1Cs67.040 C53 中华人民共和国国家标准 GB/T5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药 残留量的快速检测 Rapid determination for organophosphate and carbamate pesticide residues in vegetables 2003-08-11发布 2004-01-01实炮 中华人民共和国卫生部 中国国家标准化管理委员会 发布 559
GB/T5009.199-2003 前。言 有机磷和氨恭甲筱隋类农药在应菜中的爱留司愿和引发中形的情况较为突出。本标格提供的两种 检登方法，能快速校酒有机磷和氨赫印酸借觉农药在花蔡中的残留，以艇及时发现同低，朵数情蓝，控制 药程面农西预菜的上市，保障人门食菜交全， 本标准由中华人民共和G卫生部提出并归口， 本标准起草单位：卫生部食品卫生整行校验所，北京市产品质悬监督检登所，广东着疾病预防控制 中心， 本标准主要起瓜人：王林，王品，张莹，君峰，杨大进。 510
GB/T5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药 残留量的快速检测 1殖型 本标准规定了由辟抑制法测定花菜中有机织和氨基甲破店类农药残面量的快速检险方法， 本标准适用于费菜中有机磷和氨基甲酸岛类农荐残留意的快建箱选侧定， 速测卡法（低片法） 2原理 阻赋随售可崔化控酚乙酸雷（红色》水解为乙酸与腔酚（蓝色），有机商或红荪甲酸位类农药对胆碱 酯青有抑到作用，使衡化，水解，变色的过程发生数变，由此可判断出样品中是否有育列量有机碎或红基 甲胶店类农西的存在， 3就剂 3.1图化有缸碱酯降和较希乙酸菌试剂的纸片（边到卡）。 3,2pH7,5缓冲溶液：分料取15.0g丽融氢二钠[NH0,·12H,O]与1.59g无水酸二氢钾 [KH,P0,],用500mL原吸水帝解 4位昌 4.1官量天平， 4.2有条件时配备37℃士2℃何祖餐置， 5分桥步很 5.1整体测定法 5,1,1这取有代表性的造装样品，擦去表面混土，剪成1cm左右见方辞片，数5g故入带直瓶中，如人 10ml缓冲溶液，最摇50次，静置2min以上， 5.1.2取一片速测卡，用自色药片沾取提取液，放登10m以上进行领及应，有条件时在3？℃缸装 置中效量10，预反应后的药片表出必须保持很网。 5.1,3将建测卡对折，用手扭3m加攻用恒装置恒塑3m,使红色药片与白色药片叠合发生反应， 5.1.4每批测定应设一个缓冲液的空白对风卡， 52表面测定法（料博法》 52,1擦去我菜表面泥土，滴2清~3薄极冲溶液在范禁表西，用另一片覆粟在裤藏处轻2降擦， 52,2取一片建测卡，将蔬票上的孩滴简在自色西片上， 5,2.3故置10n以上进行预反应，有条件时在37℃恒留装量中放置10mn,反应后的药片表面 经须保持程利。 5.2.4将速测卡对折，月手捏3min或用但装置圆忍3in,使红色药片与白色西片企合发生反度， 5.2.5利批剩定应设一个级冲荒的空白对肌卡， 571
GB/T5003.199-2003 6格黑判定 结架以葛被有机码或红基甲能类农到物制（为阳性），未物制（为阴性）表示， 与空自对组卡比较，白色药片不变色吹略有视蓝色均为财性结果。自色西片空为天蓝色成与空白 对照卡相同，为阴性结装。 对阳性结果的样品，可用其勉分析方独进一步确定具体农药品种和含盘， 7附则 7.1速测卡技术指标 7.1.1灵敏度指标：速离卡对部分农药的检出限见表1。 表1都分农药的检出佩 家百名释 校出限/《ng/hg》 数方名释 整色限/代ne/ke 农丙务称 格出限/ma/八a) 甲战云 1.1 乙酰甲作等 35 久放磷 2.5 对被南 1.7 改及裂 0.3 甲苏威 2.5 木顾质研 &1 及百皇 03 好年冬 L.0 马拉稳降 20 乐果 1.8 味随丹 0.5 氧化乐果 28 7.1.2符合率幸：在检州的30卧以上阳性样品中，轻气相色游获阶证，阳性结果的符合率应在80⅓ 以上。 8以明 8.1墨，蒂，萝卜，北染，店第，香菜，奖白，昨悲及管茄什被中，含有对阵有影响的植特次生物质，？导产 生但用性，处理这类样品时，可采取整株（体》瓷菜浸松或果用表面剧定法，对一传含叶绿素较商的遣 菜，也可采取整株（体）花菜浸提的方法，拔少色素的干找。 