实验二动物性食品中有毒有害化学物质的检测 [实验目的]掌栀动物性食品中铅、镉、汞、砷等有毒有害元素和硝酸盐（亚硝酸盐） 苯并()芘、黄曲霉毒素等有毒有害化合物的国家标准测定方法的原理，熟悉常用方法的 基本操作，了解不同方法适用范围和基本操作。 GB2762一2012《食品安全国家标准食品中污染物的限量》中对动物性食品中铅、镉、 汞、砷、铬、亚硝酸盐 (硝酸盐 苯并)花、N二甲基亚硝胺等有毒有害化学物质的松 测方法及限量进行了规定，由于本实验指导篇幅所限，在本部分只列出了动物性食品常见及 对人类健康危害较大的几种有毒有害元素和有毒有害化合物的检测方法进行了介绍，对同 一种物质的检测所列举的方法均为现行国家标准方法，可根据具体情况选择使用。 一、动物性食品中铅的测定 GBT5009.12一2010《食品安全国家标准食品中铅的测定》适用于食品中铅的测定 本标准检出限：石墨炉原子吸收光谱法为0.005mgkg:氢化物原子荧光光谱法固体试 样为0.005mgkg,液体试样为0.001mgkg:火焰原子吸收光谱法为0.1mgkg:比色法为 25mo。单扫描极法为0085m (一）石墨炉原子吸收光谱法（第一法） 1.原理试样经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，电热原子化后 吸收283.3m共振线，在一定浓度范围，其吸收值与铅含量成正比，与标准系列比较定 量。 2.试剂和材料除非另有规定，本方法所使用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的 级水。 (1)硝酸：优级纯。 (2)过硫酸铵 (3)过氧化氢(30%)。 (4)高氯酸：优级纯。 (5)硝酸(1+1)：取50mL硝酸慢慢加入50mL水中 (6)硝酸(0.5molL)：取32mL硝酸加入50mL水中，稀释至100mL (7)硝酸(1mo1L)：取6.4mL硝酸加入50mL水中，稀释至100mL。 (8)磷酸二氢铵溶液(20gL)：称取2.0g磷酸二氢铵，以水溶解稀释至100mL。 (9)混合酸：硝酸+高氨酸(9+1)。取9份硝酸与1份高氯酸混合。 (10)铅标准储备液：准确称取1.000g金属铅(99.99% 分次加少量硝参加封 溶解，总量不超过37mL,移入1000mL容量瓶，加水至刻度。混匀。此溶液每毫升含 1.0mg铅。 (11)铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液1.0mL于100mL容量瓶中，加硝酸 至刻度。如此经多次稀释成每毫升含10.0ng、20.0ng、40.0ng、60.0ng、80.0ng铅的标 准使用液。 3仪知沿 (1)原子吸收光谱仪：附石墨炉及铅空心阴极灯。 (2)马弗炉。 (3)天平：感量为1mg
实验二 动物性食品中有毒有害化学物质的检测 [实验目的] 掌握动物性食品中铅、镉、汞、砷等有毒有害元素和硝酸盐（亚硝酸盐）、 苯并（a）芘、黄曲霉毒素等有毒有害化合物的国家标准测定方法的原理，熟悉常用方法的 基本操作，了解不同方法适用范围和基本操作。 GB2762—2012《食品安全国家标准 食品中污染物的限量》中对动物性食品中铅、镉、 汞、砷、铬、亚硝酸盐（硝酸盐）、苯并（a）芘、N-二甲基亚硝胺等有毒有害化学物质的检 测方法及限量进行了规定，由于本实验指导篇幅所限，在本部分只列出了动物性食品常见及 对人类健康危害较大的几种有毒有害元素和有毒有害化合物的检测方法进行了介绍，对同 一种物质的检测所列举的方法均为现行国家标准方法，可根据具体情况选择使用。 一、动物性食品中铅的测定 GB/T 5009.12—2010《食品安全国家标准 食品中铅的测定》适用于食品中铅的测定。 本标准检出限：石墨炉原子吸收光谱法为 0.005 mg/kg；氢化物原子荧光光谱法固体试 样为 0.005 mg/kg，液体试样为 0.001 mg/kg；火焰原子吸收光谱法为 0.1 mg/kg；比色法为 0.25 mg/kg。单扫描极谱法为 0.085 mg/kg。 （一）石墨炉原子吸收光谱法（第一法） 1. 原理 试样经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，电热原子化后 吸收283.3 nm 共振线，在一定浓度范围，其吸收值与铅含量成正比，与标准系列比较定 量。 2. 试剂和材料 除非另有规定，本方法所使用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的 一级水。 （1）硝酸：优级纯。 （2）过硫酸铵。 （3）过氧化氢（30%）。 （4）高氯酸：优级纯。 （5）硝酸（1＋1）：取 50 mL 硝酸慢慢加入 50 mL 水中。 （6）硝酸（0.5 mol/L）：取 3.2 mL 硝酸加入 50 mL 水中，稀释至 100 mL。 （7）硝酸（l mo1/L）：取 6.4 mL 硝酸加入 50 mL 水中，稀释至 100 mL。 （8）磷酸二氢铵溶液（20 g/L）：称取 2.0 g 磷酸二氢铵，以水溶解稀释至 100 mL。 （9）混合酸：硝酸+高氯酸（9+1）。取 9 份硝酸与 1 份高氯酸混合。 （10）铅标准储备液：准确称取 1.000 g 金属铅（99.99%），分次加少量硝酸，加热 溶解，总量不超过 37 mL，移入 1 000 mL 容量瓶，加水至刻度。混匀。此溶液每毫升含 1.0 mg 铅。 （11）铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液 1.0 mL 于 100 mL 容量瓶中，加硝酸 至刻度。如此经多次稀释成每毫升含 10.0 ng、20.0 ng、40.0 ng、60.0 ng、80.0 ng 铅的标 准使用液。 3. 仪器和设备 （1）原子吸收光谱仪：附石墨炉及铅空心阴极灯。 （2）马弗炉。 （3）天平：感量为 1 mg
(4)干燥恒温箱 (5)瓷坩埚。 (6)压力清解器 、压力消解罐或压力溶弹 (7)可调式电热板、可调式电炉。 4.分析步骤 (1)试样预处理：在采样和制备过程中，应注意不使试样污染：鱼类、肉类及蛋类 等水分含量高的鲜样，用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。 (2)试样消解（可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解） ①压力消解罐消解法：称取1g~2g试样（精确到0.001g, 含脂肪高的试 <1g,鲜样<2g或按压力消解罐使用说明书称取试样)于聚四氟乙烯内罐，加硝酸2 mL~4mL浸泡过夜。再加过氧化氢2mL~3mL(总量不能超过罐容积的1/3)。盖好 内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120℃~140℃保持3h~4h,在箱内自然冷却 至室温，用滴管将消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10mL~25mL容量 瓶中，用水少量多次洗涤罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用：同时作试 剂空 ②干法灰化：称取1g~5g试样（精确到0.001g,根据铅含量而定）于瓷坩埚 中，先小火在可调式电热板上炭化至无烟，移入马弗炉500℃±25℃灰化6h~8h,冷 却。若个别试样灰化不彻底，则加1mL混合酸在可调式电炉上小火加热，反复多次直 到消化完全 放净 用硝酸将灰分溶解，用滴管将试样 消化液洗入或过滤入（视消 后试样的盐分而定)10ml 25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于 容量瓶中并定容至刻度，混匀备用：同时作试剂空白。 ③过硫酸铵灰化法：称取1g~5g试样（精确到0.001g)于瓷坩埚中，加2mL~ 4mL硝酸浸泡1h以上，先小火炭化，冷却后加2.00g一3.00g过硫酸铵盖于上面，继 续炭化至不目烟，转入马弗炉，500℃±25C恒温2h, 再升至800℃， 保持20m .冷 却，加2ml~3mL硝酸， 用滴管将试样消化液洗入或过滤入 (视消化后试样的盐分而 定)10mL一25L容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容 至刻度，混匀备用：同时作试剂空白。 ④湿式消解法：称取试样1g一5g(精确到0001g)于锥形瓶或高脚烧杯中，放数 粒玻璃珠 ,加10L混合酸，加盖浸泡过夜，加一小漏斗于电炉上消解，若变棕黑色 再加混合酸，直至冒白烟 消化液呈无色透明或略带黄色，放冷 ,用滴管将试样消化液 入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10L~25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤锥 形瓶或高脚烧杯，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用：同时作试剂空白。 (3)测定 ①仪器条件：根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为波长283.3m 0.2nm~1.0nm 灯电流5mA~7mA,干燥温度120C, 0s:灰化温度450℃，持续15 s20s,原子化温度：1700℃ ~2300℃，持续4s~5s,背景校正为氘灯或塞曼效应 ②标准曲线绘制：吸取以上配制的铅标淮使用液10.0gmL(或·gL),20.0 ng/ml(或μg/1L）,40.0ng/mL(或μg/1),60.0ng/mL(或μg/L),80.0ng/mlL (或μL)各10μL,注入石墨炉，测得其吸光值并求得吸光值与浓度关系的一元线 性回归方程。 ③试样测定：分别吸取样液和试剂空白液各10L, 注入石墨炉，测得其吸光 值，代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中铅含量。 ④基体改进剂的使用：对有干扰试样，则注入适量的基体改进剂磷酸二氢铵溶液 (一般为5μL或与试样同量)消除干扰。绘制铅标准曲线时也要加入与试样测定时等
（4）干燥恒温箱。 （5）瓷坩埚。 （6）压力消解器、压力消解罐或压力溶弹。 （7）可调式电热板、可调式电炉。 4. 分析步骤 （1）试样预处理：在采样和制备过程中，应注意不使试样污染；鱼类、肉类及蛋类 等水分含量高的鲜样，用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。 （2）试样消解（可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解） ① 压力消解罐消解法：称取 1 g～2 g 试样（精确到 0.001 g，干样、含脂肪高的试样 ＜1 g，鲜样＜2 g 或按压力消解罐使用说明书称取试样）于聚四氟乙烯内罐，加硝酸 2 mL～4 mL 浸泡过夜。再加过氧化氢 2 mL～3 mL（总量不能超过罐容积的 1/3）。盖好 内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120℃～140℃保持 3 h～4 h，在箱内自然冷却 至室温，用滴管将消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10 mL～25 mL 容量 瓶中，用水少量多次洗涤罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试 剂空白。 ② 干法灰化：称取 1 g～5 g 试样（精确到 0.001 g，根据铅含量而定）于瓷坩埚 中，先小火在可调式电热板上炭化至无烟，移入马弗炉 500℃±25℃灰化 6 h～8 h，冷 却。若个别试样灰化不彻底，则加 1 mL 混合酸在可调式电炉上小火加热，反复多次直 到消化完全，放冷，用硝酸将灰分溶解，用滴管将试样消化液洗入或过滤入（视消化 后试样的盐分而定）10 mL～25 mL 容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于 容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。 ③ 过硫酸铵灰化法：称取 1 g～5 g 试样（精确到 0.001 g）于瓷坩埚中，加 2 mL～ 4 mL 硝酸浸泡 1 h 以上，先小火炭化，冷却后加 2.00 g～3.00 g 过硫酸铵盖于上面，继 续炭化至不冒烟，转入马弗炉，500℃±25℃恒温 2 h，再升至 800℃，保持 20 min，冷 却，加 2 mL～3 mL 硝酸，用滴管将试样消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而 定）10 mL～25 mL 容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容 至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。 ④ 湿式消解法：称取试样 1 g～5 g（精确到 0.001 g）于锥形瓶或高脚烧杯中，放数 粒玻璃珠，加 10 mL 混合酸，加盖浸泡过夜，加一小漏斗于电炉上消解，若变棕黑色， 再加混合酸，直至冒白烟，消化液呈无色透明或略带黄色，放冷，用滴管将试样消化液洗 入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）10 mL～25 mL 容量瓶中，用水少量多次洗涤锥 形瓶或高脚烧杯，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。 （3）测定 ① 仪器条件：根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为波长 283.3 nm，狭缝 0.2 nm～1.0 nm，灯电流 5 mA～7 mA，干燥温度 120℃，20 s；灰化温度 450℃，持续 15 s～20 s，原子化温度：1700℃～2300℃，持续 4 s～5 s，背景校正为氘灯或塞曼效应。 ② 标准曲线绘制：吸取以上配制的铅标准使用液 10.0 ng/mL（或 μg/L），20.0 ng/mL（或 μg/L），40.0 ng/mL（或 μg/L），60.0 ng/mL（或 μg/L），80.0 ng/mL （或 μg/L）各 10 μL，注入石墨炉，测得其吸光值并求得吸光值与浓度关系的一元线 性回归方程。 ③ 试样测定：分别吸取样液和试剂空白液各 10 μL，注入石墨炉，测得其吸光 值，代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中铅含量。 ④ 基体改进剂的使用：对有干扰试样，则注入适量的基体改进剂磷酸二氢铵溶液 （一般为 5 μL 或与试样同量）消除干扰。绘制铅标准曲线时也要加入与试样测定时等
量的基体改进剂磷酸二氢铵溶液。 5.结果计算试样中铅含量按式(2-11)进行计算。 X=a-c)x×1000 …(2--1) m×1000×1000 式中：X一试样中铅含量，单位为毫克每千克或毫克每升(mgkg或mgL): c1一测定样液中铅含量，单位为纳克每毫升(ngmL): 空白液中铅含量，单位为纳克每毫升(gmL): 试样消化液定量总体积，单位为毫升(mL) m一试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL)。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数 字。 6.精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均 值的20%。 (二)氢化物原子荧光光谱法（第二法） 1.原理试样经酸热清化后，在酸性介质中，试样中的铅与明氢化钠(NaBH4)或硼氢 化钾(KBH4)反应生成挥发性铅的氢化物(PbH)。以氩气为载气，将氢化物导入电热石英 原子化器中原子化，在特制铅空心阴极灯 照射下，基态铅原 子被激发至高能态：在去活化回 到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与铅含量成正比，根据标准系列进行定量 2.试剂和材料 (1)硝酸十高氯酸混合酸(9+1)：分别量取硝酸900mL,高氯酸100mL,混匀。 (2)盐酸溶液(1+1)：量取250mL盐酸倒入250mL水中，混匀。 (3)草酸溶液(10gL):称取1.0g草酸，加水溶解至100mL,混匀 (4)铁化钾KFe(CN)溶液(1OOg/L):称取10.0g铁氰化钾，加水溶解并稀释 至100mL,混匀。 (5)氢氧化钠溶液(2gL)：称取2.0g氢氧化钠，溶于1L水中，混匀。 (6)硼氢化钠(NaBH)溶液(10e/L):称取5.0g氢化纳溶于500mL氢氧化钠溶液 (2L)中，混匀，用前现配。 (7)铅标准储备液(1.0mgmL)。 (8)铅标准应用液(1.0gmL)：精确吸取铅标准储备液(1.0mgmL),逐级稀释至 1.0 ug/mL. 3位器 (1)原子荧光光度计 (2)铅空心阴极灯 (3)电热板 (4)天平：感量为1mg 4.分析步骤 (1)试样清化：称取固体试样02g-2g,液体试样2.00g(mL)一1000g(mL)(均 精确到0.001 置于50mL~100mL消化容器中（锥形瓶 然后加入硝酸+高氯酸混合 酸(9+1)混合酸5mL一10mL摇匀浸泡，放置过夜。次日置于电热板上加热消解，至消 夜呈淡黄色或无色（如消解过程色洋较深，稍冷补加少量硝酸，继续消解），稍冷加入20L 水再继续加热赶酸，至消解液0.5mL~1.0mL止，冷却后用少量水转入25mL容量瓶中，并 加入盐酸(1+1)0.5mL,草酸溶液(10gL)0.5mL,摇匀，再加入铁氰化钾(100gL) 1.00mL,用水准确稀释定容至25mL,摇匀，放置30min后测定。同时做试剂空白
