GB/T8314-2002 前 言 本标常是对GB/T83141987《茶游离氨基酸总测定3的籍订， 本标准修订主要是按阻GB/T1.1一193（标准化工作导则第1单元：标座的起草与表述规侧 第】都分：标准编号的基本规定的要棠，对GB/T314一1987在格式和文字上作了一些修改，具体技 术内容没有度动。 本标准自实克之目起，同时代皆GB/于8314一1987. 本标准由中华全国供销合作总社暑出。 本标准由中华全国债销合作总社杭洲茶叶研究院归日， 本怀准起草单位：中华全国供销合作总社枕州茶叶研究院 本标准主要起草人：周卫龙，孙安华，钟萝。 本标准山中华全国供销合作总社航州禁叶纤究院负贵解师， 12
GB/T 8314-2002 前 言 本标准是对 GB/T 8314 -1987《茶 游离氨基酸总量测定》的修订。 本标准修订主要是按照 GB/T 1. 1-1993《标准化工作导则 第 1单元:标准的起草与表述规则 第 1部分:标准编写的基本规定》的要求，对 GB/T 8314-1987在格式和文字上作了一些修改，具体技 术内容没有变动。 本标准自实施之日起，同时代替GB/T 8314-19870 本标准由中华全国供销合作总社提出。 本标准由中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院归口。 本标准起草单位:中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院。 本标准主要起草人:周卫龙、孙安华、钟萝。 本标准由中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院负责解释
中华人民共和国国家标准 GB/T8314-2002 茶游离氨基酸总量测定 代醉G6/T83141987 Tea--Determination of free amino acids content 1范围 本标准规定了对茶叶中游离氨基酸总量测定的原理，仪器和用具，试剂和溶液，操作方法及结果计 算方法。 本标准述用干茶叶中游离氢基酸总量的测定， 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文，本标准出饭时，所示版木均 为有效。所有林雀都会酸修打，使用本标座的各方应程讨使用下列标在最新散本的可能性。 GB/T8302一2002茶取样 GB/T8303一2002茶增碎试样的制备及其干物质含量测定 GB/T8312一2002茶海非碱测定 GB/T8313一2002茶条多附测定 3定文 本标在采用下列定义， 着离氨基酸free amino acids 茶叶水程出物中星舒离状态存在的具有▣-氨基的有机酸.。 4原理 a氯基酸在山80的条件下与而三刚共热，形成紫色培合物，用分光光度法在特定的被长下测定 其含量. 5仅遇和用具 案验室常规仅薛及下列各璞： 51分析天平：盛量0.001g: 52分光光度仪。 6试剂和溶在 所用试剂应为分析纯(AR),水为瀛赠水。 6.1H8.0南酸盐援冲液：按GB/T8313一2002中6,2的规定，配制1/15ol/八.璃酸氢二钠《6.2.1) 和1/15mol/L燥酸二氢牌(6.22)溶液.然后取1/15m0l/L.的裤酸氯二钠溶液95mL和1/15mc/L 函酸二家钾常液5ml:混匀。 中华人民共和国国家质量监誓检验检度总局2002-06-17找准 2002-12-01宾克 151
中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 茶 游离氨基酸总量测定 GB/f 8314-2002 Tea一 Determination of free amino acids content 代 替 GB/T 8314 1987 1 范围 本标准规定了对茶叶中游离氨基酸总量测定的原理、仪器和用具、试剂和溶液、操作方法及结果计 算方法 本标准适用于茶叶中游离氨基酸总量的测定 。 2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订 ，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T 8302-2002 茶 取样 GB/T 8303-2002 茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定 GB/T 8312-2002 茶 咖啡碱测定 GB/T 8313-2002 茶 茶多酚测定 3 定 义 本标准采用下列定义。 游离氨基酸 free amino acids 茶叶水浸出物中呈游离状态存在的具有 。一氨基的有机酸。 4 原理 a-氨基酸在 pH8.。的条件下与ip三酮共热，形成紫色络合物，用分光光度法在特定的波长下测定 其含量。 5 仪器 和用具 实验室常规仪器及下列各项 ;.; 分析天平 感量。. 001 g o 分光光度仪。 6 试剂和溶液 所用试剂应为分析纯(AR)，水为蒸馏水。 6门 pH8. 0磷酸盐缓冲液:按 GB/T 8313---2002中 6. 2的规定，配制 1/15 mol/I磷酸氢二钠(6.2.1) 和 1/15 mol/I磷酸二氢钾(6.2.2)溶液。然后取 1/15 mol/I_的磷酸氢二钠溶液 95 ml_和 1/15 mol/I 磷酸二氢钾溶液 5 ml，混匀。 中华人民共和国国家质f监督检验检疫总局 2002-06-17批准 200?一12-01 T O
