Zhe ji ang University Press http://www.zjupress.com 药物分析 mma0e0aa06%° 姚彤炜 2021/1229 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
药物分析 pharmaceutical analysis 姚彤炜 2021/12/29 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理 1
第1章 药物分析基础知识与药品标准(6) 主要内容 1.药品质量控制的意义和药物分析的任务 2.药典 3.药品检验工作的基本程序 4.药物分析数据处理与方法评价 5.药品质量管理 2021/1229 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
2021/12/29 2 第1章 药物分析基础知识与药品标准(6) 1. 药品质量控制的意义和药物分析的任务 2. 药典 3. 药品检验工作的基本程序 4. 药物分析数据处理与方法评价 5. 药品质量管理 主要内容 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
·本章学习要求 掌握:药物分析的意义、任务;《中国药典》的 结构与内容药品检验工作的基本程序;分析 方法验证的内容、定义与计算;分析误差产生 的原因和降低误差的方法;有效数字的位数确 定与修约规则 熟悉:主要外国药典的基本结构与主要内容;误 差及偏差的表示与计算方法;有效数字的运算 法则 了解:《中国药典》的沿革;药品质量管理规范、 规程;药物分析学科发展趋势 2021/1229 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
2021/12/29 3 本章学习要求 掌握：药物分析的意义、任务；《中国药典》的 结构与内容;药品检验工作的基本程序；分析 方法验证的内容、定义与计算；分析误差产生 的原因和降低误差的方法；有效数字的位数确 定与修约规则 熟悉：主要外国药典的基本结构与主要内容；误 差及偏差的表示与计算方法；有效数字的运算 法则 了解：《中国药典》的沿革；药品质量管理规范、 规程；药物分析学科发展趋势 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
四.检测限( limit of detection,LOD) ⑧检测限——指试样中被测物能被检测出的最低量。 LOD仅为限度试验指标和定性鉴别依据,无定量 意义 鉴别和杂质检查方法均需验证LOD 常用方法有:直观法,信噪比法和基于响应值标 准偏差和标准曲线斜率法 数据要求:无论采用何种方法,均应用浓度接近 或等于检测限值的数份试样进行分析,并附上测 试图谱,说明测试过程和检测限测定结果 2021/1229 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
四．检测限（limit of detection，LOD） 检测限——指试样中被测物能被检测出的最低量。 LOD仅为限度试验指标和定性鉴别依据，无定量 意义 鉴别和杂质检查方法均需验证LOD 常用方法有：直观法，信噪比法和基于响应值标 准偏差和标准曲线斜率法 数据要求：无论采用何种方法，均应用浓度接近 或等于检测限值的数份试样进行分析，并附上测 试图谱，说明测试过程和检测限测定结果 2021/12/29 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理 4
1.直观法 ⑧直观法(目视法):用已知浓度被测物进行试 验,确定LOD,即以能被检岀的最低浓度或量 确定为检测限 主要用于非仪器分析,例如:簿层色谱分析法 0.2 mgml 0.5 mgiml 1.0mghml 2. 0mgiml 4.0 mgml 2021/12/29 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
2021/12/29 5 1. 直观法 直观法（目视法）：用已知浓度被测物进行试 验， 确定LOD，即以能被检出的最低浓度或量 确定为检测限 主要用于非仪器分析，例如：薄层色谱分析法 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
2.信噪比法 ③信噪比法:用于能显示基线噪声的分析方法,将 已知低浓度试样测得的信号与空白样品测得的信 号进行比较,计算岀能被可靠检出的被测物最低 浓度或量,一般以信噪比(SN)为3:1或2:1时的相 应浓度或注入仪器的量来确定LOD ③主要用于仪器分析法,例如:高效液相色谱法或 气相色谱法 N=空白样品信号 S=被测物信号 M减剧林贴M删财二N 2021/1229 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
2. 信噪比法 信噪比法：用于能显示基线噪声的分析方法，将 已知低浓度试样测得的信号与空白样品测得的信 号进行比较，计算出能被可靠检出的被测物最低 浓度或量，一般以信噪比(S/N)为3:1或2:1时的相 应浓度或注入仪器的量来确定LOD 主要用于仪器分析法，例如：高效液相色谱法或 气相色谱法 2021/12/29 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理 6 N=空白样品信号 S=被测物信号