量的基体改进剂磷酸二氢铵溶液。 5. 结果计算 试样中铅含量按式（2-1-1）进行计算。 X＝ 1000 1000 ( ) 1000 0 1 m c c V …………………………………（2-1-1） 式中：X ——试样中铅含量，单位为毫克每千克或毫克每升（mg/kg或mg/L）； c1 ——测定样液中铅含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）； c0——空白液中铅含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）； V——试样消化液定量总体积，单位为毫升（mL）； m——试样质量或体积，单位为克或毫升（g 或 mL）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数 字。 6. 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均 值的20 %。 （二）氢化物原子荧光光谱法（第二法） 1. 原理 试样经酸热消化后，在酸性介质中，试样中的铅与硼氢化钠（NaBH4）或硼氢 化钾（KBH4）反应生成挥发性铅的氢化物（PbH4）。以氩气为载气，将氢化物导入电热石英 原子化器中原子化，在特制铅空心阴极灯照射下，基态铅原子被激发至高能态；在去活化回 到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与铅含量成正比，根据标准系列进行定量。 2. 试剂和材料 （1）硝酸＋高氯酸混合酸（9+1）：分别量取硝酸900 mL，高氯酸100 mL，混匀。 （2）盐酸溶液（1＋1）：量取250 mL盐酸倒入250 mL水中，混匀。 （3）草酸溶液（10 g/L）：称取1.0 g草酸，加水溶解至100 mL，混匀。 （4）铁氰化钾[K3Fe（CN）6]溶液（100 g／L）：称取10.0 g铁氰化钾，加水溶解并稀释 至100 mL，混匀。 （5）氢氧化钠溶液（2 g/L）：称取2.0 g氢氧化钠，溶于1 L水中，混匀。 （6）硼氢化钠（NaBH4）溶液（10 g/L）：称取5.0 g硼氢化钠溶于500 mL氢氧化钠溶液 （2 g/L）中，混匀，用前现配。 （7）铅标准储备液（1.0 mg/mL）。 （8）铅标准应用液（1.0 μg/mL）：精确吸取铅标准储备液（1.0 mg/mL），逐级稀释至 1.0 μg/mL。 3. 仪器 （1）原子荧光光度计。 （2）铅空心阴极灯。 （3）电热板。 （4）天平：感量为1 mg。 4. 分析步骤 （1）试样消化：称取固体试样0.2 g～2 g，液体试样2.00 g（mL）～10.00 g（mL）（均 精确到0.001 g），置于50 mL～100 mL消化容器中（锥形瓶），然后加入硝酸＋高氯酸混合 酸（9＋1）混合酸5 mL～10 mL摇匀浸泡，放置过夜。次日置于电热板上加热消解，至消化 液呈淡黄色或无色（如消解过程色泽较深，稍冷补加少量硝酸，继续消解），稍冷加入20 mL 水再继续加热赶酸，至消解液0.5 mL～1.0 mL止，冷却后用少量水转入25 mL容量瓶中，并 加入盐酸（1＋1）0.5 mL，草酸溶液（10 g/L）0.5 mL，摇匀，再加入铁氰化钾（100 g/L） 1.00 mL，用水准确稀释定容至25 mL，摇匀，放置30 min后测定。同时做试剂空白
(2)标准系列制备：取25mL的容量瓶7支，依次准确加入铅标准应用液(1.00uemL) 0mL、0.125mL、025mL、0.50mL、0.75mL、1.00mL、1.25mL(各相当于铅浓度0.0n 5.0 ng/mL 10.0 ng/mL 20.0 ng/mL 、30.0ngml 40.ng/mL 后，加入0.5mL盐酸(1+1)和0.5mL草酸溶液(10g/L)摇匀，再加入铁氰化钾溶液(100 gL)1.0mL,用水稀释至刻度，摇匀。放置30min后待测。 (3)利定 ①仪器参考条件：负高压：323V:铅空心阴极灯电流：75mA:原子化器：炉温750℃ 800℃，炉高8mm:氢气流流速：载气800 min:屏蔽气： 10O0 mL/min:加还原剂时间； 7.0s:读数时间：15s:延迟时间：0s:测量方式：标准曲线法：读数方式：峰面积：进样 体积：2.0mL。 ②测量方式：设定好仪器的最佳条件，逐步将炉温升至所需温度，稳定10mn~20 m后开始测量：连续用标准样空白和试样消化液，试样测定结果按式2-1-2)计算。 5.结果计算试样中铅含量按式(2-1-2)进行计算。 x=(I-Co)xV x1000 (2-1-2) m×1000×1000 式中：X一试样中铅含量，单位为毫克每千克或毫克每升(mgkg或mgL): CI- _试样消化液测定浓度，单位为纳古每亭升(/ml) 试剂空白液测定浓度，单位为纳克每毫升(ngmL) 试样消化液定量总体积，单位为毫升(mL): 试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL)。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 6.结密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均 值的10 (三)火焰原子吸收光谱法（第三法） 1.原理试样经处理后，铅离子在一定H条件下与二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC) 形成络合物，经4甲基2戊酮(MBK)茶取分离，导入原子吸收光谱仪中，经火焰原子化 后，吸收2833m共振线，其吸收量与铅的含量成正比，与标准系列比较定量 2.试剂和材料 (1)混合酸 :硝酸十高氯酸(9十1D。 (2)硫酸铵溶液(300gL)：称取30.0g硫酸铵(NH4)2S0,用水溶解并加水至100 (3)柠檬铵溶液(250gL):称取25.0g柠檬酸铵，用水溶解并加水至100mL。 (4)浪百里粉蓝水溶液(1几) (5) 上乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)溶液(50gL)：称取5g二乙基二硫代氨基 甲酸钠，用水溶解并加水至100mL。 (6)氨水(1+1)。 (7)4甲基-2-戊酮(MBK)。 (8)铅标准溶液 ①铅标准储备液：精密称取1.000g金属铅(99.99%)分次加少量硝酸。(1+1)加热溶 解，总量不超过37ml 移入1000mL容量瓶， 加水至刻度。此溶液每毫升含1.0mg铅 ②铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液1.0mL于10OmL容量瓶中，加硝酸(0.5moML 或硝酸(1.0molL)至刻度。如此经多次稀释成每毫升含10.0ng,20.0ng,40.0ng,60.0ng, 80.0ng铅的标准使用液
（2）标准系列制备：取25 mL的容量瓶7支，依次准确加入铅标准应用液（1.00 μg/mL） 0 mL、0.125 mL、0.25 mL、0.50 mL、0.75 mL、1.00 mL、1.25 mL（各相当于铅浓度0.0 ng/mL、 5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL、30.0 ng/mL、40.0 ng/mL、50.0 ng/mL）用少量水稀释 后，加入0.5 mL盐酸（1＋1）和0.5 mL草酸溶液（10 g/L）摇匀，再加入铁氰化钾溶液（100 g/L）1.0 mL，用水稀释至刻度，摇匀。放置30 min后待测。 （3）测定 ① 仪器参考条件：负高压：323 V；铅空心阴极灯电流：75 mA；原子化器：炉温750℃～ 800℃，炉高8 mm；氩气流流速：载气800 mL/min；屏蔽气：1000 mL/min；加还原剂时间： 7.0 s；读数时间：15 s；延迟时间：0 s；测量方式：标准曲线法；读数方式：峰面积；进样 体积：2.0 mL。 ② 测量方式：设定好仪器的最佳条件，逐步将炉温升至所需温度，稳定10 min～20 min后开始测量：连续用标准样空白和试样消化液，试样测定结果按式2-1-2）计算。 5. 结果计算 试样中铅含量按式（2-1-2）进行计算。 