中华人民共和国国家标准 食品中合成着色剂的测定方法 1主避内容与适用范围 本标准规定了食品中合成着色剂的测定方法。 本标准适用于食品中合成着色剂的测定。 第一篇高效液相色潜法（第一法） 2原理 食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液一液分配法提取，制成水溶液，注入高效液 相色进仪，经反相色谱分离，根据保留时阿定性和与峰面积比较进行定量。最小检出量，新 红5ng。柠檬黄4ng.苑菜红6ng、圆霜红8ng、日落黄Tng,赤群红18ng.亮蓝2Eng:当 进样量相当0.02z时最低检出浓度分别为0,2/k:Q16g/k10.24ag/k10.32/k和 Q.28ag/k:Q72g/:1.04w/Λ4 3试剂 3.1正己烷. 3.2盐酸。 3.3乙酸。 3.4甲醇：经滤膜(0.5单)过滤. 3,5聚酰胺粉尼龙6)：过200目辞。 3.6乙能按棉液(0.02D1/L):称取1.51z乙酸能，加水至1000L,溶解，经池银(0.45 u过滤， 3,7氢水：量取氨水2L,加水至100L.混匀。 3.8氨水一乙酸铵溶液002ml/几)：量取氨水Q.5aL,加乙酸按溶液0.02ol九)至 1000L.混习。 3.9甲醇一甲酸(6+4)溶液：量取甲醇60，甲酸40。混匀。 3.10柠檬酸溶液：称取20g柠檬酸(CH0·0),加水至100，溶解混匀。 3,11无水乙醇-氢水-水(7+2+1》溶液：量取无水乙丽70L,氢水20L,水10L 混匀。 3.12三正辛胶正丁醇溶液（⑤：量取三正辛胺5L,如正丁醇至100L,混匀. 3.13饱和硫酸纳溶液
中华人民共和国国家标准 食品中合成着色剂的测定方法 1 主题内容与适用范围 本标准规定了食品中合成着色剂的测定方法。 本标准适用于食品中合成着色剂的测定。 第一篇高效液相色谱法(第一法) 2 原理 食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液－液分配法提取，制成水溶液，注入高效液 相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。最小检出量，新 红 5ng、柠檬黄 4ng、苋菜红 6ng、胭脂红 8ng、日落黄 7ng、赤藓红 18ng、亮蓝 26ng，当 进样量相当 0.025g 时最低检出浓度分别为 0.2mg//k；0.16mg/kg；0.24mg/kg；0.32mg/kg； 0.28mg/k；0.72mg/k；1.04mg/k。 3 试剂 3.1 正己烷。 3.2 盐酸。 3.3 乙酸。 3.4 甲醇：经滤膜(0.5μm)过滤。 3.5 聚酰胺粉(尼龙 6)：过 200 目筛。 3.6 乙酸铵溶液(0.02mol/L)：称取 1.54g 乙酸铵，加水至 1000mL，溶解，经滤膜(0.45 μm)过滤。 3.7 氨水：量取氨水 2mL，加水至 100mL，混匀。 3.8 氨水－乙酸铵溶液(0.02mol/L)：量取氨水 0.5mL，加乙酸铵溶液(0.02mol/L)至 1000mL，混习。 3.9 甲醇－甲酸(6＋4)溶液：量取甲醇 60mL，甲酸 40mL，混匀。 3.10 柠檬酸溶液：称取 20g 柠檬酸(C6H8O7·H2O)，加水至 100mL，溶解混匀。 3.11 无水乙醇－氨水－水(7＋2＋1)溶液：量取无水乙醇 70mL、氨水 20mL、水 10mL， 混匀。 3.12 三正辛胺正丁醇溶液(5%)：量取三正辛胺 5mL，加正丁醇至 100mL，混匀。 3.13 饱和硫酸钠溶液
