中华人民共和国国家标准 水果、蔬菜可溶性糖测定法 1适用范围 本标准适用子新鲜水果，捷菜，干果可溶性糖的测定 2测定原理 在沸热条件下，用还原溶液滴定一定量的费林试剂时将费林试剂中的二价测还原为 一铃铜，以亚甲基蓝为折示剂，鹅过量的还眼糖立即使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无 色 的还原型更甲基室 3仪署设备 ,高速组飘搞醉机： b.电热恒温水浴： c.1000丽调温电炉： d.支璃仪器：200al,250al容量瓶：250al锥形瓶：50a1碱式请定管. 4试配W制 4.1贵林试剂甲：种章硫酸铜(CS01·520.分析纯34.6g溶于水中.稀释辛500. 过滤.贮于棕色瓶内， 4.2费林试剂乙：称取氢氧化钠50g和酒石眼钾时(KC406H·420,分析纯)138g溶 于水中，稀释至500m1,用石棉5漏斗抽滤 4.3转化糖标准溶液：称取95g莲糖（分析袍）用水溶解后转入1000归1容量瓶中，加入 6C1(分析纯101，如水至1001.在20一25℃下酸置三天或在25℃保温24h,然日用水 定容（此为酸化的转化糖液，可保存3一4个月）.酒定时，取特化糖液25001放入 20■l容量瓶中，如入印基红折示剂一滴用1心圆溶液中和后用水定容，即为1/转 化糖标准溶液 4.4重甲基蓝溶液：称取05亚甲基蓝（分析纯）溶于100l水中 4.5乙眼锌溶液：称取21.9g乙酸锌[2n@C02·220,分析纯]溶于水中，如冰乙 限3a1.稀释彩100加1. 4,6亚候氯化钾溶液：称取106g亚镜氯化钾[KFe(CW即6·320分新纯]著于水， 稀棒至100▣l
中华人民共和国国家标准 水果、蔬菜可溶性糖测定法 1 适用范围 本标准适用于新鲜水果,蔬菜,干果可溶性糖的测定. 2 测定原理 在沸热条件下,用还原糖溶液滴定一定量的费林试剂时将费林试剂中的二价铜还原为 一价铜,以亚甲基蓝为指示剂,稍过量的还原糖立即使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无 色 的还原型亚甲基蓝. 3 仪器设备 a.高速组织捣碎机; b.电热恒温水浴; c.1000W 调温电炉; d.玻璃仪器:200ml,250ml 容量瓶;250ml 锥形瓶;50ml 碱式滴定管. 4 试剂配制 4.1 费林试剂甲:称取硫酸铜(CuSO4·5H2O,分析纯)34.6g 溶于水中,稀释至 500ml, 过滤,贮于棕色瓶内. 4.2 费林试剂乙:称取氢氧化钠 50g 和酒石酸钾钠(KNaC4O6H4·4H2O,分析纯)138g 溶 于水中,稀释至 500ml,用石棉垫漏斗抽滤. 4.3 转化糖标准溶液:称取 9.5g 蔗糖(分析纯)用水溶解后转入 1000ml 容量瓶中,加入 6MHCl(分析纯)10ml,加水至 100ml.在 20～25℃下放置三天或在 25℃保温 24h,然后用水 定容(此为酸化的 1%转化糖液,可保存 3～4 个月).测定时,取 1%转化糖液 25.00ml 放入 250ml 容量瓶中,加入甲基红指示剂一滴,用 1MNaOH 溶液中和后用水定容,即为 1mg/ml 转 化糖标准溶液. 4.4 亚甲基蓝溶液:称取 0.5g 亚甲基蓝(分析纯)溶于 100ml 水中. 4.5 乙酸锌溶液:称取 21.9g 乙酸锌[Zn(OAC)2·2H2O,分析纯]溶于水中,加冰乙 酸 3ml,稀释至 100ml. 4.6 亚铁氰化钾溶液:称取 10.6g 亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O,分析纯]溶于水, 稀释至 100ml