X＝ 1000 1000 ( ) 1000 0 1 m c c V …………………………（2-1-2） 式中：X ——试样中铅含量，单位为毫克每千克或毫克每升（mg/kg或mg/L）； c1 ——试样消化液测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； c0——试剂空白液测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； V——试样消化液定量总体积，单位为毫升（mL）； m——试样质量或体积，单位为克或毫升（g或mL）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 6. 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均 值的10%。 （三）火焰原子吸收光谱法（第三法） 1. 原理 试样经处理后，铅离子在一定pH条件下与二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDTC） 形成络合物，经4-甲基-2-戊酮（MIBK）萃取分离，导入原子吸收光谱仪中，经火焰原子化 后，吸收283.3nm共振线，其吸收量与铅的含量成正比，与标准系列比较定量。 2. 试剂和材料 （1）混合酸：硝酸＋高氯酸（9＋l）。 （2）硫酸铵溶液（300 g/L）：称取30.0 g硫酸铵[（NH4）2SO4]，用水溶解并加水至100 mL。 （3）柠檬铵溶液（250 g/L）：称取25.0 g柠檬酸铵，用水溶解并加水至100 mL。 （4）溴百里酚蓝水溶液（1 g/L）。 （5）二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDTC）溶液（50 g/L）：称取5 g 二乙基二硫代氨基 甲酸钠，用水溶解并加水至100 mL。 （6）氨水（1＋1）。 （7）4-甲基-2-戊酮（MIBK）。 （8）铅标准溶液 ① 铅标准储备液：精密称取1.000 g金属铅（99.99%）分次加少量硝酸。（1＋1）加热溶 解，总量不超过37 mL，移入1 000 mL容量瓶，加水至刻度。此溶液每毫升含1.0 mg铅。 ② 铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液1.0mL于100mL容量瓶中，加硝酸（0.5 mol/L） 或硝酸（1.0 mo1/L）至刻度。如此经多次稀释成每毫升含10.0 ng，20.0 ng，40.0 ng，60.0 ng， 80.0 ng铅的标准使用液
(9)盐酸(1+11)：取10mL盐酸加入110mL水中，混匀。 (10)磷酸溶液(1+10)：取10mL磷酸加入100mL水中，混匀。 3.仪器 (1)原子吸收光谱仪火焰原子化器 (2)马弗炉。 (3)天平：感量为1mg。 (4)干燥恒温箱。 (5)瓷坩埚。 (6)压力消解 、压力消解罐或压力溶弹 (7)可调式电热板、可调式电炉。 4.分析步骤 (1)试样处理：高、蛋、水产及乳制品，取可食部分充分混匀。称取5g一10g(精确 到0.01g于瓷坩据中，小火炭化，然后移入马弗炉中，500℃以下灰化16h后，取出坩埚 放冷后再加少量混合酸(9+1，小火加热，不使干，必要时再加少许混合酸，如此反复处 理，直至残渣中无炭料 待坩埚稍冷，加10mL盐酸(1+11)，溶解残渣并移入50mL容量瓶 中，再用水反复洗涤坩埚，洗液并入容量瓶中，并稀释至刻度，混匀备用。 取与试样相同量的混合酸和盐酸(1+11)，按同一操作方法作试剂空白试验。 乳类经混匀后，量取50L,置于瓷坩埚中，加磷酸(1+10)，在水浴上蒸干，再加小 火炭化，以下按上述自“然后移入马弗炉中起依法操作 (2)萃取分离：视试样情况，吸取250mL 50.0 L上述制备的样液及试剂空白液，分 别置于125mL分液漏斗中，补加水至60mL。加2mL柠檬酸铵溶液，3一5滴溴百里酚蓝水溶 液，用氨水(1+1)调pH至溶液由黄变蓝，加硫酸铵溶液10.0mL,DDTC溶液10mL,摇匀。 放置5min左右，加入10.0 mL MIBK,剧烈振摇提取1min,静置分层后，弃去水层，将MBK 层放入10mL带塞刻度管中，备用。 分别吸取铅标准使用液0mL,025mL,0.50mL,1.00mL 1.50ml 2.00m (相当 于0g,25g,50g10.0g,15.0g,20.0g铅)于125mL分液漏斗中。与试样相同 方法萃取 (3)测定：仪器参考条件：空心阴极灯电流8mA:共振线283.3m:狭缝0.4nm:空 气流量8L/min 5.结果计算试样中铅含量按式(2-13)进行计算 K=-c)xg×100 (2-1-3) m×3/,×1000 式中：X一试样中铅的含量，单位为毫克每千克或毫克每升(mgkg或mgL): 测定用试样中铅的含量，单位为微克每毫升(gmL 试济 空白液中铅的含量 内微克每毫升 (ugmL） -试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL): V -试样萃取液体积，单位为毫升(L): —试样处理液的总体积，单位为毫升(mL): 一测定用试样处理液的总体积，单位为亲升(mL) 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示 ,结果保留两位有效数字 6.精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值 的20%。 (四)二硫腙比色法（第四法）
（9）盐酸（1+11）：取10 mL 盐酸加入110 mL 水中，混匀。 （10）磷酸溶液（1+10）：取10 mL 磷酸加入100 mL 水中，混匀。 3. 仪器 （1）原子吸收光谱仪火焰原子化器。 （2）马弗炉。 （3）天平：感量为 1 mg。 （4）干燥恒温箱。 （5）瓷坩埚。 （6）压力消解器、压力消解罐或压力溶弹。 （7）可调式电热板、可调式电炉。 4. 分析步骤 （1）试样处理：禽、蛋、水产及乳制品，取可食部分充分混匀。称取5 g～10 g（精确 到0.01 g）于瓷坩埚中，小火炭化，然后移入马弗炉中，500℃以下灰化16 h后，取出坩埚， 放冷后再加少量混合酸（9+1），小火加热，不使干涸，必要时再加少许混合酸，如此反复处 理，直至残渣中无炭粒，待坩埚稍冷，加10 mL盐酸（1＋11），溶解残渣并移入50 mL容量瓶 中，再用水反复洗涤坩埚，洗液并入容量瓶中，并稀释至刻度，混匀备用。 取与试样相同量的混合酸和盐酸（1＋11），按同一操作方法作试剂空白试验。 乳类经混匀后，量取50 mL，置于瓷坩埚中，加磷酸（1＋10），在水浴上蒸干，再加小 火炭化，以下按上述自“然后移入马弗炉中”起依法操作。 （2）萃取分离：视试样情况，吸取25.0 mL～50.0 mL上述制备的样液及试剂空白液，分 别置于125 mL分液漏斗中，补加水至60 mL。加2 mL柠檬酸铵溶液，3～5滴溴百里酚蓝水溶 液，用氨水（1＋1）调pH至溶液由黄变蓝，加硫酸铵溶液10.0 mL，DDTC溶液10 mL，摇匀。 放置5 min左右，加入10.0 mL MIBK，剧烈振摇提取1 min，静置分层后，弃去水层，将MIBK 层放入10 mL带塞刻度管中，备用。 分别吸取铅标准使用液0 mL，0.25 mL，0.50 mL，1.00 mL，1.50 mL，2.00 mL（相当 于0 μg，2.5 μg，5.0 μg，10.0 μg，15.0 μg，20.0 μg铅）于125 mL分液漏斗中。与试样相同 方法萃取。 （3）测定：仪器参考条件：空心阴极灯电流 8 mA；共振线283.3 nm；狭缝0.4 nm；空 气流量8 L／min； 5. 结果计算 试样中铅含量按式（2-1-3）进行计算。 X＝ / 1000 ( ) 1000 3 2 1 0 1 m V V c c V ……………………………………（2-1-3） 式中：X ——试样中铅的含量, 单位为毫克每千克或毫克每升（mg/kg 或mg/L）； c1——测定用试样中铅的含量，单位为微克每毫升（μg/mL）； c0——试剂空白液中铅的含量，单位为微克每毫升（μg/mL）； m——试样质量或体积，单位为克或毫升（g 或mL）； V1——试样萃取液体积，单位为毫升（mL）； V2——试样处理液的总体积，单位为毫升（mL）； V3——测定用试样处理液的总体积，单位为毫升（mL）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 6. 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值 的20%。 （四）二硫腙比色法（第四法）