314硫酸钠溶液(2g/八.)， 315p6的水：水如柠像酸溶液调l值到6. 316合成着色剂标准溶液，准确称取按其纯度折算为1件质量的柠檬黄、日落黄、，范 菜红、圆新虹、新红、赤红、亮蓝、就蓝各0100g:置100.容量瓶中。加6水到刻 度.配成水溶液(L.0Oag/). 3,17合成着色剂标准使用液，备用时上述溶液（或将3,16）加水稀释20倍，经滤厦 (0.5μ■)过滤。配成每毫升相当50.0μ以的合成着色剂： 4仪器 高效液相色潜仪，。带紫外检测器，254a波长。 5分析步骤 51样品处理 &1.1枯子汁、果味水、果于露汽水等：称取20.040.0%，放入100烧杯中。含 二氧化碳样品加热更除二氧化碳。 51.2配制酒类：称取20.0一40.0g,放1001烧杯中，如小辞瓷片数片，加热塞除 乙醇。 反1,3硬糖、密线类，淀粉软糖等：称取：5.00一10,00小粉碎样品，故入100L小 烧杯中，加水0，温热溶解，若样品溶液值较高，用柠檬酸溶液调值到6左右。 5.1.4巧克力豆及着色糖衣制品：称取5,00一10.00z:做入100L小烧杯中，用水反复洗 涤色素。到巧克力豆无色素为止，合并色素漂洗液为样品溶流。 52色素提取 反2,1聚酞胺吸附法：样品溶液加柠檬酸溶液调叶值到6，加热至60℃，将1g聚队胺 粉如少许水调成粥状，创入样品溶液中，搅摔片刻，以C3垂酰漏斗拍就，用60℃4的水 洗涤3一5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3~5次（含赤带红的样品川5,2.2法处理》， 再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3一5次，每次5.收集解吸液，加乙酸中 和，燕爱至近干，加水溶解，定容至5l经滤膜(0.5μ■)过滤，取10μL速高效液相色 进仪。 点2,2液-液分配法（适用于含泰蹿红的样品》：将制备好的样品溶液放入分液漏斗中。 如2L盐酸、三正辛胺正丁醇溶液(5%)10一20L,叛提取，分取有机相，重复提取， 至到有机相无色，合并有机相，用饱和硫酸销溶液洗2次，每次10L,分取有机相，皮蕊 发里中，水浴加热浓缩至10L,转移至分液漏斗中，加0L正己烷，混匀，加氢水提取2
3.14 硫酸钠溶液(2g/L)。 3.15pH6 的水：水加柠檬酸溶液调 pH 值到 6。 3.16 合成着色剂标准溶液：准确称取按其纯度折算为 100%质量的柠檬黄、日落黄、苋 菜红、胭脂红、新红、赤藓红、亮蓝、靛蓝各 0.100g，置 100mL 容量瓶中，加 pH6 水到刻 度。配成水溶液(1.00mg/mL)。 3．17 合成着色剂标准使用液：临用时上述溶液（或将 3．16）加水稀释 20 倍，经滤膜 （0．45μm）过滤。配成每毫升相当 50．0μg 的合成着色剂。 4 仪器 高效液相色谱仪，带紫外检测器，254nm 波长。 5 分析步骤 5.1 样品处理 5.1.1 桔子汁、果味水、果于露汽水等：称取 20．0～40．0g，放入 100mL 烧杯中。含 二氧化碳样品加热驱除二氧化碳。 5.1.2 配制酒类：称取 20．0～40．0g，放 100mL 烧杯中，加小碎瓷片数片，加热驱除 乙醇。 5.1.3 硬糖、蜜饯类、淀粉软糖等：称取：5．00～10．00 小粉碎样品，放入 100mL 小 烧杯中，加水 30mL，温热溶解，若样品溶液 pH 值较高，用柠檬酸溶液调 pH 值到 6 左右。 5.1.4 巧克力豆及着色糖衣制品：称取 5．00～10．00g，放入 100mL 小烧杯中，用水反复洗 涤色素，到巧克力豆无色素为止，合并色素漂洗液为样品溶液。 