GB/T8314-2002 6.22%饰三闲溶液：称取水合节三酮（袍度不低于9%）2g,加50mL,水和80g氯化亚锡(SC。· 2H)搅拌均匀。分次加少量水溶解，放在暗处，静置一维夜，过这后加水定容系100mL, 63茶氨酸波谷氢酸标准线：称取10∞mg茶氟酸或谷氢酸（纯度不低于99%）常于100mL水中，作为 母被。准物吸取5l.每液，能水定容至50mL作为工作液(1ml含茶氨酸或谷氨酸0.】mg), 7操作方法 7.1取样 按GB/T8302的规定. 7,2试样制备 按照GB/T8303的规定. 7.3测定步我 7.31试液的制备 传GB/T8312-2002中11.1的规定. 7.32测定 准喻吸取试减(7.31)1mL,连人25m1,的容量瓶中，如以.5ml.H8.0裤酸盐缓神液(6.1)和 0.5ml.2%审三酬溶液(62》，在沸水泽中如热15min,待冷却后加水定容至25mL.教置10min后， 用5mm比色杯，在5？0nm处，以试刹空白溶藏作参比，测定吸光度(A》. 7,33氨基腋标准由线的制作 分别吸斯00,1.0.1.5.2.0、2.5,3,0mL氯基酸工作域(6.3)于一组25mL容量瓶中.各如水 4mL.,p日&0南酸盐缓神液(610.5mL和2%市三解溶液(620.5mL,在满水浴中加热15m,冷 却后加水定客至5m1,按7.3.2的樱作测定吸光度(A),将测得的吸光度与对废的兼氢酸域谷氢能浓 度绘制标准曲线。 8结黑计弹 8.1计算方法 茶叶中静离氢某酸含量以干态质量分数表示，按式(1)计算， C 商氨林酸总量（以茶氢酸或谷复酸计(%）一100之五×10 M×m tn行(】) 式中：，一试液总量，mL L:一一测定用试液量，ml: M。一试样量深： C一根素？.32网定的吸光度从标准曲线上查得的茶虹酸成容氢酸的毫克数： 州一试样十物质含量，⅓ 如果符合重复性(8.2)的要求，侧数两次测定的算术平均值作为结果，结果保国小数点后一位。 8.2重复性 问一样品的两次湖定值之差，每100？试样不得超过0,1易 154
GB/' r 8314-2002 6.2 2%茹三酮溶液:称取水合茹二酮(纯度不低于9900)2 g，加 50 mL水和 80 mg氯化亚锡(SnCl· 2H,0)搅拌均匀。分次加少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至 100 ml- 64. 34. 茶氨酸或谷氨酸标准液:称取 100 mg茶氨酸或谷氨酸(纯度不低于 99 )溶于 100 mL水中，作为 准确吸取 5 ml母液，加水定容至50 mL作为工作液(1 ml含茶氨酸或谷氨酸 。1 m妇 了 操作方 法 7.1 取样 按 G1到T 8302的规定 7.2 试样制备 按照 GB/I 8303的规定。 7. 3 测定步骤 7.11 试液的制备 按GB/T 8312-2002中 11.1的规定。 7.3.2 测定 准确吸取试液(7.3.1)1 mL，注人 25 m工的容量瓶中，加 。. 5 m工pH8. 0磷酸盐缓冲液(6.1)和 0. 5 ml, 2环茹三酮溶液(6.2)，在沸水浴中加热 15 min。待冷却后加水定容至 25 mL。放置 10 min后， 用5 mm比色杯，在 570 nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A), 7.13 氨基酸标准曲线的制作 分别吸取 。.0, 1. 0, 1. 5, 2. 0, 2. 5, 3. 0 mL氨基酸工作液(6.3)于一组 25 mL容量瓶 中，各加水 4 ml,,pH 8.0磷酸盐缓冲液(6.1)0.5 ml和2%苟三酮溶液(6.2)0.5 ml,，在沸水浴中加热 15 min，冷 却后加水定容至 25 ml，按 7. 3. 2的操作测定吸光度(A)。将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓 度绘制标准曲线 8 结果计算 8.1 式 中 计算方法 茶叶中游离氨基酸含量以干态质量分数表示，按式(1)计算 几 一几 游离氨基酸总量(以茶氨酸或谷氨酸计)(%)= :L,— 试液总量,m1_, L 一 测定用试液量,mL; M -— 试样量 ，川 M} X m 火 100 ······。。。(1) 一一根据 7. 3. 2测定的吸光度从标准曲线上查得的茶氨酸或谷氨酸的毫克数 一一试样十物质含量，%。 C 胡 如果符合重复性(8.2)的要求，则取两次测定的算术平均值作为结果，结果保留小数点后一位。 8.2 重复性 同一样品的两次测定值之差，每 100 g试样不得超过。1 go