1.原理试样经消化后，在pH8.5~9.0时，铅离子与二硫腙生成红色络合物，溶于三氯 甲烷。加入柠檬酸铵、氰化钾和盐酸羟胺等，防止铁、铜、锌等离子干扰，与标准系列比较 定量。 2.试剂 (1)氨水(1+1) (2)盐酸(1十1)：量取100mL盐酸，加入100mL水中。 (3)酚红指示液(1aL)：称取010a酚红，用少量名次乙醇溶解后移入100mL容量瓶 中并定容至刻度 (4)盐酸羟胺溶液(200gL)：称取20.0g盐酸羟胺，加水溶解至约50mL,加2滴酚红 指示液，加氨水(1+1)，调pH至8.5~9.0（由黄变红，再多加2滴），用二硫腙-三氯甲烷溶液 提取至三氯甲烷层绿色不变为止，再用三氯甲烷洗2次，弃去三氯甲烷层，水层加盐酸(1十 1)呈酸性，加水至100mL。 (5)柠檬酸铵溶液(200gL):称取50g柠檬酸铵溶于100mL水中，加2滴酚红指示液 加氨水(1+1) H至8.5 用二 。三氯甲烷溶液提取数次 每次10mL~ 20 ml 至三氯甲烷层绿色不变为止，弃去三氯甲烷层，再用三氯甲烷洗2次，每次5mL,弃去三氯 甲烷层，加水稀释至250mL。 (6)氟化钾溶液(100g/L)：称取10.0g氯化钾，用水溶解后稀释至100mL。 (7)三甲烷：不应含氧化物 ①检查方法：量取10mL 氯甲烷，加25mL新煮沸过的水，振摇3mi ,静置分层 后，取10mL水溶液，加数滴碘化钾溶液(150gL)及淀粉指示液，振摇后应不显蓝色 ②处理方法：于三氯甲烷中加入110~1/20体积的疏代硫酸钠溶液(200gL)洗 涤，再用水洗后加入少量无水氯化钙脱水后进行蒸馏，弃去最初及最后的十分之一馏出 液，收集中间痛出液备用。 (8)淀粉指示液：称取0.5g可溶性淀粉 ,加5mL水搅匀后，慢慢倒入100mL沸水 中，边倒边搅拌，煮沸，放冷备用，临用时配制， (9)硝酸(1十99)：量取1mL硝酸，加入99mL水中。 (10)二硫踪.三氯甲烷溶液(0.5gL)：保存冰箱中，必要时用下述方法纯化。 称取0.5g研细的二硫腙.溶于50L.三氯甲烷中，如不全溶，可用滤纸过滤于250ml 分液漏斗中，用氨水(1+99)提取3次，每次100mL,将提取液用棉花过滤至500mL分 液漏斗中 用盐酸(1十1) ,将沉淀出的 二硫腙用三氯甲烷 取2一3次， 每次20 l,合并三氯甲烷层，用等量水洗涤2次，弃去洗涤液，在50℃水浴上蒸去三氯甲院。清 制的二疏腙置疏酸干燥器中，干燥备用。或将沉淀出的二硫踪用200mL,200mL,100mL 三氯甲烷提取3次，合并三氯甲烷层为二硫腙溶液。 (11)一疏院伸用液.吸取10mL一疏腙溶液.加三氯甲烷至10mL,混匀。用1cm出 色杯，以三氯甲烷调节零点 于波长510nm处测吸光度(A),用式(2-1-4)计算出配制 100mL二硫腙使用液(70%透光率)所需二硫腙溶液的毫升数(V) =10(2-1g70)=1.55 (214 A （12)硝酸.硫酸混合液(4+1) (13)铅标准溶液(1.0mgmL):准确称取0.1598g硝酸铅，加10mL硝酸(1+ 99),全部溶解后，移入100mL容量瓶中 加水稀释至刻度 (14)铅标准使用液(10.0μgmL)：吸取1.0mL铅标准溶液，置于100mL容量瓶 中，加水稀释至刻度
1. 原理 试样经消化后，在pH 8.5～9.0时，铅离子与二硫腙生成红色络合物，溶于三氯 甲烷。加入柠檬酸铵、氰化钾和盐酸羟胺等，防止铁、铜、锌等离子干扰，与标准系列比较 定量。 2. 试剂 （1）氨水（1+1）。 （2）盐酸（1＋1）：量取100 mL盐酸，加入100 mL水中。 （3）酚红指示液（1 g/L）：称取0.10 g酚红，用少量多次乙醇溶解后移入100 mL容量瓶 中并定容至刻度。 （4）盐酸羟胺溶液（200 g/L）：称取20.0 g盐酸羟胺，加水溶解至约50 mL，加2滴酚红 指示液，加氨水（1＋l），调pH至8.5～9.0（由黄变红，再多加2滴），用二硫腙-三氯甲烷溶液 提取至三氯甲烷层绿色不变为止，再用三氯甲烷洗2次，弃去三氯甲烷层，水层加盐酸（1＋ 1）呈酸性，加水至100 mL。 （5）柠檬酸铵溶液（200 g/L）：称取50 g柠檬酸铵溶于100 mL水中，加2滴酚红指示液， 加氨水（1＋1），调pH至8.5～9.0，用二硫腙-三氯甲烷溶液提取数次，每次10 mL～20 mL， 至三氯甲烷层绿色不变为止，弃去三氯甲烷层，再用三氯甲烷洗2次，每次5 mL，弃去三氯 甲烷层，加水稀释至250 mL。 （6）氰化钾溶液（100 g/L）：称取10.0 g 氰化钾，用水溶解后稀释至100 mL。 （7）三氯甲烷：不应含氧化物。 ① 检查方法：量取10 mL 三氯甲烷，加25 mL 新煮沸过的水，振摇3 min，静置分层 后，取10 mL水溶液，加数滴碘化钾溶液（150 g/L）及淀粉指示液，振摇后应不显蓝色。 ② 处理方法：于三氯甲烷中加入 1/10～1/20 体积的硫代硫酸钠溶液（200 g/L）洗 涤，再用水洗后加入少量无水氯化钙脱水后进行蒸馏，弃去最初及最后的十分之一馏出 液，收集中间馏出液备用。 （8）淀粉指示液：称取0.5 g可溶性淀粉，加5 mL水搅匀后，慢慢倒入100 mL沸水 中，边倒边搅拌，煮沸，放冷备用，临用时配制。 （9）硝酸（1＋99）：量取1 mL硝酸，加入99 mL水中。 （10）二硫腙-三氯甲烷溶液（0.5g/L）：保存冰箱中，必要时用下述方法纯化。 称取0.5 g 研细的二硫腙, 溶于50 mL 三氯甲烷中，如不全溶，可用滤纸过滤于250 mL 分液漏斗中，用氨水（1＋99）提取3次，每次100 mL，将提取液用棉花过滤至500 mL 分 液漏斗中，用盐酸（1＋1）调至酸性，将沉淀出的二硫腙用三氯甲烷提取2～3 次，每次20 mL，合并三氯甲烷层，用等量水洗涤2次，弃去洗涤液，在50℃水浴上蒸去三氯甲烷。精 制的二硫腙置硫酸干燥器中，干燥备用。或将沉淀出的二硫腙用200 mL，200 mL，100 mL 三氯甲烷提取3次，合并三氯甲烷层为二硫腙溶液。 （11）二硫腙使用液：吸取1.0 mL二硫腙溶液，加三氯甲烷至10 mL，混匀。用1 cm比 色杯，以三氯甲烷调节零点，于波长510 nm处测吸光度（A），用式（2-1-4）计算出配制 100 mL二硫腙使用液（70%透光率）所需二硫腙溶液的毫升数（V）。 V= ＝ ……………………………………（2-1-4） （12）硝酸-硫酸混合液（4＋1）。 （13）铅标准溶液（1.0 mg/mL）：准确称取0.1598 g硝酸铅，加10 mL硝酸（1＋ 99），全部溶解后，移入100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度。 （14）铅标准使用液（10.0 μg/mL）：吸取1.0 mL 铅标准溶液，置于100 mL容量瓶 中，加水稀释至刻度。 A 10(2 lg 70) A 1.55
3.仪器所用玻璃仪器均用硝酸(10%~20%)浸泡24h以上，用自来水反复冲洗，最 后用水冲洗干净。 (1)分光光度计 (2)天平：感量为1mg 4.分析步骤 (1)试样预处理：同石墨炉原子吸收光谱法。 (2)试样消化 ①硝酸硫酸法 称取5g或10g的粉碎样品（精确到0.01g)，置于250mL 0mL定氢瓶中，先加水少许使湿润，加数粒玻璃联、105ml酸，放置片刻 火缓缓加热，待作用缓和，放冷。沿瓶壁加入5mL或10mL硫酸，再加热，至瓶中液体开 始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸至有机质分解完全。加大火力，至产生白烟，待瓶口 白烟日净后，瓶内液体再产生白烟为消化完全，该溶液应澄清无色或微带蕾色，放冷（在 操作过程中应注意防止爆沸或爆炸) L水煮沸，除去残余的硝酸至 产生白烟尖 止，如此处理2次，放冷。将冷后的溶液移入50mL或100mL容量瓶中 用水洗涤定氮瓶 洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混匀。定容后的溶液每10mL相当于1g样品，相 当加入硫酸量1mL。取与消化试样相同量的硝酸和硫酸，按同一方法做试剂空白试验。 b.肉类等水分含量高的新鲜试样及水产品取可食部分样品捣成匀浆，称取5g或10g试 样（精确至0.01g 海产藻类、贝类可适当减少取样量)，置于250mL~500mL定氨瓶 加数粒玻璃珠，5mL~10ml酸，混匀后，以下按上述自沿瓶壁加入5ml或10ml 疏酸....”起依法操作。 c.液体样品：吸取10.0mL或20.0mL置于250mL~500mL定氨瓶中，加数粒玻璃珠 5mL~15mL硝酸。以下按上述自“放置片刻“起依法操作，但定容后的溶液每10mL 相当于2mL试样 ②灰化 a含水分少的食品：称取5g试样（精确至0.01g)，置于石英或瓷坩埚中，加热至炭 化，然后移入马弗炉中，500℃灰化3，放冷，取出坩埚，加硝酸(1+1)，润湿灰分， 用小火蒸干，在500℃烧1h,放冷。取出坩埚。加1mL硝酸(1+1)，加热，使灰分溶 解，移入50mL容量瓶中，用水洗涤坩埚，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。 含水分多的食品或液体试样：称取5.0g或吸取5.00mL试样，置于 蒸发皿中，先在 水浴上蒸干，再按上述自加热至炭化 ”起依法深作 (2)测定：吸取10.0mL消化后的定容溶液和同量的试剂空白液，分别置于125mL分 液漏斗中，各加水至20mL。 吸取0mL,010mL,0.20mL,0.30mL,0.40mL,050mL铅标准使用液（相当于0.0 g,10g,2.0g,30g,40g,50g铅)，分别置于125mL分液漏斗中，各加随酸4 99 mL. 于试样消化液、试剂空白液和铅标准液中各加2.0mL柠檬酸铵溶液(200gL),1mL 盐酸羟胺溶液(200gL)和2滴酚红指示液，用氨水(1+1)调至红色，再各加2.0mL氰化 钾溶液(100gL),混匀。各加5.0mL二硫腙使用液，剧烈振摇1min,静置分层后，三氯 甲烷层经脱脂棉法入」cm比色杯中，以三氯甲烷调节零点于波长510m处测吸光度，各点 减去零管吸收值后，绘制标准曲线或计算一元回归方程，试样与曲线比较。 5.结果计算试样中铅的含量按式(2-1-5)进行计算 X=(m,-m:)x1000 ...(2-1-5 m:×V,/V×1000