5.2 色素提取 5.2.1 聚酞胺吸附法：样品溶液加柠檬酸溶液调 pH 值到 6，加热至 60℃，将 1g 聚酞胺 粉加少许水调成粥状，倒入样品溶液中，搅拌片刻，以 G3 垂融漏斗抽滤，用 60℃pH=4 的水 洗涤 3～5 次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤 3～5 次（含赤薛红的样品用 5．2．2 法处理）， 再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸 3～5 次，每次 5mL 收集解吸液，加乙酸中 和，蒸发至近干，加水溶解，定容至 5mL 经滤膜（0．45μm）过滤，取 10μL 进高效液相色 谱仪。 5.2.2 液-液分配法（适用于含赤蹿红的样品）：将制备好的样品溶液放入分液漏斗中， 加 2mL 盐酸、三正辛胺正丁醇溶液（5％）10～20mL，振摇提取，分取有机相，重复提取， 至到有机相无色，合并有机相，用饱和硫酸钠溶液洗 2 次，每次 10mL，分取有机相，放蒸 发皿中，水浴加热浓缩至 10mL，转移至分液漏斗中，加 60mL 正己烷，混匀，加氨水提取 2～
3次，每次5L合并氨水溶液层〔含水溶性酸性色需)，用正己烷洗2次，氨水层加乙酸调 成中性，水溶加热藤发至近干，加水定容至5L经滤膜(0.5■)过滤，取10μL连高效 液相色谱仪。 5.3高效液相色讲参考条件 53.1柱：Y0GC1810μ不锈钢柱4,6m(id)×20m: 53.2流动相：甲醇-0.02o1/L乙酸饺溶液(4)， &3.3梯度洗脱：甲醇：20%~35%.3%/1：35%~-9g%,9%/i:98%推续6ain+ 点3,4流速：1l/in 53.5繁外检测器，25m被长. 反4测定 取相同体积样液和合成着色剂标准使用液分别注入高效液相色游仪，根据保留时间定 性，外标峰面积法定量。 55计算 式中，无一一—样品中着色剂的含量，k 一一样液中着色剂的质量，“： Y:一一述样体机。山： Y一一样品稀释总体积。L: 马一一样品质量，： 结果的表述：报告算术平均值的二位有效数： 点6允许差 相对相差≤10%。 反7其他 (图略) 第二篇薄层色谱法（第二法） 6原理 水溶性酸性合成着色剂在酸性条件下被聚酰按吸附，而在碱性条件下解吸用，再用纸色 进法或薄层色谱法进行分离后，与标准比较定性、定量，最低检出量为0μ点样量为1， 样品最低检出沫度约为50/kg: 7试剂 7.1石油框：沸程60-90℃
3 次，每次 5mL 合并氨水溶液层（含水溶性酸性色素），用正己烷洗 2 次，氨水层加乙酸调 成中性，水浴加热蒸发至近干，加水定容至 5mL 经滤膜（0．45μm）过滤，取 10μL 进高效 液相色谱仪。 5.3 高效液相色谱参考条件 5.3.1 柱：YWG-Cl810μm 不锈钢柱 4．6mm（id）×250mm。 5.3.2 流动相：甲醇-0．02mol／L 乙酸铰溶液（pH=4）。 5.3.3 梯度洗脱：甲醇：20％～35％，3％／min；35％～98％，9％／min；98％继续 6min。 5.3.4 流速：lmL／min。 5.3.5 紫外检测器，254nm 波长。 5.4 测定 取相同体积样液和合成着色剂标准使用液分别注入高效液相色谱仪，根据保留时间定 性，外标峰面积法定量。 5.5 计算 式中：X1——样品中着色剂的含量，g/kg； m1——样液中着色剂的质量，μg； V2——进样体积，mL； V1——样品稀释总体积，mL； m2——样品质量，g。 结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。 5.6 允许差 相对相差≤10%。 5.7 其他 （图略） 第二篇薄层色谱法(第二法) 6 原理 水溶性酸性合成着色剂在酸性条件下被聚酰胺吸附，而在碱性条件下解吸附，再用纸色 谱法或薄层色谱法进行分离后，与标准比较定性、定量。最低检出量为 50μg，点样量为 1g， 样品最低检出浓度约为 50mg/kg。 7 试剂 7.1 石油醚：沸程 60～90℃