8,2当温度条作低于3℃，醉反应的连度随之数便，药片如液后发置反应的时间度相对廷长，延长时 间的确定，应以空白对阻卡用手指（体器）捏3m时可以变蓝，即可往下装作，挂意样品成登的封间定 与空白对既卡戴是的有一致才有可比性，空白对解卡不变色的原因：一是药片表面缓冲溶液扣的少、 预反应后的西片表而不够湿润，二是沿度太低， 8.3红色药片与白色药片叠合反应的时间以3min为在，3mn后的蜚色公逐新如深，4h后极色会 逐需退去。 碑抑制率法（分光光度法） 9丽理 在一定条件下，有机醇和氨基甲酸类农西对程就后醇正常功能有料制作用，其掉制率与农药的浓 皮是正相美。正常胡况下，青能化神经传异代谢产物（乙壁肌就）水解，其水解产物与显色剂反应，产生 黄色物盈，月分光光度计在412m处测定吸光度随时间的变化值，计算出拘制率，通过抑制率可以判 所出样品中是香有有刺显有视辟或氢某甲酸酯煲表西的存在， 10试剂 10.1PH8,0缓神福藏，分别散11.9无水辟酸氧二钾与3.2g爵酸二氢钾，用】000mL蒸编水 帘解， 572
G1/T5009.199-2003 10.2显色利：分别取180mg二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和15.6mg碳酸氢钠，用20mL.级冲溶液 溶解，4℃冰箱中保存， 10.3底物：取25.0mg破代乙脏解碱，加3,0mL荔僧水溶解，县匀后置4℃冰箱中保存各币。保存期 不超过两周， 10.4乙酰粗贼导，根据爵的活性棉况，用饺冲格流溶解，3m的酸光度变化△A,值应控制在0.3 以上，摇匀后置冰箱中保存备用，保存期不超过国天， 10.5可选用由以上试剂制备的试剂盘。乙底朋碱前的△A值应控割在Q,3以上， 11仪器 11.1分光光度计或相应图定仪， 11.2常量天平. 11.3恒淄水裕孩恒西箱， 12分析步翼 12.1样品处理：选取有代表性的范菜样品，冲快推表面泥土，剪成1©m左右见方醉片，取样品】g,放 入绕杯球损收瓶中，加人5mL.缓种溶液，振药1min-2min,倒出婴取孩，静量3min一smin,得用。 12.2对凰溶被测其：先于试作中知人25mL模冲溶液，再相人0.1mL.酶液，0.1mL显色剂，想匀目 于37℃效置15mi以上（每批样品的控制封阿应一数），知人Q.1mL底物拥匀，此时检腋并始基色反 应，应立即敏人仪器比色花中，记录反议3min的吸光度变化作dA, 12.3棵品溶被测试：先于试管中加入2.5mL样品提数液，其地操作与对明溶孩测试相可，记桑反皮 3mm的吸光度变化值△A, 13结暴的表述计算 13.1结果计算 见式(1). 钟制$(%)=[(4A一△A,)/△A]X100m(1) 式中： AA,一对酬溶液反度3mn吸光搜的变化值： △A,一一样品袍流反应3min及光度的变化值。 13.2抽果判定 结果以碍枝摔制的程度（物制率）表示。 当技菜帮品垫取液对酶的抑制卒云50%时，表后我柴中有高利量有机磷或氨基甲融酯类农药存在， 样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复栓验2次以上， 对阳性结果的样品，可用其他方法进一步确定具体农药品种和含盘： 14附则 14,1南辉制率法柱术指标 14.1.】是灵敏度物标：酶物创率法对部分农药的控出限见表2。 3T1
GB/T5009.199-2003 表2钠抑制率法对都分农药的检出佩 农西名称 拉出限/(ngkg) 农西名称 粒幽阴/代mg/k球 融盘是 9.1 氧化瓜果 Q.8 对罐硝 1.0 学基升树商 5.0 华量网 Q.3 灭多威 a.1 甲校药 1.0 T碧克百威 0.5 巧粒镜得 4.6 酸百虫 02 乐果 30 峨消行 0.05 14.1,2行合事：在拉出的即制事0%的的份以上样品中，经气相色语祛验证，阳性结果的符合率应 在8动%以上， 15说明 151慧、霖，萝卜，重菜、芹案，香粟，菱白，亚菇及冒益汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容马 产生：阳性，处理这类样品时，可采取整株（体）益菜浸提。对一些含叶绿常较高的蔬蔡，也可采取整株 (体)厦菜汉是的方法，成少色素的干扰， 15.2当围皮条作低于37℃，防反应的违度随之敏慢，如人南森和显色刺后敏算反应的时间应相时菇 长，廷长时间的晚定，应以胆贴色剧空白对里测试3的级光度变化△A,值在Q,3以上，即可往下操 作，生意样品故置时阿应与空白对阻溶放收置时间一致才有可比性。机碱的空白对明溶液3m加的 吸光度变化△A,值<0.3的原四，一是停的活性不够，二是湿度太低 571