·信噪比法中LOD的计算举例 ③在实际工作中,常采用逐步稀释的方法来获得检 测限(LOD),或用接近检测限浓度的试样测得 相应信号,按公式(LOD=3NS)计算求得 例:取浓度为2μg/m1某测定液20u1,注入PLC仪, 测得峰高H12mm.噪音N=1.5mm.则 1.5×3 LOD= =0.015/g(最低量) 12/(2g×0.02m) 被测物信号 S= 单位重量或浓度 1.5×3 LOD 12/2(1g1m =0.754/m1(最低浓度) 2021/1229 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
信噪比法中LOD的计算举例 在实际工作中，常采用逐步稀释的方法来获得检 测限（LOD ），或用接近检测限浓度的试样测得 相应信号，按公式（LOD=3N/S）计算求得： 例：取浓度为2g/ml某测定液20l，注入HPLC仪， 测得峰高H=12mm，噪音N=1.5mm，则： 2021/12/29 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理 7 g g ml LOD 0.015 12 /(2 0.02 ) 1.5 3 = = (最低量) g ml g ml LOD 0.75 / 12 / 2( / ) 1.5 3 = = (最低浓度) S= 被测物信号 单位重量或浓度
3.基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法 按公式LOD=3.38/S计算: 8:为响应值偏差,可通过 两种方法而获得 ①测定空白值的标准偏差 ②测定标准曲线的剩余标准 偏差或截距的标准偏差 X S:标准曲线的斜率 y=bX+a 2021/1229 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
3. 基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法 按公式LOD=3.3/S计算： ：为响应值偏差，可通过 两种方法而获得 ① 测定空白值的标准偏差 ② 测定标准曲线的剩余标准 偏差或截距的标准偏差 S：标准曲线的斜率 2021/12/29 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理 8 y=bx+a x y
五.定量限( imit of quantitation,LOQ) ⑧定量限——指试样中被测物能被定量测定的最低 量,其测定结果必须符合准确度和精密度要求 ⑧对微量或痕量药物分析、杂质和降解产物的定量 测定时,应确定测定方法的LOQ BL○Q的测定方法与检测限相似,分为直观法,信 噪比法和基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法 但以信噪比(SN)为10:1时的相应浓度或注入仪器 的量来确定LOQ,或按公式LOQ=106/S计算得到 2021/1229 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
2021/12/29 9 五．定量限（limit of quantitation，LOQ ) 定量限——指试样中被测物能被定量测定的最低 量，其测定结果必须符合准确度和精密度要求 对微量或痕量药物分析、杂质和降解产物的定量 测定时，应确定测定方法的LOQ LOQ的测定方法与检测限相似，分为直观法，信 噪比法和基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法 但以信噪比(S/N)为10:1时的相应浓度或注入仪器 的量来确定LOQ，或按公式LOQ=10/S计算得到 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理
L○Q数据要求和注意事项 ③数据要求:无论采用何种方法测定LOQ,均须用 浓度接近定量限值的数份试样进行分析验证 魯应附上图谱,说明测试过程和定量限结果,包括 准确度与精密度的验证数据,如均值(ⅹ±SD)、 RSD及测定次数(一般n=5~6) LoQ和OD测定时应注意: ①稀释用嵱剂的选择:检查原料药中杂质肘,可在嵱解 样品的嵱剂中进行;而检查制剂中降解产物时,需在 处方量辅料和其他组分存在下进行 ②仪器参数的设置应与测定实际样品肘保持一致 2021/1229 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理 10
LOQ数据要求和注意事项 数据要求：无论采用何种方法测定LOQ ，均须用 浓度接近定量限值的数份试样进行分析验证 应附上图谱，说明测试过程和定量限结果，包括 准确度与精密度的验证数据，如均值(x SD) 、 RSD及测定次数(一般n=5～6) LOQ和LOD测定时应注意： 稀释用溶剂的选择：检查原料药中杂质时，可在溶解 样品的溶剂中进行；而检查制剂中降解产物时，需在 处方量辅料和其他组分存在下进行 仪器参数的设置应与测定实际样品时保持一致 2021/12/29 第1章第4,5节-分析方法评价与药品质量管理 10