7.2甲醇。 7.3聚酰胺粉尼龙6)：200目. 7.4肆胶G, 7.5硫酸：(1+10)， 7.6甲醇一甲酸溶液：(6+4)， 7.7氢氧化钠溶液(50g/L)。 7.8海沙：先用盐酸(1十10)煮沸15min,用水洗至中性，再用氢氧化钠溶液50g/LU煮 沸15ai,用水洗至中性，再于105℃干燥，贮于具破璃塞的瓶中，备用 7.9乙醇(50. 7.10乙醇一氨溶液：取1L氨水，加乙醇(70》至100L. 7.11p6的水：用柠檬酸溶液(20%)博节至6。 7.12盐酸(1+100。 7.13柠檬假溶液(200e/L). 7.14钨酸钠溶液(100g/1). 7.15碎瓷片：处理方法同7,8。 7.16展开剂 7.16,1正丁醇一无水乙醇一氢水(1)(6+2+3)：侯纸色谱用。 7.16,2正丁醇一赋突一氨水(1)(6+3十40：供纸色游用. 7.16,3甲乙酮一丙酮一水(7+3+3)：供纸色错用。 7.16.4甲醇一乙二掖一氨水(10+3+2)：供薄层色游用. 7.16.5甲醇一氨水一乙醇(5+1十10)：供薄层色谱用.。 7.16.6柠檬酸销溶液25g/L)一氨水一乙醇(8+1+2)：供薄层色话用. 7,17合成着色测标准溶液，按3,16方法。分别配制着色剂的标准溶液浓度为每毫升相 当于1.0以e 7.18着色剂标准使用液：临用时吸取色素标准溶液各50L,分别置于50容量瓶中， 加将的水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于0.10g着色剂： 8仪器 &1可见分光光度计. &2微量注射器成血色素吸管， 83展开槽，25cm×6m×4cn
7.2 甲醇。 7.3 聚酰胺粉(尼龙 6)：200 目。 7.4 硅胶 G。 7.5 硫酸：(1＋10)。 7.6 甲醇－甲酸溶液：(6＋4)。 7.7 氢氧化钠溶液(50g/L)。 7.8 海沙：先用盐酸(1＋10)煮沸 15min，用水洗至中性，再用氢氧化钠溶液(50g/L)煮 沸 15min，用水洗至中性，再于 105℃干燥，贮于具玻璃塞的瓶中，备用。 7.9 乙醇(50%)。 7.10 乙醇－氨溶液：取 1mL 氨水，加乙醇(70%)至 100mL。 7.11pH6 的水：用柠檬酸溶液(20%)调节至 pH6。 7.12 盐酸(1＋10)。 7.13 柠檬酸溶液(200g/L)。 7.14 钨酸钠溶液(100g/L)。 7.15 碎瓷片：处理方法同 7.8。 7.16 展开剂 7.16.1 正丁醇－无水乙醇－氨水(1%)(6＋2＋3)：供纸色谱用。 7.16.2 正丁醇－吡啶－氨水(1%)(6＋3＋4)：供纸色谱用。 7.16.3 甲乙酮－丙酮－水(7＋3＋3)：供纸色谱用。 7.16.4 甲醇－乙二胺－氨水(10＋3＋2)：供薄层色谱用。 7.16.5 甲醇－氨水－乙醇(5＋1＋10)：供薄层色谱用。 7.16.6 柠檬酸钠溶液(25g/L)－氨水－乙醇(8＋1＋2)：供薄层色谱用。 7.17 合成着色剂标准溶液：按 3.16 方法，分别配制着色剂的标准溶液浓度为每毫升相 当于 1.0mg。 7.18 着色剂标准使用液：临用时吸取色素标准溶液各 5.0mL，分别置于 50mL 容量瓶中， 加 pH6 的水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于 0.10mg 着色剂。 8 仪器 8.1 可见分光光度计。 8.2 微量注射器或血色素吸管。 8.3 展开槽，25cm×6cm×4cm
