1Cs67.050 B50 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T3025-2006 水产品中甲醛的测定 Determination of formaldehyde in aquatic products 2006-01-26发布 2006-04-01实施 中华人民共和国农业部发布
SC/T3025-2006 前 言 本标准附录A附录B为资料性附录 本标准由中华人民共和国农业部渔业局提出 本标准由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会归口。 本标准起草单位：国家水产品质量监督枪验中心。 本标准主要起草人：周德庆、马散军，李晓川，耀能秀，王联珠 1
SC/T3025-2006 水产品中甲醛的测定 1范围 本标准规定了水产品中甲醛含量的测定方法：定性方法、分光光度法，高效液相色潜法。 本标准适用于水产品中甲醒含量的定性韩选和定量测定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用面成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订服均不适用于本标准，然面，鼓附根据本标雀达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本，凡是不往日期的引用文作，其最新板本适用于本标准。 GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/TS009,1食品卫生检验方法理化部分总测 3定性算选方法 3.1原理 利用水溶液中游离的甲雁与某些化学试剂的特异性反应，形成特定的额色进行鉴别， 3.2攸髓 3.2.1组织揭碎机 3.2.210mL纳氏比色管 3.3试剂 3.3.1下列所用试剂均为分析纯，所用化学试剂应符合GB/T602要求。实验用水应符合GB/T6682 的要求。 3,3.21%间苯三喻溶液：称取团体间装三肠1：，溶于100mL12%氢氧化钠溶液中，此溶液临用时现 配。 3.3.34%盐酸苯辞溶液。此帝液临用时现配 3.3.4盐酸溶液(1+9)：量取盐酸100mL,到900mL的水中。 33.55%亚硝酸亚铁氟化钠溶液。此溶液临用时现配。 3.3.610%氢氧化钾溶液。 3.4操作步深 3.4.1取样 3.4.1.1鲜活水产品 鲜活水产品取肌肉等可食部分测定。鱼类去头，去销，取背部和腹部肌肉：虾去头、去壳，去畅腺后 取肉：具类去壳后取肉：蟹类去壳、去性腺和肝脏后取肉。 3.4.1.2冷冻水产品 冷漆水产品经半解冻直接取样，不可用水清洗 3.4.1.3水发水产品 水发水产品可取其水发溶液直接测定。或将样品西水后，取可食部分测定
sC/T3025-2006 3.4.1.4千制水产品 干制水产品取肌肉等可食部分测定。 3.4.2试样的制备 可直接取用水发水产品的水发溶液，进行定性裤选实验。将取得的样品用组织鸿碎机鼻碎，称取 10g于三角瓶中，加人0mL藻■水，震荡30m,离心后取上清液作为制备液进行定性测定。 3.4.3测定 3.4.3.1间苯三脸法 )取样品制备液5mL于10mL钠氏比色管中，然后加人1mL1%间苯三附溶液，2mn内观察圆 色变化，溶液若星橙红色，则有甲雁存在，且甲雁含量较高：溶液若呈浅红色，则含有甲盛，且 含量较低：溶液若无额色变化，甲醒来检出。 b)该方法操作时显色时间短，应在2m内现察额色的变化，水发就鱼，水发虾仁等样品的制备 液因带浅红色，不适合此法。 3.4.3.2亚痛基亚铁氟化钠法 a)取样品制备溶液5mL于10mL钠氏比色管中，然后加人1mL4%盐酸苯讲，3滴一5滴新配的 5%亚硝基亚铁氯化钠溶藏，再加人3滴一5滴10%氢氧化钾溶液，5m内观察颜色变化。溶 液若星蓝色或灰蜚色，说明有甲醛，且甲醛含量高：溶液若星浅蓝色，说明有甲隧，且甲度含量 低：溶液若星淡黄色，甲陋未检出。 