3. 仪器 所用玻璃仪器均用硝酸（10％～20％）浸泡24 h以上，用自来水反复冲洗，最 后用水冲洗干净。 （1）分光光度计。 （2）天平：感量为1 mg。 4. 分析步骤 （1）试样预处理：同石墨炉原子吸收光谱法。 （2）试样消化 ① 硝酸-硫酸法： a. 含水分少的固体食品：称取5 g或10 g的粉碎样品（精确到0.01 g），置于250 mL～ 500 mL定氮瓶中，先加水少许使湿润，加数粒玻璃珠、10 mL～15 mL硝酸，放置片刻，小 火缓缓加热，待作用缓和，放冷。沿瓶壁加入5 mL 或10 mL硫酸，再加热，至瓶中液体开 始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸至有机质分解完全。加大火力，至产生白烟，待瓶口 白烟冒净后，瓶内液体再产生白烟为消化完全，该溶液应澄清无色或微带黄色，放冷（在 操作过程中应注意防止爆沸或爆炸）。加20 mL水煮沸，除去残余的硝酸至产生白烟为 止，如此处理2次，放冷。将冷后的溶液移入50 mL或100 mL容量瓶中，用水洗涤定氮瓶， 洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混匀。定容后的溶液每10 mL相当于1 g样品，相 当加入硫酸量1 mL。取与消化试样相同量的硝酸和硫酸，按同一方法做试剂空白试验。 b. 肉类等水分含量高的新鲜试样及水产品取可食部分样品捣成匀浆，称取5 g或10 g试 样（精确至0.01 g，海产藻类、贝类可适当减少取样量），置于250 mL～500 mL 定氮瓶 中，加数粒玻璃珠，5 mL～10 mL硝酸，混匀后，以下按上述自“沿瓶壁加入5 mL或10 mL 硫酸……”起依法操作。 c. 液体样品：吸取10.0 mL或20.0 mL置于250 mL～500 mL定氮瓶中，加数粒玻璃珠、 5 mL～15 mL硝酸。以下按上述自“放置片刻……”起依法操作，但定容后的溶液每10 mL 相当于2 mL试样。 ② 灰化法： a. 含水分少的食品：称取5 g试样（精确至0.01 g），置于石英或瓷坩埚中，加热至炭 化，然后移入马弗炉中，500℃灰化3 h，放冷，取出坩埚，加硝酸（1＋1），润湿灰分， 用小火蒸干，在500℃烧1 h，放冷。取出坩埚。加1 mL硝酸（1＋l），加热，使灰分溶 解，移入50 mL容量瓶中，用水洗涤坩埚，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。 b. 含水分多的食品或液体试样：称取5.0 g或吸取5.00 mL试样，置于蒸发皿中，先在 水浴上蒸干，再按上述自“加热至炭化……”起依法操作。 （2）测定：吸取10.0mL消化后的定容溶液和同量的试剂空白液，分别置于125 mL分 液漏斗中，各加水至20 mL。 吸取0 mL，0.10 mL，0.20 mL，0.30 mL，0.40 mL，0.50 mL铅标准使用液（相当于0.0 μg，1.0 μg，2.0 μg，3.0 μg，4.0 μg，5.0 μg铅），分别置于125 mL分液漏斗中，各加硝酸（1 ＋99）至20 mL。 于试样消化液、试剂空白液和铅标准液中各加2.0 mL柠檬酸铵溶液（200 g/L），1 mL 盐酸羟胺溶液（200 g/L）和2滴酚红指示液，用氨水（1＋1）调至红色，再各加2.0 mL氰化 钾溶液（100 g/L），混匀。各加5.0 mL二硫腙使用液，剧烈振摇1 min，静置分层后，三氯 甲烷层经脱脂棉滤入l cm比色杯中，以三氯甲烷调节零点于波长510 nm处测吸光度，各点 减去零管吸收值后，绘制标准曲线或计算一元回归方程，试样与曲线比较。 5. 结果计算 试样中铅的含量按式（2-1-5）进行计算。 X＝ / 1000 ( ) 1000 3 2 1 1 2 m V V m m ………………………………（2-1-5）
式中：K一试样中铅的含量，单位为毫克每千克或毫克每升(mgkg或mgL): m 测定用试样液中铅的质量，单位为微克(g: m2- -试剂空白液中铅的质量，单位为微克(g n -试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL): h—试样消化液的总体积，单位为毫升(mL): ?一测定用试样处理液的总体积，单位为毫升(mL)。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 6.精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的 对差值不得超过算术平均值 的10%， (五)单扫描极谱法（第五法） 1.原理试样经消解后，铅以离子形式存在。在酸性介质中，Pb+与厂形成的PbL络 离子具有电活性，在滴汞电极上产生还原电流。峰电流与铅含量呈线性关系，以标准系列比 较定量。 2.试剂 (1)底液：称取5.0g碘化钾，8.0g酒石酸钾钠，0.5g抗杯血酸于500L烧杯中，加入 300mL水溶解后，再加入10mL盐酸，移入500mL容量瓶中，加水至刻度（储藏于冰箱，可 保存两个月)。 (2)铅标准中备溶液(10。 ml)：准确称取01000金屈铅（含量9999%）千烧 杯中加2mL(1+1)硝酸溶液，加热溶解，冷却后定量移入100mL容量瓶并加水至刻度 混匀 (3)铅标准使用溶液(10.0gmL)：临用时，吸取铅标准贮备溶液1.00mL于100 mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。 (4)混合酸：硝酸.高氨酸(4+1)。量取80mL硝酸，加入20mL高氯酸，混匀. 3.仪器和设备所用玻璃仪器均应用10%硝酸溶液浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用蒸 馏水洗干净，干燥备用。 (1)极谱分析仪。 (2)带电子调节器的万用电炉。 (3)天平：感量为1mg。 4.分析步骤 (I)极谱分析参考条件：单扫描极谱法(SSP法)。选择起始电位： 350mV,终止电 位：一850mV,扫描速度300mV/s,三电极，二次导数，静止时间：5s及适当量程。在峰 电位(Ep)一470mV处，记录铅的峰电流。 (2)标准曲线绘制：准确吸取铅标准溶液0mL,0.05mL,0.10mL,0.20mL,0.30mL, 00m相当于0050e20080成系10比色管中 加底液至100mL,混 匀。将各管溶液依次移入电解池 按上述极谱分 参考条件下测定，分别记录铅的峰电流。以含量为横坐标，其对应的峰电流为纵坐标，绘制 标准曲线。 (3)试样处理：鱼类、肉类等水分含量高的新鲜试样，用匀浆机制成匀浆，储于塑料 瓶 ①试样处理（除食盐、白糖外，知粮食、豆类、糕点、茶叶、肉类等：称取128 试样（精确至0.1g)于50m 角瓶中，加入0mL20mL混合酸，加盖浸泡过夜.置带 电子调节器万用电炉上的低档位加热。若消解液颜色逐渐加深，星现棕黑色时，移开万用 电炉，冷却，补加适量硝酸，继续加热消解。待溶液颜色不再加深，呈无色透明或略带黄 色，并冒白烟，可高档位驱赶剩余酸液，至近干，在低档位加热得白色残渣，待测。同时