84层析缸杠。 &5滤纸：中速滤纸，纸色谱用。 86薄层板：5×m×20a &了电吹风机。 &8水泵， 9分析步骤 91样品处理 9.1.1果味水、果子露、汽水：移取50.0g样品于100L烧杯中.汽水需如热驱除二 氧化碳。 身1.2配制酒：称取100.0g样品于100L烧杯中，加柳毫片数块，加热驱除乙醇。 9.1.3硬糖、蜜战类、淀粉软糖：称取5.00或10.0g粉碎的样品，加30l.水，祖热溶 解，若样液值较高，用柠檬酸溶液200/L)调至4左右， 身1,4.1奶糖：称取10,0z粉种均匀的样品，加30L乙醇一氢溶液溶解，置水浴上浓 缩至约20，立即用德酸溶液1+10)调至微酸性再加1.0硫酸(1+10)，如1L鹤酸钠 溶液(100g/),使蛋白质沉淀、过滤，用少量水洗涤，收集滤液。 91,4,2蛋糕类：称取10.0g粉碎均匀的样品。加海沙少许，混匀。用热风吹干用品（用 手摸己干燥即可以)，加入30石油感授拌，放置片射，顿出石渝瑟，如此重复处理三次， 以除去脂肪，吹干后研细，全部倒入G3兵融漏斗或香通漏斗中，用乙醇一氨溶液提取色素， 直至着色剂全部提完。以下按9.1,4,1自“置水浴上浓缩至约0l”起依法操作。 92吸附分离 将处理后所得的溶液加热至0℃，加入0,5一1,0g聚酰胺物充分搅拌，用柠檬酸溶液 (200九)调阳至4，使着色剂完全被吸用，如溶液还有颜色，可以再如一些聚酰按粉。将 吸用着色剂的案酰按全部转入风垂融漏斗中过滤（如用3垂脸漏斗过滤可以用水系慢慢地 抽滤)。用围的70℃水反复洗涤，每次20L,边洗边搅拌。若含有天然着色剂，再用甲醇 一甲酸溶液洗涤1一3次，每次20L至洗液无色为止.再用70℃水多次洗涤至流出的溶液 为中性。洗涤过程中必领充分授拌。然后用乙醇一氢溶液分次解吸全部着色剂，收集全部解 吸液，于水浴上驱氢。如果为单色。则用水准确稀释至50L,用分光光度法进行测定。知 果为多种着色剂混合液，则进行纸色谱或薄层色游法分离后测定，即将上述溶液置水浴上浓 缩至2后移入5山容量瓶中，用乙醇0%)洗漆容器，洗液并入容量惭中并稀释至刻. 93定性
8.4 层析缸。 8.5 滤纸：中速滤纸，纸色谱用。 8.6 薄层板：5cm×20cm。 8.7 电吹风机。 8.8 水泵。 9 分析步骤 9.1 样品处理 9.1.1 果味水、果子露、汽水：称取 50.0g 样品于 100mL 烧杯中。汽水需加热驱除二 氧化碳。 9.1.2 配制酒：称取 100.0g 样品于 100mL 烧杯中，加碎瓷片数块，加热驱除乙醇。 9.1.3 硬糖、蜜饯类、淀粉软糖：称取 5.00 或 10.0g 粉碎的样品，加 30mL 水，温热溶 解，若样液 pH 值较高，用柠檬酸溶液(200g/L)调至 pH4 左右。 9.1.4.1 奶糖：称取 10.0g 粉碎均匀的样品，加 30mL 乙醇－氨溶液溶解，置水浴上浓 缩至约 20mL，立即用硫酸溶液(1＋10)调至微酸性再加 1.0mL 硫酸(1＋10)，加 1mL 钨酸钠 溶液(100g/L)，使蛋白质沉淀、过滤，用少量水洗涤，收集滤液。 9.1.4.2 蛋糕类：称取 10.0g 粉碎均匀的样品，加海沙少许，混匀，用热风吹干用品(用 手摸已干燥即可以)，加入 30mL 石油醚搅拌。