温州医学院 文本 化学发光免疫分析系统_临床免疫学检验

见习1化学发光免疫分析系统 预习要求： 1,化学发光免度分析的基本类型及其票理 2、化学发光免夜分析的影响因素： 3,化学发光免度分析的方法学评价： 见习要点： 1,了解目前国内主要化学发光免疫分析系统的种类： 2、熟8化学发光免疫分析系统的技术流程： 3、掌挥化学发光免疫分析法的基本原理及其质量控制， 见习内容 一、原强 化学发光免疫分析系饶是将抗源抗体的特异性反应与发光分析相结合而建立的一种新 的具有高特异性、高敏感性、无故射性污染的全白动检测系统。化学发光免疫分析系统的固 相载体主要包括微粒子（通常磁性颗粒）和包按珠二种，以磁性微粒子较常用，其反应械式 包括夹心法、间接法和竞争法三种。 根据反应体系中所用发光标记物、标记方法的不同。一般可将化学发光免疫分析系统的 检测原理分为三种类型： 1、化学发光免技分析： 直接用发光物（了院酯及其行生物》标记抗原或抗体，与待检样品中的抗原或抗体发 生免疫反应后。不需要催化剂，只需加入激发液和预激发液，改变反应体系的条件（如州 值)和提供口，即可直接产生发光反应，通过检测发光强度经计算机处理求出特检样品中抗 原或抗体的量。 常见仪器有：80TT12000型自动免夜分析仪、ACS180SE和HS自动化学发光免疫 分析仪及AT1 A Centaur自动化学发光免疫分析仪。 2、南化学发光免疫分析：

见习 1 化学发光免疫分析系统 预习要求： 1、 化学发光免疫分析的基本类型及其原理； 2、 化学发光免疫分析的影响因素； 3、 化学发光免疫分析的方法学评价； 见习要点： 1、 了解目前国内主要化学发光免疫分析系统的种类； 2、 熟悉化学发光免疫分析系统的技术流程； 3、 掌握化学发光免疫分析法的基本原理及其质量控制。 见习内容 一、 原理 化学发光免疫分析系统是将抗原抗体的特异性反应与发光分析相结合而建立的一种新 的具有高特异性、高敏感性、无放射性污染的全自动检测系统。化学发光免疫分析系统的固 相载体主要包括微粒子（通常磁性颗粒）和包被珠二种，以磁性微粒子较常用，其反应模式 包括夹心法、间接法和竞争法三种。 根据反应体系中所用发光标记物、标记方法的不同，一般可将化学发光免疫分析系统的 检测原理分为三种类型： 1、 化学发光免疫分析： 直接用发光物（如吖啶酯及其衍生物）标记抗原或抗体，与待检样品中的抗原或抗体发 生免疫反应后，不需要催化剂，只需加入激发液和预激发液，改变反应体系的条件（如 pH 值）和提供 H +，即可直接产生发光反应，通过检测发光强度经计算机处理求出待检样品中抗 原或抗体的量。 常见仪器有：ABBOTT i2000 型自动免疫分析仪、ACS 180 SE 和 PLUS 自动化学发光免疫 分析仪及 ADVIA Centaur 自动化学发光免疫分析仪。 2、 酶化学发光免疫分析：

用可催化化学发光反应的酶标记抗鼎或抗体，与待检样品中的抗原域抗体发生免疫反应 后，加入底物，解维化底物产生发光反应，通过检测发光强度经计算机处理求出待检样品中 抗原成抗体的量。 常见仪器有：DCIm11te1000型和2000型自动发光免夜分析仪，J0S0N-J0NS0N Vitros ECI型自动发光免疫分析{仪、ECKMAN COLLTER Access型和DXI8O0型自动发光分 析佼及AP8 OTT AxSyu型自动免度分析仪。 3、电化学发光免疫分析： 包括电化学和化学发光两个过程，用电化学发光剂三联吡定钉标记抗原或抗体，与待检 样品中的抗原暖抗体发生免度反应后，在电场作用下，三丙陵作为电子债体，在电极表面进 行电子转移产生发光反应，通过检测发光强度经计算机处理求出待检样品中抗原或抗体的 量。 常见仪器有：0CE10esy器2010型和E170型自动电化学发光分析仪， 所有仪器均由样品中心，检测中心、侯应中心和数据处理中心四部分组成。 二、 标本处弹及其要求 1、常规静脉采血约21，不抗凝，置普通试管中或果用含分离胶的真空果血管。室温 (15~25℃)下可福定48h,普通冰箱中(2一8℃)稳定7d。需较长时间探存应将直清存政 于-2D℃。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均加塞密闭成覆盖 湿巾。 2,特殊情况处理1 视检测项目，根解试剂说明书处理标本。 三、 技术流程 基本技术流程：