式中：X——试样中铅的含量，单位为毫克每千克或毫克每升（mg/kg或mg/L）； m1——测定用试样液中铅的质量，单位为微克（μg）； m2——试剂空白液中铅的质量，单位为微克（μg）； m3——试样质量或体积，单位为克或毫升（g或mL）； VI ——试样消化液的总体积，单位为毫升（mL）； V2 ——测定用试样处理液的总体积，单位为毫升（mL）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 6. 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值 的10%。 （五）单扫描极谱法（第五法） 1. 原理 试样经消解后，铅以离子形式存在。在酸性介质中，Pb 2+与I －形成的PbI4 2－络 离子具有电活性，在滴汞电极上产生还原电流。峰电流与铅含量呈线性关系，以标准系列比 较定量。 2. 试剂 （1）底液：称取5.0 g碘化钾，8.0 g酒石酸钾钠，0.5 g抗坏血酸于500 mL烧杯中，加入 300 mL水溶解后，再加入10 mL盐酸，移入500 mL容量瓶中，加水至刻度（储藏于冰箱，可 保存两个月）。 （2）铅标准贮备溶液（1.0 mg/mL）：准确称取0.1000 g金属铅（含量99.99 %）于烧 杯中加2 mL（1+1）硝酸溶液，加热溶解，冷却后定量移入100 mL 容量瓶并加水至刻度， 混匀。 （3）铅标准使用溶液（10.0 μg/mL）：临用时，吸取铅标准贮备溶液1.00 mL于100 mL 容量瓶中，加水至刻度，混匀。 （4）混合酸：硝酸-高氯酸（4＋1）。量取80 mL硝酸，加入20 mL高氯酸，混匀。 3. 仪器和设备 所用玻璃仪器均应用10%硝酸溶液浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用蒸 馏水洗干净，干燥备用。 （1）极谱分析仪。 （2）带电子调节器的万用电炉。 （3）天平：感量为1 mg。 4. 分析步骤 （1）极谱分析参考条件：单扫描极谱法（SSP法）。选择起始电位：－350mV，终止电 位：－850 mV，扫描速度300 mV／s，三电极，二次导数，静止时间：5 s及适当量程。在峰 电位（Ep）－470 mV处，记录铅的峰电流。 （2）标准曲线绘制：准确吸取铅标准溶液0 mL，0.05 mL，0.10 mL，0.20 mL，0.30 mL， 0.40 mL（相当于含0 μg，0.5 μg，1.0 μg，2.0 μg，3.0 μg，4.0 μg铅）于6支10 mL比色管中， 加底液至10.0 mL，混匀。将各管溶液依次移入电解池，置于三电极系统。按上述极谱分析 参考条件下测定，分别记录铅的峰电流。以含量为横坐标，其对应的峰电流为纵坐标，绘制 标准曲线。 （3）试样处理：鱼类、肉类等水分含量高的新鲜试样，用匀浆机制成匀浆，储于塑料 瓶。 ① 试样处理（除食盐、白糖外，如粮食、豆类、糕点、茶叶、肉类等）：称取1 g～2 g 试样（精确至0.1 g）于50 mL三角瓶中，加入10 mL～20 mL混合酸，加盖浸泡过夜。置带 电子调节器万用电炉上的低档位加热。若消解液颜色逐渐加深，呈现棕黑色时，移开万用 电炉，冷却，补加适量硝酸，继续加热消解。待溶液颜色不再加深，呈无色透明或略带黄 色，并冒白烟，可高档位驱赶剩余酸液，至近干，在低档位加热得白色残渣，待测。同时
作一试剂空白。 ②液体试样：称取2试样（精确至01g)于50mL三角瓶中（含乙醇、二氧化碳的试 样应置于80C水浴上驱赶) ,加入1mL~10mL混合酸，于带电子调节器万用电炉上的低 档位加热，以下步骤按上述“试样处理项下操作，待测 (4)试样测定：于上述待测试样及试剂空白瓶中加入10.0L底液，溶解残渣并移入电 解池。以下按4.(2)“标准曲线绘制项下操作。分别记录试样及试剂空白的峰电流，用标准 曲线法计算试样中铅含量。 5.结果计算试样中铅含量按式(2-1-6)进行计算。 X=4-A)x1000 (2-1-6) m×1000 式中：K一试样中铅的含量，单位为毫克每千克或毫克每升(mgkg或mgL): A一由标准曲线上查得测定样液中铅的质量，单位为微支(e): 由标准曲线上查得试剂空白液中铅质量，单位为微克(g) 式样质量或体积， 单位为克或毫升(g或mL)。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 6.精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值 的5.0%。 二、动物性食品中镉的测定 GB/T5009.15-2003《食品中镉的测定》适用于各类食品中镉的测定。 本方法检出限：石墨炉原子吸收光谱法为0.1gkg:火焰原子化法为5.0gkg:比色法 gkg:原子荧光法为12ukg:标准曲线线性范围为0g一50 石思炉原子吸收光普法（第一法) 1.原理 试样 灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中 电热原子化后 吸收228.8m共振线，在一定浓度范围，其吸光度与镉含量成正比，与标准系列比较定量。 2.试剂 (1)酯期 ())者称 (3)过氧化氢(30%)。 (4)高氯酸 (5)硝酸(1十1)：取50mL硝酸，慢慢加入50mL水中。 (6)硝酸(0.5molL):取3.2mL硝酸加入50mL水中，并用水稀释至100mL。 (7)盐酸(1+1)：取50mL盐酸慢慢加入50mL水中。 (8)磷酸铵溶液(20gL)：称取2.0g磷酸铵，以水溶解稀释至100mL (9)混合酸 硝酸+高氯酸(4+1)。 (10)镉标淮储备液：准确称取1.000g金属镉(99.99%)，分次加20mL盐酸(1+1)溶 解，加2滴硝酸，移入1000mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。此溶液每毫升含1.0mg镉。 (11)镉标准使用液：每次吸取10.0mL镉标准储备液于100mL容量瓶中，加硝酸(0.5 molL)至刻度，混匀。如此经多次稀释成每毫升含100.0ng镉的标准使用液。 3.仪器所用玻璃仪器均需以硝酸(1+5)浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水 冲洗干净。 (1)原子吸收分光光度计（附石墨炉及锅空心阴极灯）。 (2)马弗炉
作一试剂空白。 ② 液体试样：称取2 g试样（精确至0.1 g）于50 mL三角瓶中（含乙醇、二氧化碳的试 样应置于80℃水浴上驱赶）。加入1 mL～10 mL混合酸，于带电子调节器万用电炉上的低 档位加热，以下步骤按上述“试样处理”项下操作，待测。 （4）试样测定：于上述待测试样及试剂空白瓶中加入10.0mL底液，溶解残渣并移入电 解池。以下按4.（2）“标准曲线绘制”项下操作。分别记录试样及试剂空白的峰电流，用标准 曲线法计算试样中铅含量。 5. 结果计算 试样中铅含量按式（2-1-6）进行计算。 X＝ 1000 ( ) 1000 0 m A A ………………………………………（2-1-6） 式中：X——试样中铅的含量，单位为毫克每千克或毫克每升（mg/kg 或mg/L）； A——由标准曲线上查得测定样液中铅的质量，单位为微克（μg）； A0——由标准曲线上查得试剂空白液中铅质量，单位为微克（μg）； m——试样质量或体积，单位为克或毫升（g 或mL）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 6. 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值 的5.0%。 二、动物性食品中镉的测定 GB/T 5009.15—2003《食品中镉的测定》适用于各类食品中镉的测定。 本方法检出限：石墨炉原子吸收光谱法为0.1 μg/kg；火焰原子化法为5.0 μg/kg ；比色法 为50 μg/kg ；原子荧光法为1.2 μg/kg；标准曲线线性范围为0 ng～50 ng/mL。 （一） 石墨炉原子吸收光谱法（第一法） 1. 原理 试样经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，电热原子化后 吸收228.8nm共振线，在一定浓度范围，其吸光度与镉含量成正比，与标准系列比较定量。 2. 试剂 （1）硝酸。 （2）硫酸。 （3）过氧化氢（30%）。 （4）高氯酸。 （5）硝酸（1＋1）：取50 mL硝酸，慢慢加入50 mL水中。 （6）硝酸（0.5 mol/L）：取3.2 mL硝酸加入50 mL水中，并用水稀释至100 mL。 （7）盐酸（1＋1）：取50 mL盐酸慢慢加入50 mL水中。 （8）磷酸铵溶液（20 g/L）：称取2.0 g磷酸铵，以水溶解稀释至100 mL。 （9）混合酸 硝酸＋高氯酸（4＋1）。 （10）镉标准储备液：准确称取1.000 g金属镉（99.99%），分次加20 mL盐酸（1＋1）溶 解，加2滴硝酸，移入1 000 mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。此溶液每毫升含1.0 mg镉。 （11）镉标准使用液：每次吸取10.0 mL镉标准储备液于100 mL容量瓶中，加硝酸（0.5 mol/L）至刻度，混匀。如此经多次稀释成每毫升含100.0 ng镉的标准使用液。 3. 仪器 所用玻璃仪器均需以硝酸（1＋5）浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水 冲洗干净。 （1）原子吸收分光光度计（附石墨炉及镉空心阴极灯）。 （2）马弗炉