放置片刻，倾出石油醚，如此重复处理三次， 以除去脂肪，吹干后研细，全部倒入 G3 垂融漏斗或普通漏斗中，用乙醇－氨溶液提取色素， 直至着色剂全部提完，以下按 9.1.4.1 自“置水浴上浓缩至约 20mL”起依法操作。 9.2 吸附分离 将处理后所得的溶液加热至 70℃，加入 0.5～1.0g 聚酰胺粉充分搅拌，用柠檬酸溶液 (200g/L)调 pH 至 4，使着色剂完全被吸附，如溶液还有颜色，可以再加一些聚酰胺粉。将 吸附着色剂的聚酰胺全部转入 G3 垂融漏斗中过滤(如用 G3 垂融漏斗过滤可以用水泵慢慢地 抽滤)。用 pH4 的 70℃水反复洗涤，每次 20mL，边洗边搅拌。若含有天然着色剂，再用甲醇 －甲酸溶液洗涤 1～3 次，每次 20mL，至洗液无色为止。再用 70℃水多次洗涤至流出的溶液 为中性。洗涤过程中必须充分搅拌。然后用乙醇－氨溶液分次解吸全部着色剂，收集全部解 吸液，于水浴上驱氨。如果为单色，则用水准确稀释至 50mL，用分光光度法进行测定。如 果为多种着色剂混合液，则进行纸色谱或薄层色谱法分离后测定，即将上述溶液置水浴上浓 缩至 2mL 后移入 5mL 容量瓶中，用乙醇(50%)洗涤容器，洗液并入容量瓶中并稀释至刻度。 9.3 定性
9.3.1纸色谱 取色谱用纸，在距底边2■的起始线上分别点3一10口L样品溶液、1一2μL着色剂标 准溶液，挂于分别盛有7.16.1、7.16.2的展开剂的层析缸中，用上行法展开，待溶剂前沿 展至15■处，将滤纸取出于空气中障干，与标准斑比较定性。 也可取0,5L样液，在起始找上从左到右点成条状，纸的左边点着色剂标准溶液。依法 展开，琼干后先定性后再供定量用。靛越在碱性条件下易视色，可用7.16.3展开剂， 9.3.2湾层色谱 93,2.1薄层版的制备 称取1.6g聚酰胺粉、0.4z可溶性淀粉及2g硅胶G,置于合适的研体中，如15L水研 匀后，立即置涂布器中铺成厚度为0.3■的板，在室温腺干后，于80℃干燥1h。置干燥器 中备用。 9.3.22点样 离板底边2cn处将0.5l.样液从左到右点成与底边平行的条状，板的左边点2uL色素 标准溶液。 9.3.2.3展开 范菜红与胭虹用7.16.4展开剂，敏蓝与亮蓝用7.16.5履开剂，柠檬黄与其他着色剂 用716.6展开剂.。取适量展开利倒入展开槽中，将薄层板放入展开，待着色剂明显分开后 取出，琼干，与标准更比较。如配值相问即为问一色素。 9.4定量 只4,1样品测定 将低色谱的条状色斑剪下，用少量热水洗涤数次，流液移入10L比色管中，并加水稀 释至划度，作比色测定用。 将薄层色谱的条状色斑包括有扩散的部分，分别用刮刀刮下，移入漏斗中，用乙醇一氨 溶液解吸着色剂，少量反复多次至解吸液于蒸发皿中，于水浴上挥去氢，移入10L比色管 中，加水至刘度，作比色用。 9.4,2标准由线制备 分别吸取0、0.50、1.0、20、30、4.0L删脂红、苋菜红、柠檬黄、日落黄色素标准 使用溶液，成0.0.2,0.4.06,0.8,1.0l亮蓝、酸蓝色素标准使用溶液，分别置于10 比色管中，各加水稀释至刻度。 上述样品与标准管分别用1cn比色杯，以零管调节零点，于一定波长下（潮带红510■