用可催化化学发光反应的酶标记抗原或抗体，与待检样品中的抗原或抗体发生免疫反应 后，加入底物，酶催化底物产生发光反应，通过检测发光强度经计算机处理求出待检样品中 抗原或抗体的量。 常见仪器有：DPC Immulite 1000 型和 2000 型自动发光免疫分析仪、JOHNSON-JOHNSON Vitros ECI 型自动发光免疫分析仪、BECKMAN COULTER Access 型和 DXI800 型自动发光分 析仪及 ABBOTT AxSym 型自动免疫分析仪。 3、 电化学发光免疫分析： 包括电化学和化学发光两个过程，用电化学发光剂三联吡啶钌标记抗原或抗体，与待检 样品中的抗原或抗体发生免疫反应后，在电场作用下，三丙胺作为电子供体，在电极表面进 行电子转移产生发光反应，通过检测发光强度经计算机处理求出待检样品中抗原或抗体的 量。 常见仪器有：ROCHE Elecsys 2010 型和 E170 型自动电化学发光分析仪。 所有仪器均由样品中心、检测中心、供应中心和数据处理中心四部分组成。 二、 标本处理及其要求 1、常规静脉采血约 2ml，不抗凝，置普通试管中或采用含分离胶的真空采血管。室温 （15～25℃）下可稳定 48h，普通冰箱中（2～8℃）稳定 7d。需较长时间保存应将血清存放 于-20℃。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过 1d 的标本均加塞密闭或覆盖 湿巾。 2、特殊情况处理： 视检测项目，根据试剂说明书处理标本。 三、 技术流程 基本技术流程：

开机 般仪器均24小时待机，日常工作中无需开、关机 参数设置 设置仪器项目、报告单位和传输模式等相关参数。 试剂装教 将试剂政入试剂舱内相关位置。 校准 根据己定程序进行校准， 标本装数 将标本成入样本架，输入工作单。 标本测定 按己设定的参数和程序遗行测定 结果查海与传送 按己设定的参数和程序查看并传送结果， 结果报告 以标雀模式报告结果并给予解读和对监床提供建议 具体操作详情（以B80TT12000型白动免装分析仪为例）： 1、开机 仪器2h待机，勿需开关电源操作。 2、参数设置 》报告单位的设置 在Systen菜单下，选择Configuration进入Assay setting界面，速择asult m1s选定项目定义报告单位及有效位数。 2》组合代码设置 在System菜单下，选择Configuration进入Assay setting界面，选择Panel definitions输入组合代码，选定组合项目。 3、试剂装蒙 1》在Suppliesn菜单下，选择Supply status检查各部分是否充足，是否需要更镜。 如需要。选释2更换或添加试剂

具体操作详情（以 ABBOTT i2000 型自动免疫分析仪为例）： 1、 开机 仪器 24h 待机，勿需开关电源操作。 2、 参数设置 1) 报告单位的设置 在 System 菜单下，选择 Configuration 进入 Assay setting 界面，选择 Rusult units 选定项目定义报告单位及有效位数。 2) 组合代码设置 在 System 菜单下，选择 Configuration 进入 Assay setting 界面，选择 Panel definitions 输入组合代码，选定组合项目。 3、 试剂装载 1) 在 Suppliesm 菜单下，选择 Supply status 检查各部分是否充足，是否需要更换， 如需要，选择 F2 更换或添加试剂。 开机 试剂装载 标本测定 标本装载 结果查询与传送 结果报告 一般仪器均 24 小时待机，日常工作中无需开、关机。 将试剂放入试剂舱内相关位置。 以标准模式报告结果并给予解读和对临床提供建议 将标本放入样本架，输入工作单。 按已设定的参数和程序进行测定 按已设定的参数和程序查看并传送结果。 参数设置 设置仪器项目、报告单位和传输模式等相关参数。 校准 根据已定程序进行校准

