项目6染色技术 重庆医药高等专科学校
重庆医药高等专科学校 项目6 染色技术
微生物染色的染抖 ·是一类苯环上带有发色基团和助色基团的有机化合物 染料通常都是盐，分酸性染料和碱性染料两大类。 ·在微生物染色中，碱性染料较常用，如常用的美蓝( 即亚甲蓝)、结晶紫、碱性紫复红、番红（即沙黄） 、孔雀绿等都属宇减碱性染料
微生物染色的染料 是一类苯环上带有发色基团和助色基团的有机化合物 。 染料通常都是盐，分酸性染料和碱性染料两大类。 在微生物染色中，碱性染料较常用，如常用的美蓝（ 即亚甲蓝）、结晶紫、碱性紫复红、番红（即沙黄） 、孔雀绿等都属于碱性染料
微生物染色原理 ÷在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电 荷： 冬而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷； ÷带正电荷的碱性染料染色部分很容易与带负电荷细菌 细胞结合使细菌染色
❖在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电 荷； ❖而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷； ❖带正电荷的碱性染料染色部分很容易与带负电荷细菌 细胞结合使细菌染色。 微生物染色原理
革兰氏染色 ·菌种： ·参考菌：G+:Staphylococcus aureus, G-:Escherichia coli ·仪器显微镜； ·材料载玻片，香柏油，二甲苯，擦镜纸，吸水纸，染 色缸等。 ·染料草酸铵结晶紫染色液，路哥氏(LugO)碘液， 95%乙醇，0.5%香红染色液；
革兰氏染色 菌种: 参考菌：G+：Staphylococcus aureus, G-: Escherichia coli 仪器 显微镜； 材料 载玻片，香柏油，二甲苯，擦镜纸，吸水纸，染 色缸等。 染料 草酸铵结晶紫染色液，路哥氏(Lugol)碘液， 95%乙醇，0.5%番红染色液；
革蓝氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较 成分 占细胞壁干重的% 革蓝氏阳性菌 革蓝氏阴性菌 肽聚糖令量很高(50-90)含量很低(~10) 鳞壁酸含量较高(<50) 无 类脂质一般无(<2) 含量较高(~20) 蛋白质无 含量较高
革蓝氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较 成分 占细胞壁干重的% 革蓝氏阳性菌 革蓝氏阴性菌 肽聚糖 含量很高（50-90） 含量很低（~10） 磷壁酸 含量较高（<50） 无 类脂质 一般无（ < 2） 含量较高（~20） 蛋白质 无 含量较高
革蓝氏染色的意义 ·细菌分类鉴定 ·指导临床用药
革蓝氏染色的意义 细菌分类鉴定 指导临床用药
微生物分类鉴定的特征 冬形态学和生理生化特征 冬血清学实验和噬菌体分型 冬氨基酸序列和蛋白质分析 冬核酸碱基组成和序列分析
微生物分类鉴定的特征 ❖形态学和生理生化特征 ❖血清学实验和噬菌体分型 ❖氨基酸序列和蛋白质分析 ❖核酸碱基组成和序列分析
形态学特征 培养特征、菌落的形状、大小、颜色、表面特征、光 泽等 冬细胞形态：形状、火小、排列方式 冬特殊结构：鞭毛、芽孢、孢子、荚膜等 冬细胞内涵物 冬染色反应：革蓝氏染色、抗酸性染色 冬运动性
形态学特征 ❖培养特征、菌落的形状、大小、颜色、表面特征、光 泽等 ❖细胞形态：形状、大小、排列方式 ❖特殊结构：鞭毛、芽孢、孢子、荚膜等 ❖细胞内涵物 ❖染色反应：革蓝氏染色、抗酸性染色 ❖运动性
简单染色方法 涂片 干燥 固定 镜检 水洗 边色
涂片 干燥 固定 镜检 水洗 染色 简单染色方法 干燥
涂片 要用活跃生长期的幼培养物作革兰氏染色： ÷注意练习无菌操作； 。在载玻片上滴半滴生理盐水： 取菌不要贪多，接种环上肉眼可见菌苔痕迹即可； ÷菌苔在生理盐水中涂片要均匀，局部不宜过厚，以免脱 色不完全造成假阳性
涂片 ❖要用活跃生长期的幼培养物作革兰氏染色; ❖注意练习无菌操作； ❖在载玻片上滴半滴生理盐水； ❖取菌不要贪多，接种环上肉眼可见菌苔痕迹即可； ❖菌苔在生理盐水中涂片要均匀，局部不宜过厚,以免脱 色不完全造成假阳性