S样品提取液制备 取特测样品适量，洗净，用不锈钢刀将可食部分切成适当小块充分混匀后，按周分法 取样.称取100g鲜样加入等重量的水，放入组织搞碎机中捣成1：1匀浆，有些材料匀浆比 例可适当调整，多汁果菠类可直接捣浆，称取匀浆25.0或50.0（相当于样品125或25.0 放入150m1烧杯中，含有机酸较多的材料加0.5一20g粉状C003调至中性（广范试纸检试）. 用水将样液全部转入260阳1容量瓶中，并调整体积约为200和1，置80土2℃水沿保温301n. 其间摇动数次，取出加入乙酸锌溶液及亚铁氯化钾溶液各2一51，冷却至室温后，用 水定容，过滤备用. 6还单糖测定 61费林试剂的标定 取费林试剂甲，乙各500ml或在测定前先等体积混合后取10.00ml混合液于20m1 维形瓶中，收入酸璃珠4一5较，先加入比预测（按62进行预测）仅少0.5l的1g/l转 化糖标准液.将此混合液置1000情电护上加热，使其在2■m左右沸腾.准确载沸2■画，此 时不离开电炉，立即加入0%亚甲基挡指示剂6滴，并候续以每一5s的滴速浦如标准 糖液，直至二价解离子完全敲还原生成砖红色氧化亚铜沉淀，溶液蓝色提尽为修点用 准确滴定标准糖液的毫升数V1,乘以标准糖液浓度[解/1】，即得10加l费林试剂所相 当的糖的毫克数， 注：无色的还原型亚甲基蓝极易被空气中的氧所氧化应调节电炉温度使瓶内溶液始 终保特沸所状态，液面覆盖水蒸气不与空气接触整个滴定过程惟形瓶不能离开 电炉随意摇动 62预测 取费林试剂甲，乙各500ml或10.00ml混合液于250ml维形瓶中，由滴定管加入特测 糖液约151，在电炉上加热至沸，约沸15s后迅速滴加特测糖液.至呈现极经微的蓝色为 止，此时加入0.5%亚甲基蓝指示剂6滴，继续滴如待测糖液，直至溶液蓝色锡尽为止，记 下待测糖液的用量2（毫升数）： 63准确测定 取费林试剂甲，乙各50m1或1Q,00加l混合液加入性形瓶中，由滴定管加入比预测仅 少0.51的特测糖液.并补如V1-2毫升水（标定贵林试剂所消耗的标准糖液毫升数V1减 去预测清耗的特测糖液毫升数2，即为应补知水的毫升数)，使其与标定费林试剂时的反 应体积一致以下按费林试剂标定月样操作，鞋铁滴至终点，前后沸热时何须在31n左
5 样品提取液制备 取待测样品适量,洗净,用不锈钢刀将可食部分切成适当小块充分混匀后,按四分法 取样.称取 100g 鲜样加入等重量的水,放入组织捣碎机中捣成 1:1 匀浆,有些材料匀浆比 例可适当调整,多汁果蔬类可直接捣浆.称取匀浆 25.0 或 50.0g(相当于样品 12.5 或 25.0g) 放入150ml烧杯中,含有机酸较多的材料加0.5～2.0g粉状CaCO3调至中性(广范试纸检试). 用水将样液全部转入 250ml 容量瓶中,并调整体积约为 200ml.置 80±2℃水浴保温 30min, 其间摇动数次,取出加入乙酸锌溶液及亚铁氰化钾溶液各 2～5ml,冷却至室温后,用 水定容,过滤备用. 6 还原糖测定 6.1 费林试剂的标定 取费林试剂甲,乙各 5.00ml 或在测定前先等体积混合后取 10.00ml 混合液于 250ml 锥形瓶中,放入玻璃珠 4～5 粒,先加入比预测(按 6.2 进行预测)仅少 0.5ml 的 1mg/ml 转 化糖标准液.将此混合液置 1000W 电炉上加热,使其在 2min 左右沸腾,准确煮沸 2min,此 时不离开电炉,立即加入 0.5%亚甲基蓝指示剂 6 滴,并继续以每 4～5s 的滴速滴加标准 糖液,直至二价铜离子完全被还原生成砖红色氧化亚铜沉淀,溶液蓝色褪尽为终点.