》故置试剂：新试剂第一次上机时，要先充分混匀，换上Septun。按塑不同碗色故 在试剂转盘的相应位置上即可，微置完成后按R©agnt扫描试剂信息。不需要每天取出，可 上机保存。 4、校准 1》标准由线中请： 在0 rders菜单下，选择Calibration order选定项目，设定位置，输入标准品的 批号和有效期。放入样品。仪器即可自动进样检测。 2)查看标准曲线 在Snapshot菜单下，速择C,Cal进入Calibration status.选定某项目，按Details 查看详细货料。 5、标木装载及测定 1》工作单输入 在0ders菜单下，选择Patient order选定项目，没定位置。知为授试样本， 透择图tch,设定起始样本号及位置即可。 2》标本测定 选择snapshot屏幕上W图标按an,仪器开始初始化，完成后转为mning 状态，再选释SH图标按un,SH开始初始化，完成后转为unng状志。 b)确认样本架上所有标本的位置一编号是否相符、量是否足够，有无影响吸样的 纤维蛋白，有无影响吸样针液面感应的气泡，项目输入是否正确等，将样品架故入样品栏上 机或直接成在急诊位，仪器脚可自动进样检测 3影在运行过程中，在Orders菜单下，选择order status可在看当前工作状态。 6、结果查陶 I》在Res知lts菜单下，选择Result review可测览当前结果，可选择Release或Print 或Rerun或Delete,. 2)不良结果处理 在Snapshot菜单下，遗择Exception,选定某测试项目，点击屏暮右下角的“？” 图标。可帮助查找相关资料。除同愿后，可选择un,将样本重新故回样本果， 进行重做。 T、结果报告（软件濮示）

2) 放置试剂：新试剂第一次上机时，要先充分混匀，换上 Septum，按照不同颜色放 在试剂转盘的相应位置上即可，放置完成后按 Reagent 扫描试剂信息，不需要每天取出，可 上机保存。 4、 校准 1) 标准曲线申请： 在 Orders 菜单下，选择 Calibration order 选定项目，设定位置，输入标准品的 批号和有效期,放入样品，仪器即可自动进样检测。 2) 查看标准曲线 在Snapshot菜单下，选择QC.Cal进入Calibration status选定某项目,按 Details 查看详细资料。 5、标本装载及测定 1) 工作单输入 在 Orders 菜单下，选择 Patient order 选定项目，设定位置。如为批试样本， 选择 Batch，设定起始样本号及位置即可。 2) 标本测定 a) 选择 snapshot 屏幕上 PM 图标按 Run，仪器开始初始化，完成后转为 Running 状态，再选择 SH 图标按 Run ,SH 开始初始化，完成后转为 Running 状态。 b) 确认样本架上所有标本的位置－编号是否相符、量是否足够，有无影响吸样的 纤维蛋白，有无影响吸样针液面感应的气泡、项目输入是否正确等，将样品架放入样品栏上 机或直接放在急诊位，仪器即可自动进样检测。 3) 在运行过程中，在 Orders 菜单下，选择 order status 可查看当前工作状态。 6、结果查询 1) 在 Results 菜单下，选择 Result review 可浏览当前结果，可选择 Release 或 Print 或 Rerun 或 Delete。 2) 不良结果处理 在 Snapshot 菜单下，选择 Exception,选定某测试项目,点击屏幕右下角的“？” 图标，可帮助查找相关资料。排除问题后，可选择 Rerun，将样本重新放回样本架， 进行重做。 7、结果报告（软件演示）

所有结果在发出报告前，需结合情床及有关检查结果逐一分析，您要时应与修床联系。 四、质控 在0er8菜单下，选择Control order选定项目，设定位置，选择质控品报号和检测 水平，保存后。放入质控品。仪器即可自动进样、检测、贮存质控结果， 五、影响因素 【,标本：标本严重脂渔成溶血，污染成纤维丝等，均会影响检测结果，严重者可导致 仪器放障，因此，要求标本应新鲜，需充分离心分离血请。 2、试剂盒质量：包括抗体的效价、特异性、亲和力等：试剂盒必须在有效期内。 3、校准：必類定期、每更换一个授号试剂均需校准，以免标准曲线漂移造成结果系统 误差。 4、质控：每天均需进行室内质控以保证结果准确可靠。 六、临床意义 》化学发光免疫分析被广泛应用于澄素、肿瘤标志物、细胞因子、传染病血清学指标 和药物浓度的检测等多个领域，具有快速、准确、特异、方便可自动化，重复性好等特点： 公具体项目的临床意义白学。 七、仪器保养、常见故障及排除 1、常规保养 从Snapshot进入System菜单，选择laintenance,再这择As need进入fluid flush 程序，进行管路冲洗。 2、每日保养： 从Snapshot进入System菜单，进择Maintenance,再选择Daily进入6040 Z Probe Cleaning-Automated程序，根据仪器提示将盛有3次氯酸钠的保养瓶放试剂舱内图1号位， 对清洗区域1、2深针外部冲洗 3、每周保养： I》从Smapshot进入Systen菜单，选择Maintenance,再选择EEKLY进入以下程序！ 6012 Air Filter C1 eaning手工方法将积在空气过滤网上的灰尘去掉 6014 Pipettor Probe Cleaming 清洗分样探针外部的盐类结品 6015 Z Probe Cleaming一anal清洁清洗区域探针模块外部的盐类结备