9.3.1 纸色谱 取色谱用纸，在距底边 2cm 的起始线上分别点 3～10μL 样品溶液、1～2μL 着色剂标 准溶液，挂于分别盛有 7.16.1、7.16.2 的展开剂的层析缸中，用上行法展开，待溶剂前沿 展至 15cm 处，将滤纸取出于空气中晾干，与标准斑比较定性。 也可取 0.5mL 样液，在起始线上从左到右点成条状，纸的左边点着色剂标准溶液，依法 展开，晾干后先定性后再供定量用。靛蓝在碱性条件下易褪色，可用 7.16.3 展开剂。 9.3.2 薄层色谱 9.3.2.1 薄层板的制备 称取 1.6g 聚酰胺粉、0.4g 可溶性淀粉及 2g 硅胶 G，置于合适的研钵中，加 15mL 水研 匀后，立即置涂布器中铺成厚度为 0.3mm 的板。在室温晾干后，于 80℃干燥 1h，置干燥器 中备用。 9.3.2.2 点样 离板底边 2cm 处将 0.5mL 样液从左到右点成与底边平行的条状，板的左边点 2μL 色素 标准溶液。 9.3.2.3 展开 苋菜红与胭脂红用 7.16.4 展开剂，靛蓝与亮蓝用 7.16.5 展开剂，柠檬黄与其他着色剂 用 7.16.6 展开剂。取适量展开剂倒入展开槽中，将薄层板放入展开，待着色剂明显分开后 取出，晾干，与标准斑比较，如 Rf 值相同即为同一色素。 9.4 定量 9.4.1 样品测定 将纸色谱的条状色斑剪下，用少量热水洗涤数次，洗液移入 10mL 比色管中，并加水稀 释至刻度，作比色测定用。 将薄层色谱的条状色斑包括有扩散的部分，分别用刮刀刮下，移入漏斗中，用乙醇－氨 溶液解吸着色剂，少量反复多次至解吸液于蒸发皿中，于水浴上挥去氨，移入 10mL 比色管 中，加水至刻度，作比色用。 9.4.2 标准曲线制备 分别吸取 0、0.50、1.0、2.0、3.0、4.0mL 胭脂红、苋菜红、柠檬黄、日落黄色素标准 使用溶液，或 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL 亮蓝、靛蓝色素标准使用溶液，分别置于 10mL 比色管中，各加水稀释至刻度。 上述样品与标准管分别用 1cm 比色杯，以零管调节零点，于一定波长下(胭脂红 510nm
莫菜红520a.柠校黄430nm,日落黄482n。亮蓝627nn,酸蓝620m,测定吸光度，分 别绘制标准由线比较成与标准色列目测比较。 95计算式中：名一样品中着色剂的含量，g/小： 一一测定用样液中色素的质量，题！ ,一一样品质量（体积，）： ￥，一一样品解吸后总体积，L: Y,一一样液点板（纸）体积，L。 结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。 附加说明： 本标准由卫生部卫生监督可提出。 本标准第一法由天津市食品卫生监督检险所、辽宁省食品卫生监督检脸所、宁夏回族自 治区卫生防疫站、西安市卫生防疫站负责起草，第二法由卫生部食品卫生监督检验所负责起 草。 本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生蓝督控验所负责解释
苋菜红 520nm，柠檬黄 430nm，日落黄 482nm，亮蓝 627nm，靛蓝 620nm)，测定吸光度，分 别绘制标准曲线比较或与标准色列目测比较。 9.5 计算式中：X2——样品中着色剂的含量，g/kg； m3——测定用样液中色素的质量，mg； m4——样品质量(体积)，g(mL)； V3——样品解吸后总体积，mL； V4——样液点板(纸)体积，mL。 结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。 附加说明： 本标准由卫生部卫生监督司提出。 本标准第一法由天津市食品卫生监督检验所、辽宁省食品卫生监督检验所、宁夏回族自 治区卫生防疫站、西安市卫生防疫站负责起草，第二法由卫生部食品卫生监督检验所负责起 草。 本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释