b)该方法显色时间短，应5m内观察颜色的变化， 3.4,3.3以上两种方法中任何一种方法都可作为甲靡的定性测定方法，必要时两种方法同时使用 4定量测定方法 4.1分光光度法 4.1.1原理 水产品中的甲醛在确酸介质中经水落气加热蒸馆，冷厦后经水溶液吸收，燕馆液与乙假内酮反应， 生成黄色的二乙酰基二氧二甲基吡定，用分光光度计在413m处比色定量，甲醛分光光度计吸收光谱 见附录A 4.1.2仅器 4.1.2.1分光光度计：被长范围为360m-800mm 4.1.2.2圆底绕瓶：1000mL2000mL,250mL:客量瓶：200ml:钠氏比色管：20mL 4.1.2.3到温电热套或电护。 4.1.2.4组凯鹅辞机。 4.1,2.5蒸馏液冷凝、接收装置. 4.1.3试剂 4.1.3.1磷酸溶液(1+9)：取100mL磷酸，加到900mL的水溶液，混匀。 4.1.3.2乙能丙侧溶液：称取乙酸被25g.溶于100mL离馏水中，加冰乙酸3mL和乙酰丙酮0.4mL 盟匀，贮存于棕色瓢.在2℃~8℃冰箱内可保存一个月 4.1.3.30,1mdL碘溶流：称取40g碘化钾，溶于25mL水中，加人12.7g确，特确完全溶解后，加水 定容至1000mL.移入榨色蟹中，暗处贮存。 4.1.3.41mlL.氢氧化钠溶流。 4.1.3.5碗酸溶液(1+9)。 4.1.3.60.1mdL镜代镜限钠标准溶液：按GB/T5009.1中规定的方法标定。 2
SC/T3025-2006 4.1.3.70.5%淀粉溶液：此液应当日配置。 4.1.3.8甲餐标准贮备溶液：吸取0.3mL含量为36%~38%甲溶液于100mL.容量瓶中，加水稀释 至刻度，为甲唇标准贮备溶液，冷藏保存两周。按本标准4,13,1条规定的碘量法标定。 4.1.3.9甲陋标准溶液(5gmL):根据甲陋标准上备液的浓度，精密要取适量于100mL容量瓶中， 用水定客至射度，配置甲醛标准溶液(5感L),混匀备用，此液应当日配置 4.1.4样品处理 将按3,4,1要求取得样品，用组织搞辞机搞醇，程合均匀后称取10,00g于250mL圆底烧搬中，加 人20mL薄馏水，用玻璃棒搅拌混匀，浸泡30m后加10mL脚酸(1+9)溶液后立即通人水蒸气蒸馏： 接收管下口事先桶人盛有0mL蒸馏水且置于冰格的蒸液接收装置中。收集塞流至200mL,同时 敬空白对虱实验 4.1.5操作方法 4.1.5.】甲醛标准贮备溶液的标定 精密吸取4.1.3.8削备的溶液10.00mL,置于250mL碘量瓶中，加人25.00mL0,1mmdL碘溶 液.7.50mL1malL氢氧化钠溶液.放置15min1再加人10.00mL(1+9)焦酸.敏置15m山n:用浓度为 0.1mL的硫代硫酸钠标准溶液滴定，当满至浅黄色时，加人1.00mL0.5%淀粉指示剂，继续滴定至 蜚色清失，记录所用硫代硫酸钠体积(V)mL。同时用水作试剂空白滴定，记录空白滴定所用镜代硫酸 钠体积(Va)mL 甲标准贮备液的流度用式(1)计算： X,-Y-Y)×C×15×1000 10 式中： X:一甲匠标准贮备溶液中甲的浓度，单位为毫克每升(mg八)： V。一空白滴定消耗德代硫酸的标准溶被的体积数，单位为毫升(L): V1一滴定甲匠清耗硫代硫酸的标准溶藏的体积数，单位为毫升(mL): C一硫代硫酸的溶液准确的摩尔浓度，单位为摩尔每升(mL): 15一1mL1mdlL碘相当甲雁的量，单位为毫克(mg): 10一所用甲醒标准贮备溶液的体积，单位为毫升(mL) 4.1.5.2标准曲线的鲶制 精密吸取5g/mL甲醛标准液0mL、2.0mL、4.0mL.6.0mL8.0mL、10.0mL于20mL纳氏比 色管中，加水至10mL:加人1mL乙酸丙铜溶液，混合均匀，置沸水溶中加热10m,取出用水冷却至室 温：以空白液为参比，于波长413m处，以1m比色罪进行比色，测定吸光度，绘制标准由线 4.1.5.3样品测定 根据样品蒸馏流中甲雁浓度高低，吸取蒸馏液1mL一10mL,补充蒸馏水至10mL,测定过程同 4.1.5.2,记录吸光度。每个样品应作两个平行测定，以其算术平均值为分析结果， 4.1.6结果计算 试样中甲醛的含量按式(2)计算，计算结果保留两位小数 本=G×10 mx5×200 式中： X:一水产品中甲度合量，单位为毫克每千克(mgg): C 查曲线结果，单位为微克每毫升(g/mL): 10一显色溶液的总体积，单位为毫开(mL):
