乙烯薄膜光谱图中3110~2850cm1范 围内应能清晰地分辨出7个峰,峰谷间分辨率要求如下: A 透 90 2870cm1 1589cm 1583cm1 2851cm1 30 分辨深度≥18%T 分辨深度≥12%T LO 400036003200 l600 2400 00 00 波数c1
2021/12/29 8 仪器校正 波数校正：绘制聚苯乙烯薄膜光谱图，用3027cm-1 ， 2851cm-1 ，1601cm-1 ，1028cm-1 ，907cm-1处的吸收 峰对仪器的波数进行校正 分辨率：在聚苯乙烯薄膜光谱图中3110～2850cm-1范 围内应能清晰地分辨出7个峰，峰谷间分辨率要求如下： 2870cm-1 2851cm-1 1589cm-1 1583cm-1 分辨深度≥18%T 分辨深度≥12%T 第2章第4，5，6节-光谱、色谱鉴别法，影响鉴别试验的因素 3000cm-1附近≤5cm-1 波数误差要求： 1000cm-1附近≤1cm-1
若同一化合物的光谱图在不同卷 ·供试品制备 中均有收载,则以后卷光谱图作 为比对依据,前卷仅作参考 ③中国药典采用的方法:压片法(溴化钾或氯化钾)、 糊法、膜法、溶液法、气体吸收法等,按《药品红 外光谱集》规定方法制备样品 年份卷次收载品种 药品红外光谱集 药品红外光能 1995 685 2000 208 2005 210 2010四 齿品红外光谱果 124 2015五 94 2021/1229 第2章第4,5,6节-光谱、色谱鉴别法,影响鉴别试验的因素
供试品制备 中国药典采用的方法：压片法(溴化钾或氯化钾)、 糊法、膜法、溶液法、气体吸收法等，按《药品红 外光谱集》规定方法制备样品 2021/12/29 第2章第4，5，6节-光谱、色谱鉴别法，影响鉴别试验的因素 9 年份 卷次 收载品种 1995 一 685 2000 二 208 2005 三 210 2010 四 124 2015 五 94 若同一化合物的光谱图在不同卷 中均有收载，则以后卷光谱图作 为比对依据，前卷仅作参考
例如:萘普生片、格列喹酮片, ·注意问题 采用适当溶剂提取后测定红外图 谱,直接与对照图谱比较 原料药鉴别中的多晶现象 巖按规定方法进行预处理,再绘制图谱,比对 亲未规定药用晶型时,采用对照品法,并行重结晶 亲规定药用晶型者,应用相应晶型的对照品比对 ③制剂的鉴别—采用溶剂提取法,适当干燥后测定 辅料无干扰,晶型不变化者,与原料药标准图谱比对 亲辅料无干扰,晶型变化者,与对照品同法处理后比对 辅料有干扰,晶型无变化者,照原料药标准光谱,在 指纹区內选择3~5个不受干扰的待测成份特征峰作为 鉴别依据,实测值与规定值误差应小于0.5%(±5cm 亲辅料有干扰,晶型也有变化者,不宜采用R法 2021/1229 第2章第4,5,6节-光谱、色谱鉴别法,影响鉴别试验的因素 10
2021/12/29 10 注意问题 原料药鉴别中的多晶现象 按规定方法进行预处理，再绘制图谱，比对 未规定药用晶型时，采用对照品法，并行重结晶 规定药用晶型者，应用相应晶型的对照品比对 制剂的鉴别——采用溶剂提取法，适当干燥后测定 辅料无干扰，晶型不变化者，与原料药标准图谱比对 辅料无干扰，晶型变化者，与对照品同法处理后比对 辅料有干扰，晶型无变化者，照原料药标准光谱，在 指纹区内选择35个不受干扰的待测成份特征峰作为 鉴别依据，实测值与规定值误差应小于0.5%(5cm-1) 辅料有干扰，晶型也有变化者，不宜采用IR法 第2章第4，5，6节-光谱、色谱鉴别法，影响鉴别试验的因素 例如：萘普生片、格列喹酮片， 采用适当溶剂提取后测定红外图 谱，直接与对照图谱比较