项目4微生物接种、分离培养技术 重庆医药高等专科学校 主讲教师：甘淋玲
项目4 微生物接种、分离培养技术 重庆医药高等专科学校 主讲教师：甘淋玲
概述 接种：将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或 活的生物体内的过程叫做接种。 接种方法：斜面接种、穿刺接种等。 选择一种好的接种方法，对于微生物的分离、纯化、增 殖和鉴别等都很重要。 为了确保纯种不被杂菌污染，在整个过程中，必须进行 严格的无菌操作
接种：将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或 活的生物体内的过程叫做接种。 接种方法：斜面接种、穿刺接种等。 选择一种好的接种方法，对于微生物的分离、纯化、增 殖和鉴别等都很重要。 为了确保纯种不被杂菌污染，在整个过程中，必须进行 严格的无菌操作。 概述
主要内容 微生物接种技术 微生物分离纯化方法 微生物培养 四 学生实训
主要内容 一 微生物接种技术 二 三 微生物培养 四 学生实训 微生物分离纯化方法
一、微生物接种技术 (一)接种工具 1.接种环和接种针 用于固体、液体培 养基的接种 5-8cm 22cm 接种环 接种 环或针 金属柄 绝缘柄 用于半固体培养基 的接种 环（针）部分材质为白金丝或镍铬丝
一、微生物接种技术 （一）接种工具 1．接种环和接种针 环或针 金属柄 绝缘柄 用于固体、液体培 养基的接种 用于半固体培养基 的接种 环（针）部分材质为白金丝或镍铬丝
(一)接种工具 2.玻璃涂棒 在固体培养基表面将 菌液均匀涂布时。主 要用于液体标本的涂 布接种。 涂布棒是由直径为2~3mm的玻璃棒弯曲成L形制成
（一）接种工具 2．玻璃涂棒 在固体培养基表面将 菌液均匀涂布时。主 要用于液体标本的涂 布接种。 涂布棒是由直径为2~3mm的玻璃棒弯曲成L形制成
(一)接种工具 3.滴管或吸管 用于液体接种 0
（一）接种工具 3．滴管或吸管 用于液体接种
(二)无菌操作 >无菌操作技术：指在微生物实验工作中，控制或防止 各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关 措施。 >目的： √保证待测检品不被环境中微生物污染； √防止被检微生物在操作中污染环境或感染操作人员
（二）无菌操作 ➢ 无菌操作技术：指在微生物实验工作中，控制或防止 各类微生物的污染及其干扰 的一系列操作方法和有关 措施。 ➢ 目的： ✓ 保证待测检品不被环境中微生物污染； ✓ 防止被检微生物在操作中污染环境或感染操作人员
(二)无菌操作 >接种环境 接种室 接种箱 超净工作台 √接种场所必须进行严格的消毒处理
➢接种环境 （二）无菌操作 接种室 接种箱 超净工作台 ✓接种场所必须进行严格的消毒处理
~于接种之前打开接种 室和超净工作台紫外 灯消毒30min,同时 打开风机： >接种时必须关闭紫外 灯
➢ 于接种之前打开接种 室和超净工作台紫外 灯消毒30min，同时 打开风机； ➢ 接种时必须关闭紫外 灯
(二)无菌操作 >要点：防止污染，严格的无菌操作 √接种者的双手要进行消毒处理，一般用75%酒精或0.01% 新洁尔灭擦洗 √整个操作过程都要靠近酒精灯火焰 √接种工具、管、瓶口接种前后要通过灼烧灭菌 √棉塞不得乱放，操作中只能夹在手上 √不能用嘴直接吸吹吸管。 √不能有跑、跳等力度大的动作，以免引起空气大振动而 增加染菌机会
➢ 要点：防止污染，严格的无菌操作 ✓ 接种者的双手要进行消毒处理，一般用75%酒精或0.01% 新洁尔灭擦洗 ✓ 整个操作过程都要靠近酒精灯火焰 ✓ 接种工具、管、瓶口接种前后要通过灼烧灭菌 ✓ 棉塞不得乱放，操作中只能夹在手上 ✓ 不能用嘴直接吸吹吸管。 ✓ 不能有跑、跳等力度大的动作，以免引起空气大振动而 增加染菌机会。 （二）无菌操作