江大学网络教育精品资源共享课 药物的含量测定案例分析 通过药物含量测定方法的建立,掌握如何根据药物结构、理化性质、制剂因素等选择合 适的含量测定方法,以及常规分析方法的测定原理、反应条件与含量计算方法。 案例——吩噻嗪类药物的含量测定方法设计 查阅有关书籍、文献,设计2~3种测定吩噻嗪类药物含量的方法,并说明反应原理 主要试剂和实验条件,以及含量计算方法。 结构分析 吩噻嗪类药物具有硫氮杂葸母核,代表性药物有:异丙嗪、氯丙嗪、奋乃静、氟奋乃静, 三氟拉嗪、硫利达嗪等。结构通式如下: oN|R 母核为共轭三环π系统,10位R取代基为具有2~3个碳链的二甲或二乙氨基,或含氮杂 环,2位R'取代基通常为H、Cl、CF3、SCH3等。分析其结构,主要具有如下特征:①多个 吸收峰的紫外吸收光谱;②10位R取代基上N原子具有碱性;③环上硫原子易被氧化成亚砜 和砜,未被氧化的硫原子可与某些金属离子(如钯离子)形成有色配位化合物。因此,该类 药物的含量测定可以采用紫外分光光度法、非水碱量法、比色法,以及HPLC法。 2非水碱量法: (1)方法原理:非水碱量法是本类原料药的主要含量测定方法。利用本类药物10位R 取代基上N原子的碱性,在非水溶液中,用高氯酸滴定剂进行滴定。一般R取代基上有n 个氮原子,消耗n摩尔高氯酸,如奋乃静、盐酸三氟拉嗪等消耗2摩尔高氯酸;盐酸氯丙嗪 仅消耗1摩尔高氯酸
浙江大学网络教育精品资源共享课 药物的含量测定案例分析 通过药物含量测定方法的建立,掌握如何根据药物结构、理化性质、制剂因素等选择合 适的含量测定方法,以及常规分析方法的测定原理、反应条件与含量计算方法。 案例——吩噻嗪类药物的含量测定方法设计 查阅有关书籍、文献,设计 2~3 种测定吩噻嗪类药物含量的方法,并说明反应原理, 主要试剂和实验条件,以及含量计算方法。 结构分析: 吩噻嗪类药物具有硫氮杂蒽母核,代表性药物有:异丙嗪、氯丙嗪、奋乃静、氟奋乃静、 三氟拉嗪、硫利达嗪等。结构通式如下: N S R' R 2 1 3 6 5 4 7 8 9 10 母核为共轭三环π系统,10 位R取代基为具有 2~3 个碳链的二甲或二乙氨基,或含氮杂 环,2 位R′取代基通常为H、Cl、CF3、SCH3 非水碱量法: 等。分析其结构,主要具有如下特征:①多个 吸收峰的紫外吸收光谱;②10 位R取代基上N原子具有碱性;③环上硫原子易被氧化成亚砜 和砜,未被氧化的硫原子可与某些金属离子(如钯离子)形成有色配位化合物。因此,该类 药物的含量测定可以采用紫外分光光度法、非水碱量法、比色法,以及HPLC法。 (1)方法原理:非水碱量法是本类原料药的主要含量测定方法。利用本类药物 10 位 R 取代基上 N 原子的碱性,在非水溶液中,用高氯酸滴定剂进行滴定。一般 R 取代基上有 n 个氮原子,消耗 n 摩尔高氯酸,如奋乃静、盐酸三氟拉嗪等消耗 2 摩尔高氯酸;盐酸氯丙嗪 仅消耗 1 摩尔高氯酸
江大学网络教育精品资源共享课 HCI HCI 奋乃静 盐酸氯丙嗪 盐酸异丙嗪 (2)主要试剂与指示终点方法:采用的非水溶剂有冰醋酸、冰醋酸-醋酐、醋酐-甲酸等。 指示终点的方法有结晶紫指示剂法、电位滴定法。 (3)注意事项:①本类药物临床上应用的多为盐酸盐,由于盐酸酸性较强,影响滴定 反应,故在滴定前需加入足够量醋酸汞,使与盐酸酸根形成氯化汞而消除干扰。②非水溶剂 对温度较敏感,若滴定温度与标定标准液时温度不一致,则需按校正公式对标准液浓度进行 校正(温差在10℃以内),或重新标定(温差超过10℃)。③非水滴定应避免水分引入, 用仪器均应干燥。若用电位法指示终点,必须将甘汞电极内盛有的饱和氯化钾水溶液改换成 饱和氯化钾的无水甲醇溶液。 (4)含计算:采用滴定度法计算。 含量(%)、×T×F 1009 W 紫外分光光度法: (1)方法原理:本类药物在紫外光区205m、254nm、30onm附近有三个吸收峰值, 最强峰在254m附近,一般选择254nm附近的峰进行测定,但当制剂中辅料对测定有干扰 时,则可选用300nm附近的波长进行测定。