所有结果在发出报告前，需结合临床及有关检查结果逐一分析，必要时应与临床联系。 四、质控 在 Orders 菜单下，选择 Control order 选定项目，设定位置，选择质控品批号和检测 水平，保存后，放入质控品，仪器即可自动进样、检测、贮存质控结果。 五、影响因素 1、 标本：标本严重脂浊或溶血、污染或纤维丝等，均会影响检测结果，严重者可导致 仪器故障，因此，要求标本应新鲜，需充分离心分离血清。 2、 试剂盒质量：包括抗体的效价、特异性、亲和力等；试剂盒必须在有效期内。 3、 校准：必须定期、每更换一个批号试剂均需校准，以免标准曲线漂移造成结果系统 误差。 4、 质控：每天均需进行室内质控以保证结果准确可靠。 六、临床意义 1) 化学发光免疫分析被广泛应用于激素、肿瘤标志物、细胞因子、传染病血清学指标 和药物浓度的检测等多个领域,具有快速、准确、特异、方便可自动化，重复性好等特点； 2) 具体项目的临床意义自学。 七、仪器保养、常见故障及排除 1、常规保养 从 Snapshot 进入 System 菜单，选择 Maintenance，再选择 As need 进入 fluid flush 程序，进行管路冲洗。 2、每日保养： 从 Snapshot 进入 System 菜单，选择 Maintenance，再选择 Daily 进入 6040 WZ Probe Cleaning-Automated 程序，根据仪器提示将盛有 3%次氯酸钠的保养瓶放试剂舱内圈 1 号位， 对清洗区域 1、2 探针外部冲洗。 3、每周保养： 1) 从 Snapshot 进入 System 菜单，选择 Maintenance，再选择 WEEKLY 进入以下程序： 6012 Air Filter Cleaning 手工方法将积在空气过滤网上的灰尘去掉 6014 Pipettor Probe Cleaning 清洗分样探针外部的盐类结晶 6015 WZ Probe Cleaning – Manual 清洁清洗区域探针模块外部的盐类结晶

可根据仪器提示遥步操作。 2》清洁仪墨滤网。 4、按需保养： 从Snapshot进入Systen柔单，选择laintenance,再进入As need界面，根据需要选 择所活保养程序，根据仪器提示逐步操作。 5、常见故障及排除： ATT12000型自动免疫分析仪经常会出现S机械鸭、清洗区故障，重新启动S棱 块即可。若出现卡杯。雷等己有样本检测完毕，仪器进入stc单或ready状老，方可根据错 误代马参照仪器说明书排除故障后，再重启仪器。 见习思考愿 试叙化学发光免疫分析的基本类型及其原理？ 2. 试叙化学发光免疫分析仪的构成及技术流程？

可根据仪器提示逐步操作。 2) 清洁仪器滤网。 4、按需保养： 从 Snapshot 进入 System 菜单，选择 Maintenance，再进入 As need 界面，根据需要选 择所需保养程序，根据仪器提示逐步操作。 5、 常见故障及排除： ABBOTT i2000 型自动免疫分析仪经常会出现 SH 机械臂、清洗区故障，重新启动 SH 模 块即可。若出现卡杯，需等已有样本检测完毕，仪器进入 stop 或 ready 状态，方可根据错 误代码参照仪器说明书排除故障后，再重启仪器。 见习思考题 1． 试叙化学发光免疫分析的基本类型及其原理？ 2． 试叙化学发光免疫分析仪的构成及技术流程？