SC/T3025-2006 m2一样品质量，单位为充(g): V3一样品测定取澈馏液的体积，单位为毫升(mL): 200一藻情液总体积，单位为毫升(mL)。 4.1.7回收率 国收率60% 4.1.8检出限 样品中甲醇的检出限为0.50mgg 4.1.9精密度 在重复性条件下获得两次独立测定结果： 样品中甲醛含量≤5mg八g时，相对偏差≤10%： 样品中甲程含量>5mgg时，相对偏差5%。 4.2高效液相色浦法 4.2.1原理 甲醛在酸性条件下与2,4二硝基苯讲在60℃水溶衔生化生成2,4·二硝基养腺，经二氯甲烷反复分 离提取后，经无水硫酸钠税水，水浴满干，甲醇溶解残渣，OD6C,柱分离，素外检测器338m检测，以 保留时间定性，根据师面积定量，测定甲醛含量，甲醛溶液高效液相色游图见附录B 4.2.2仪■ 4.2.2.1高效液相色情，用紫外检测器 4.2.2.2高速离心机 4.2.2.310mm×150mm具擦或璃层析柱. 4.2.2.4恒温水溶铜 4.2.2.5旋粥混合器 4.2.2.6移液器：1mL:微量进样卷：20：5mL具塞比色管。 4.2.2.70.22m滤膜 4.2.3试剂 4.2.3.1甲醇：色谱纯，经过滤、锐气后使用。 4.2.3.2二氢甲烷 4.2.3.32,4二硝基茶群溶液：称取100mg2,4二硝基苯片溶解于24mL浓盐酸中，加水定容至100 mla 4.2.3.4甲蜃标准贮备溶液：配制及标定见本标准4.1.3.8条，临用时稀释至208mL 4.2.3.5无水硫酸钠：经550℃高温的烧，干燥器中贮存冷却后使用。 4.2.4测定步骤 4,2.4.1样品处理 取4.1.4制备水蒸气蒸缩液0.1mL一1.0mL,置于5mL具塞比色管中，补充藻水至1.0ml,加 人0.2mL2,+二硝燕苯时溶液，置60心水溶15mn,然后在流水中快速冷却，加人2mL二氯甲烷，旋祸 混合器震高苹取1min,3000r/min,离心2mn,取上清液再用1mL二氯甲烧萃取两次，合并3次举取 的下层黄色溶液，将萃取藏经无水硫胺钠柱脱水，60心水浴薰干，放冷，取1.0mL色谱纯甲醇溶解残渣， 经孔径0.22m滤膜过排后做液相色请分析用。 4.2.4.2色谱条件 4.2.4.2.1色谢柱00SC1w柱，5m,4.6m×250m
SC/T3025-2006 4.2.4.2.2色瑞柱温度：40℃。 4.2.4.2.3流动相：甲醇+水(60+40)，0.5mmin 4.2.4.2.4检测器波长：338m 4.2.43标准由线的按制 分别取20gmL的甲蜃应用液0.0mL,0.1mL,0.25mL,0.5ml,0.75mL,1.0ml(相当于0g, 2g,5心，10g,15g,20吧)于5mL具赛比色管中，如痛喻水至1.0mL,按4.2.4.1处理后取20L 进样。根据出现时间定性(5.1m),峰面积定量，每个浓度做两次，取平均值，用峰面积与甲餐含量做 图，检制标准曲线。取样品处理液0L注人液相色错测得积分面积后从标准曲线查出相应的浓度。 4.2.5结果计算 样品中甲碰的含量按式(3)计算，计算结果保圆两位小数 C X)M5X7×200……(3》 式中 X,一水产品中甲醛合量，单位为毫克每千克(mgg): C一查曲线结果，单位为微克每毫升(gmL): M,一—样品质量，单位为克(g): V3一样品测定取燕管液的体积，单位为毫开(mL): 200一德馏藏总体积，单位为毫升(L)。 4.2.6回收率 样品离馏液中带加甲雁标准溶液计算得到的回收率>0%。 4.2.7精密度 在重复性条件下线得两次独立测定结果 当样品中甲醛含量≤5mgg时，相对偏差10%； 当样品中甲靡含量>5mgg时，相对偏差≤5% 4.2.8检出限 样品中甲醛的检出限为0.20mgg
sC/T3025-2006 附录A (资料性附景】 甲醛分光光度计最收光罐扫端图 附录B (资料性附录】 甲髓标准溶液高效液相色谱图 DAD1ILSg33810 -f300.206H0U907S.D 20