也可采用计算光谱法,如双波长法、导数光谱 法等来消除制剂中其他成分的干扰,以及氧化产物的干扰 (2)含量计算:本法主要用于本类药物的制剂分析,以对照品比较法或E法计算含量 相当于标示量(%)=4xCx稀释倍数平均单剂质量,100 样量 标示量 或,相当于标示量(%)= 稀释倍数平均单剂质量 .×100% E1∞×L×100取样量 规格 比色法 利用环上硫原子可与某些金属离子形成有色配位化合物的性质,可采用钯离子比色法测 定含量,本法可以消除氧化产物的影响,因后者不与钯离子反应。在pH2的缓冲溶液中
浙江大学网络教育精品资源共享课 N N OH S N Cl S N N CH3 CH3 Cl . HCl S N N CH3 H3C CH3 . HCl 奋乃静 盐酸氯丙嗪 盐酸异丙嗪 (2)主要试剂与指示终点方法:采用的非水溶剂有冰醋酸、冰醋酸-醋酐、醋酐-甲酸等。 指示终点的方法有结晶紫指示剂法、电位滴定法。 (3)注意事项:①本类药物临床上应用的多为盐酸盐,由于盐酸酸性较强,影响滴定 反应,故在滴定前需加入足够量醋酸汞,使与盐酸酸根形成氯化汞而消除干扰。②非水溶剂 对温度较敏感,若滴定温度与标定标准液时温度不一致,则需按校正公式对标准液浓度进行 校正(温差在 10℃以内),或重新标定(温差超过 10℃)。③非水滴定应避免水分引入,所 用仪器均应干燥。若用电位法指示终点,必须将甘汞电极内盛有的饱和氯化钾水溶液改换成 饱和氯化钾的无水甲醇溶液。 (4)含量计算:采用滴定度法计算。 含量(%)= ×100% × × W V T F 紫外分光光度法: (1)方法原理:本类药物在紫外光区 205nm、254nm、300nm 附近有三个吸收峰值, 最强峰在 254nm 附近,一般选择 254nm 附近的峰进行测定,但当制剂中辅料对测定有干扰 时,则可选用 300nm 附近的波长进行测定。也可采用计算光谱法,如双波长法、导数光谱 法等来消除制剂中其他成分的干扰,以及氧化产物的干扰。 (2)含量计算:本法主要用于本类药物的制剂分析,以对照品比较法或 1% E1cm 法计算含量。 相当于标示量(%)= 对 样 对 A A ×C × × ×100% 标示量 平均单剂质量 取样量 稀释倍数 或,相当于标示量(%)= 规格 平均单剂质量 取样量 稀释倍数 × × × ×100 1% E1 L A cm ×100% 比色法: 利用环上硫原子可与某些金属离子形成有色配位化合物的性质,可采用钯离子比色法测 定含量,本法可以消除氧化产物的影响,因后者不与钯离子反应。在 pH 2 的缓冲溶液中
江大学网络教育精品资源共享课 吩噻嗪药物分子结构中的二价硫与钯离子形成红色配位化合物,在500nm波长附近有最大 吸收,测定供试液和对照品溶液在最大吸收波长处的吸光度,以对照品比较法计算含量。 6高效液相色谱法 (1)测定方法:用反相高效液相色谱法测定盐酸异丙嗪制剂含量,一般以ODS柱为分 析柱;甲醇-水(用冰醋酸调pH至2~3)为流动相;检测波长254nm 取样品适量,用盐酸溶液溶解并稀释至一定浓度的溶液,作为供试品溶液。另取盐酸异 丙嗪对照品,同法制成一定浓度的溶液,作为对照品溶液。分别取供试品溶液和对照品溶液 一定量(如α0μl)进样测定,按外标法以峰面积计算盐酸异丙嗪制剂含量。 (2)注意问题 ①高效液相色谱法色谱条件可以参考中国药典方法,但色谱法与容量法不同,色谱条 件在实际样品测定中是可以进行适当调整的,只要在药典允许的范围内(色谱柱种类、检测 器类型、流动相成分不得更改)。 ②oDS柱为非极性柱,是高效液相色谱中最常用的色谱柱,其填料为十八烷基硅烷 键合硅胶,流动相pH应控制在2~8以内 ③一定比例的甲醇水是反相色谱最常用的流动相,药典规定的醇水比例可根据色谱 分离情况作适当调整;水相pH用醋酸调节至2~3,可根据实际色谱峰分离情况调整至一定 值,但不能超出ODS柱使用范围。 ④制剂分析测定前需进行适当处理。如片剂测定,一般取10片或20片,精密称定 研细,取片粉适量,相当于被测物一定量,此处要根据片剂规格和平均片重进行计算,求出 片粉理论称量,控制实际称量在理论称量的±10%以内,然后用适当溶剂溶解并稀释至一定 浓度。 (3)计算: ①片粉取样量计算:假如10片重3.5675g,规格0.3g,要求取相当于被测物045g,则 应取片粉(X) 根据 平均片重 规格 相当于被测物量 3.5675/10 0.3 0.45 可称取片粉的范围=X±10% ②片剂含量计算:首先用外标法计算供试品溶液浓度。根据供试品溶液和对照品溶液的
浙江大学网络教育精品资源共享课 吩噻嗪药物分子结构中的二价硫与钯离子形成红色配位化合物,在 500nm 波长附近有最大 吸收,测定供试液和对照品溶液在最大吸收波长处的吸光度,以对照品比较法计算含量。 高效液相色谱法: (1)测定方法:用反相高效液相色谱法测定盐酸异丙嗪制剂含量,一般以 ODS 柱为分 析柱;甲醇-水(用冰醋酸调 pH 至 2∼3)为流动相;检测波长 254nm。 取样品适量,用盐酸溶液溶解并稀释至一定浓度的溶液,作为供试品溶液。另取盐酸异 丙嗪对照品,同法制成一定浓度的溶液,作为对照品溶液。分别取供试品溶液和对照品溶液 一定量(如 20µl)进样测定,按外标法以峰面积计算盐酸异丙嗪制剂含量。 (2)注意问题: ① 高效液相色谱法色谱条件可以参考中国药典方法,但色谱法与容量法不同,色谱条 件在实际样品测定中是可以进行适当调整的,只要在药典允许的范围内(色谱柱种类、检测 器类型、流动相成分不得更改)。 ② ODS 柱为非极性柱,是高效液相色谱中最常用的色谱柱,其填料为十八烷基硅烷 键合硅胶,流动相 pH 应控制在 2∼8 以内。 ③ 一定比例的甲醇-水是反相色谱最常用的流动相,药典规定的醇-水比例可根据色谱 分离情况作适当调整;水相 pH 用醋酸调节至 2∼3,可根据实际色谱峰分离情况调整至一定 值,但不能超出 ODS 柱使用范围。 ④ 制剂分析测定前需进行适当处理。如片剂测定,一般取 10 片或 20 片,精密称定, 研细,取片粉适量,相当于被测物一定量,此处要根据片剂规格和平均片重进行计算,求出 片粉理论称量,控制实际称量在理论称量的±10% 以内,然后用适当溶剂溶解并稀释至一定 浓度。 (3)计算: ①片粉取样量计算:假如 10 片重 3.5675g,规格 0.3g ,要求取相当于被测物 0.45g,则 应取片粉(X): 根据: 可称取片粉的范围=X±10% ②片剂含量计算:首先用外标法计算供试品溶液浓度。根据供试品溶液和对照品溶液的 3.5675/10 0.3 X 0.45 = 平均片重 规格 X 相当于被测物量 =
江大学网络教育精品资源共享课 峰面积(A)和对照品溶液的浓度(C),供试品溶液的浓度C程A×C,然后根据稀释 A 倍数(F)和所取片粉重量(W)、片剂规格、平均片重,计算相当于标示量的百分含量: 相当于标示量(%)=C样xFx平均片重×100% ③)注射剂含量计算:相当于标示量(%)=CHx取样体积(m)X标示量×10% 6该案例说明的主要问题 药物结构-理化性质-分析方法选择之间的关系
浙江大学网络教育精品资源共享课 峰面积(A)和对照品溶液的浓度(C),供试品溶液的浓度C样 对 样 对 A A ×C = ,然后根据稀释 倍数(F)和所取片粉重量(W)、片剂规格、平均片重,计算相当于标示量的百分含量: 相当于标示量(%)=C样 × × ×100% 标示量 平均片重 W F ③注射剂含量计算:相当于标示量(%)=C样 100% 1 ml × × × 取样体积( ) 标示量 F 该案例说明的主要问题: 药物结构-理化性质-分析方法选择之间的关系