(3)恒温干燥箱 (4)瓷坩埚。 (5)压力消解器、压力消解罐或压力溶弹 (6)可调式电热板、可调式电炉。 4.分析步骤 (1)试样预处理：在采样和制备过程中，应注意不使试样污染：肉类及蛋类等水分含 量高的鲜样用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。 (2)试样消解（根据实验室条件选用以下任何一种方法消解 ①压力消解罐消解法：称取1.00g~2.00g试样（干样、含脂肪高的试样<1.00g,鲜样 <2.00g或按压力消解罐使用说明书称取试样)于聚四氟乙烯罐内，加硝酸2mL~4mL,放 置过夜。再加过氧化氢(30%)2mL~3mL(总量不能超过罐容积的13)。盖上内盖，然后 旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120℃一140C保持3h一4h,在箱内自然冷却至室温， 用滴管将消解液洗入或过滤入（视消化液有无沉淀而定）10mL~25mL容量瓶中，用水少 量 洗液合并于容量瓶中并定容 刻度，混匀备用 同时做试剂空白 ②干法灰化：称取1.00g~5.00g(根据含镉量及水分而定)试样于瓷坩埚中，先小火 在可调式电热板上炭化至无烟，移入马弗炉500℃灰化6h~8h,冷却。若个别试样灰化不彻 底，则加1mL混合酸在可调式电炉小火上加热，反复多次直到消化完全，放冷，用硝酸(0.5 mo/L)将灰分溶解，用滴管将消解液洗入或过滤入（视消化液有无沉淀而定）10mL~25mL 容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩蜗，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度 混匀备用：同时 做试剂空白。 ③过疏酸铵灰化法：称取1.00g-5.00g试样于瓷坩埚中，加2mL-4mL硝酸浸泡1h以 上，先小火炭化，冷却后加2.00g~3.00g过硫酸铵盖于上面，继续炭化至不目烟，转入马弗 炉，500C恒温2h,再升至800C,保持20min,冷却。加2mL~3mL硝酸(1.0mol/L),用 滴管将清解液洗入或过滤入（视消化液有无沉淀而定）10mL一25mL容量瓶中，用水少量 多次洗涤瓷坩埚 洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用：同时做试 剂空白 ④湿式消解法：称取1.00g~5.00g试样于三角瓶或高脚烧杯中，放数粒玻璃珠，加10 mL混合酸，加盖浸泡过夜，加一小漏斗用电护加热消解，若变棕黑色，再加混合酸，直到 目白烟，消化液呈无色透明或路带黄色，放冷，用滴管将消解液洗入或过滤入（视消化液有 无沉淀而定)10mL~25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤三角瓶或高脚烧杯，洗液合并于 容量瓶中并定容至刻度，混匀备用：同时做试剂空白 (3)测定 ①根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为波长228.8nm,狭缝0.5nm~1,0nm, 灯电流8mA一10mA,干燥温度120℃，20s:灰化温度350℃，15s一20s,原子化温度1700℃~ 2300℃，45一55，背景校正为氘灯或塞曼效应。 ②标准曲线绘制： 吸取镉使用液0mL 1.0mL、3.0mL、5.0mL、7.0ml 、10.0mL于 100mL容量瓶中，加硝酸(0.5molL)稀释至刻度，相当于0ngmL、1.0ngmL、3.0gmL 5.0ngmL、7.0gmL、10.0ngmL,各吸取10L注入石墨炉，测得其吸光值并求得与浓度 关系的一元线性回归方程。 ③试样测定：分别吸取样液和空白液各10L注入石墨护，测得其吸光值，代入标准系 列的一元线性回归方程中求得样液中含量」 ④基体改进剂的使用：对有干扰试样 ,则注入适量的基体改进剂硫酸铵溶液(20gL〉 (一般为<5L)消除干扰。绘制镉标准曲线时也要加入与试样测定时等量的基体改进剂。 5.结果计算试样中镉含量按式(2-21)进行计算
（3）恒温干燥箱。 （4）瓷坩埚。 （5）压力消解器、压力消解罐或压力溶弹。 （6）可调式电热板、可调式电炉。 4. 分析步骤 （1）试样预处理：在采样和制备过程中，应注意不使试样污染；肉类及蛋类等水分含 量高的鲜样用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。 （2）试样消解（根据实验室条件选用以下任何一种方法消解） ① 压力消解罐消解法：称取1.00 g～2.00 g试样（干样、含脂肪高的试样<1.00 g，鲜样 <2.00 g或按压力消解罐使用说明书称取试样）于聚四氟乙烯罐内，加硝酸2 mL～4 mL，放 置过夜。再加过氧化氢（30％）2 mL～3 mL（总量不能超过罐容积的1/3）。盖上内盖，然后 旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120℃～140℃保持3 h～4 h，在箱内自然冷却至室温， 用滴管将消解液洗入或过滤入（视消化液有无沉淀而定）10 mL～25 mL容量瓶中，用水少 量多次洗罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时做试剂空白。 ② 干法灰化：称取1.00 g～5.00 g（根据含镉量及水分而定）试样于瓷坩埚中，先小火 在可调式电热板上炭化至无烟，移入马弗炉500℃灰化6 h～8 h，冷却。若个别试样灰化不彻 底，则加1 mL混合酸在可调式电炉小火上加热，反复多次直到消化完全，放冷，用硝酸（0.5 mol/L）将灰分溶解，用滴管将消解液洗入或过滤入（视消化液有无沉淀而定）10 mL～25 mL 容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时 做试剂空白。 ③ 过硫酸铵灰化法：称取1.00 g～5.00 g试样于瓷坩埚中，加2 mL～4 mL硝酸浸泡1 h以 上，先小火炭化，冷却后加2.00 g～3.00 g过硫酸铵盖于上面，继续炭化至不冒烟，转入马弗 炉，500℃恒温2 h，再升至800℃，保持20 min，冷却。加2 mL～3 mL硝酸（1.0 mol/L），用 滴管将消解液洗入或过滤入（视消化液有无沉淀而定）10 mL～25 mL容量瓶中，用水少量 多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时做试剂空白。 ④ 湿式消解法：称取1.00 g～5.00 g试样于三角瓶或高脚烧杯中，放数粒玻璃珠，加10 mL混合酸，加盖浸泡过夜，加一小漏斗用电炉加热消解，若变棕黑色，再加混合酸，直到 冒白烟，消化液呈无色透明或略带黄色，放冷，用滴管将消解液洗入或过滤入（视消化液有 无沉淀而定）10 mL～25 mL容量瓶中，用水少量多次洗涤三角瓶或高脚烧杯，洗液合并于 容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时做试剂空白。 （3）测定 ① 根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为波长228.8 nm，狭缝0.5 nm～1.0 nm， 灯电流8 mA～10 mA，干燥温度120℃，20 s；灰化温度350℃，15 s～20 s，原子化温度1 700℃～ 2 300℃，4 s～5 s，背景校正为氘灯或塞曼效应。 ② 标准曲线绘制：吸取镉使用液0 mL、1.0 mL、3.0 mL、5.0 mL、7.0 mL、10.0 mL于 l00 mL容量瓶中，加硝酸（0.5 mol/L）稀释至刻度，相当于0 ng/mL、1.0 ng/mL、3.0 ng/mL、 5.0 ng/mL、7.0 ng/mL、10.0 ng/mL，各吸取10 μL注入石墨炉，测得其吸光值并求得与浓度 关系的一元线性回归方程。 ③ 试样测定：分别吸取样液和空白液各10 μL注入石墨炉，测得其吸光值，代入标准系 列的一元线性回归方程中求得样液中镉含量。 ④ 基体改进剂的使用：对有干扰试样，则注入适量的基体改进剂硫酸铵溶液（20 g/L） （一般为<5 µL）消除干扰。绘制镉标准曲线时也要加入与试样测定时等量的基体改进剂。 5. 结果计算 试样中镉含量按式（2-2-1）进行计算