用 准确滴定标准糖液的毫升数 V1,乘以标准糖液浓度[mg/ml],即得 10ml 费林试剂所相 当的糖的毫克数. 注:无色的还原型亚甲基蓝极易被空气中的氧所氧化,应调节电炉温度使瓶内溶液始 终保持沸腾状态,液面覆盖水蒸气不与空气接触.整个滴定过程锥形瓶不能离开 电炉随意摇动. 6.2 预测 取费林试剂甲,乙各 5.00ml 或 10.00ml 混合液于 250ml 锥形瓶中,由滴定管加入待测 糖液约 15ml,在电炉上加热至沸,约沸 15s 后迅速滴加待测糖液,至呈现极轻微的蓝色为 止,此时加入 0.5%亚甲基蓝指示剂 6 滴,继续滴加待测糖液,直至溶液蓝色褪尽为止,记 下待测糖液的用量 V2(毫升数). 6.3 准确测定 取费林试剂甲,乙各 5.00ml 或 10.00ml 混合液加入锥形瓶中,由滴定管加入比预测仅 少 0.5ml 的待测糖液,并补加 V1-V2 毫升水(标定费林试剂所消耗的标准糖液毫升数 V1 减 去预测消耗的待测糖液毫升数 V2,即为应补加水的毫升数),使其与标定费林试剂时的反 应体积一致.以下按费林试剂标定同样操作,继续滴至终点.前后沸热时间须在 3min 左
右.待测糖液消耗量应控制在15一501范围内，不能大于标定费林试剂所用标准糖液体红 V1,否则应增减称样量重新制备待测液. 7可溶性总糖测定 取已经备的待测液100m1于200m1容量：中，加6H110m1.在80±2℃水浴加热 10mi,放入冷水槽中冷却后.加甲基红指示剂二滴用6W及1Na0附溶液中和，用水定容， 以下步骤同6.2.63 8结果计算 81计算式 注还原糖)按式(1)计算： G250 还原糖信，以转化糖计)三一一× X100*-(1) Y×1000 b可溶性总糖)按式2计算： G4250 可溶性总糖（像以转化糖计）—一一×一一×—一×100(2) V1000 式中：一样品称重， GC一10如】费林试剂相当的转化糖，联： 了一一准确滴定时所用待测凌的体积，： A一一稀释倍数 250一一定容体机，■1： 100一—由毫克换算为克 C非还原糖()按式(3)计算： 丰还原糖气，以匪糖计)=（可溶性总想-还原糖）X0,95*一(3 式中：Q,9一由转化糖换算成莲糖的因数 82结果表示 测定结果计算到小数点后二位，两次平行试验结果相对相差：含量在践以下的不得超过 3裤：含量在5路~10%的不得超过2%：含量在10，以上的不得超过1集鲜样以鲜基表示，风干样以 风干基表示
右.待测糖液消耗量应控制在 15～50ml 范围内,不能大于标定费林试剂所用标准糖液体积 V1.否则应增减称样量重新制备待测液. 7 可溶性总糖测定 取已经制备的待测液 100ml 于 200ml 容量瓶中,加 6MHCl10ml.在 80±2℃水浴加热 10min,放入冷水槽中冷却后,加甲基红指示剂二滴用 6M 及 1MNaOH 溶液中和,用水定容. 以下步骤同 6.2,6.3. 8 结果计算 8.1 计算式 a.还原糖(%)按式(1)计算: G250 还原糖(%,以转化糖计)=——×————×100…………………(1) VW×1000 b.可溶性总糖(%)按式(2)计算: GA250 可溶性总糖(%,以转化糖计)=——-×——×——-×100…………(2) VW1000 式中:W——样品称重,g; G——10ml 费林试剂相当的转化糖,mg; V——准确滴定时所用待测液的体积,ml; A——稀释倍数; 250——定容体积,ml; 1000——由毫克换算为克. c.非还原糖(%)按式(3)计算: 非还原糖(%,以蔗糖计)=(可溶性总糖-还原糖)×0.95……………(3) 式中:0.95—由转化糖换算成蔗糖的因数. 8.2 结果表示 测定结果计算到小数点后二位,两次平行试验结果相对相差;含量在 5%以下的不得超过 3%;含量在5%～10%的不得超过2%;含量在10%以上的不得超过1%.鲜样以鲜基表示,风干样以 风干基表示
注：还累糖及可溶性总糖也可用葡萄糖表示，费林试剂需另用葡萄糖标定，幸还源糖 用转化糖换算成密糖形式表示 附录A 提取剂的选择 (补充件) A1本标准法是用水作提取剂.在测定可溶性总糖时，莲糖雷进行水解，但一些含菊 糖和可溶性淀粉较多的果揽样品。当用水作提取剂时，这部分物质也会被提取出来，对该 类样品要用8%乙醇作提取剂将多糖分离除去.具体操作步盛如下， A2取成熟度适中，有代表性的水果，蔬菜适量，选净，用不锈解刀将可食部分切成适当 小块，充分混匀后按四分法取样.称取100g鲜样加入等重量的95乙醇成入组织捣碎机中鸡 成1：1匀浆，称取匀浆25.0或50.0g(相当于样品12.5g或250g)政入150▣1烧杯中.含有机 酸较多的样品加Q5-2.0g粉状Ca0g调至中性.继线加入93A乙醇使其最后浓度 约达80%，用80%乙醇将样液全部转入250ml容量惠中，并调整体积的为200■l.置80士 2℃水落保盟30▣m,其何摇动数次，取出冷却至室温后，用80%乙醇定客.取一定量(100一 201)乙醇浸出液放入蒸发Ⅲ中，在65-75℃水浴上蒸去乙醇，加少量水使沉淀物状化 分散，加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各2一5l,然后转入250■l容量瓶，用水洗涤隔发国 一并洗入容量瓶中，定容，过滤持测 附如说明： 本标准由中华人民共和国农牧淮业部提出， 本标准由黑龙江省农业科学院综合化验室负责起草 本标准主要起草人李霞辉，赵铁男 国家标准局1986-01-18发布1986-08-01实随
注:还原糖及可溶性总糖也可用葡萄糖表示,费林试剂需另用葡萄糖标定,非还原糖 用转化糖换算成蔗糖形式表示. 附录 A 提取剂的选择 (补充件) A.1 本标准法是用水作提取剂.在测定可溶性总糖时,蔗糖需进行水解.但一些含菊 糖和可溶性淀粉较多的果蔬样品,当用水作提取剂时,这部分物质也会被提取出来,对该 类样品要用 80%乙醇作提取剂将多糖分离除去.具体操作步骤如下. A.2 取成熟度适中,有代表性的水果,蔬菜适量,洗净,用不锈钢刀将可食部分切成适当 小块,充分混匀后按四分法取样.称取 100g 鲜样加入等重量的 95%乙醇放入组织捣碎机中捣 成 1:1 匀浆,称取匀浆 25.0 或 50.0g(相当于样品 12.5g 或 25.0g)放入 150ml 烧杯中.含有机 酸较多的样品加 0.5～2.0g 粉状 CaCO3 调至中性.继续加入 95%乙醇使其最后浓度 约达 80%,用 80%乙醇将样液全部转入 250ml 容量瓶中,并调整体积约为 200ml.置 80± 2℃水浴保温 30min,其间摇动数次,取出冷却至室温后,用 80%乙醇定容.取一定量(100～ 250ml)乙醇浸出液放入蒸发皿中,在 65～75℃水浴上蒸去乙醇,加少量水使沉淀物软化 分散,加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各 2～5ml,然后转入 250ml 容量瓶,用水洗涤蒸发皿 一并洗入容量瓶中,定容,过滤待测. 附加说明: 本标准由中华人民共和国农牧渔业部提出. 本标准由黑龙江省农业科学院综合化验室负责起草. 本标准主要起草人李霞辉,赵铁男. 国家标准局 1986-01-18 发布 1986-08-01 实施