第八章体液蛋白质检验 Molecular model of human albumin UMUHUHI- hydrophobic clefts 人类白蛋白分子
1 第八章 体液蛋白质检验 人类白蛋白分子
■本章内容概要： 第一节概述 第二节体液蛋白质测定
2 ◼本章内容概要： 第二节 体液蛋白质测定 第一节 概述
■本章教学要求： 1、掌握血浆蛋白质的组成、功能及分类；个别血浆蛋白质（前 白蛋白、白蛋白)的来源和生理功能；血清总蛋白和白蛋白的 测定方法和原理。 2、熟悉急性时相反应蛋白的概念和种类；血清球蛋白和纤维蛋 白原的测定方法 3、了解其他蛋白质的来源和生理功能；尿液蛋白和脑脊液蛋白 的检测。 3
3 1、掌握血浆蛋白质的组成、功能及分类；个别血浆蛋白质（前 白蛋白、白蛋白）的来源和生理功能；血清总蛋白和白蛋白的 测定方法和原理。 2、熟悉急性时相反应蛋白的概念和种类；血清球蛋白和纤维蛋 白原的测定方法 3、了解其他蛋白质的来源和生理功能；尿液蛋白和脑脊液蛋白 的检测 。 ◼本章教学要求：
第一节概述 含量：人体固体成分的45% 机体主要的 ▣机体蛋白质： 生物大分子 种类：10万，3000-5000种/单细胞 功能：生长，代谢、血凝、运动、免 疫、信息传递等 口体液蛋白质的检测： 细胞内液 疾病发生 细胞外 体液的分布 体液蛋白质异常
4 第一节 概 述 机体蛋白质： 体液蛋白质的检测： 机体主要的 生物大分子 含量：人体固体成分的45% 种类：10万，3000~5000种/单细胞 功能：生长，代谢、血凝、运动、免 疫、信息传递等 疾病发生 体液蛋白质异常
要判断异常二> 首先要清楚正常的血浆蛋白质组成，功能及分类及特点 血浆蛋白质的组成、功能及分类 种类：1000种→500种→200种 ■组成： 含量：μgmgg 慢隋蛋白 来源：肝脏是蛋白质主要的加工厂 甘曲三周 网醇脂 5
5 要判断异常 首先要清楚正常的血浆蛋白质组成，功能及分类及特点 一、血浆蛋白质的组成、功能及分类 ◼组成： 种类：1000种 500种 200种 含量：μg mg g 来源：肝脏是蛋白质主要的加工厂
■功能： ①营养作用，修补组织蛋白； ②维持血浆胶体渗透压：白蛋白维持75%~80%的血浆渗透压； ③作为PH缓冲系统的一部分：酸性或碱性蛋白质： ④作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体； ⑤体液免疫防御系统：作为免疫球蛋白与补体等免疫分子； ⑥催化作用：酶的本质： ⑦代谢调控作用；作为底物，酶或中间产物抑制或激活组织蛋白酶： ⑧参与凝血与纤维蛋白溶解；：除V因子外均可 6
6 ◼功能： ①营养作用，修补组织蛋白; ②维持血浆胶体渗透压：白蛋白维持75%~80%的血浆渗透压； ③作为PH缓冲系统的一部分：酸性或碱性蛋白质； ④作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体； ⑤体液免疫防御系统：作为免疫球蛋白与补体等免疫分子； ⑥催化作用：酶的本质； ⑦代谢调控作用；作为底物，酶或中间产物抑制或激活组织蛋白酶； ⑧参与凝血与纤维蛋白溶解；：除Ⅳ因子外均可
■分类：依据来源、分离方法和生理功能 肝生成：绝大多数血浆蛋白质 >来源 其他组织细胞生成： 兔疫球蛋白和蛋白类激素
7 ◼分类：依据来源、分离方法和生理功能 ➢来源 肝生成：绝大多数血浆蛋白质 其他组织细胞生成：免疫球蛋白和蛋白类激素
盐析法：白蛋白球蛋白(pH7.0半饱和的硫酸铵溶液) >分离方法 醋酸纤维素薄膜电泳：6种 琼脂糖凝胶电泳：13种 电泳法： 聚丙烯酰胺凝胶电泳：30种 分辨率增 SDS聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳：300种 ,■纤维蒋 纤维蛋白原 8
8 ➢分离方法 盐析法：白蛋白/球蛋白（pH7.0半饱和的硫酸铵溶液） 电泳法： 醋酸纤维素薄膜电泳：6种 琼脂糖凝胶电泳：13种 聚丙烯酰胺凝胶电泳：30种 SDS聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳：300种 分 辨 率 增 高 - - - + 纤维蛋白原 醋酸纤维素薄膜
即时可用的蛋白质电泳标准 Pre-stained protein standards Unstained protein standards for Protein Standard IEF marker for pl for easy and clear band identification accurate molecular weight estimation for Western Blots determination of protein 85RD 司188kDa 188 kDa kDa 190 kDa 200 kDa 220 kDa 83 220 8.d 8 98 w120 7.8 62 器 7.4 2 w60 5.4 -70 0 3 69 3引 0 28 1917 治 21.5 40 74 14.4 250 w15 6 15 4.5 ~10 4.2 3.5 MultiMark" SeeBlue" SeeBlue" BenchMark Mark 12 BenchMark" MagicMark"XP* IEF Marker 3-10 Plus2 Pre-Stained NuPACE NUPAGE NuPAGE 420%5D5 NuPACE 4-12% 420%SDS-PACE NuPACE'Bis-Tris Novex明310 412%B6海 412%-T的 4i2%B6T的 PAGE Gel Bis-Tris Gel w/MES Cel,stained with Cel/Nitrocelulose 匠Cd Gel w/MES Cel w/MES Gel w/MES stined with Coomassie'R2划 membrane,detected SDS Buffer SDS Bufter SDS Bufier CoomassieR-250 with WesterBreeze Fr MagicMark"XP Standard.please request the Western Protein Standardscard 1600 Faraday Avenue Carisbad,CA 92008 P:7606037200 F:7606026500 Toll free:8009556288 www.invitrogen.com 73-0331000724035w 9
9 即时可用的蛋白质电泳标准
>功能分类： 表3-1血浆蛋白质的功能分类 功能分类 功能特征 运输载体类 运载、营养等 血浆脂蛋白：包括CM、VLDL、LDL、HDL等 运输胆固醇、甘油三酯、磷脂及脂肪酸 前清蛋白与清蛋白 运输游离脂肪酸、某些激素、胆红素、多种药物等 甲状腺素结合球蛋白 特异高亲和力结合甲状腺激素 皮质素结合球蛋白 特异高亲和力结合皮质醇 类固醇激素结合球蛋白 特异高亲和力结合类固醇激素 视黄醛结合蛋白 结合视黄醛 转铁蛋白 运输铁 结合珠蛋白 结合血红蛋白 血色素结合蛋白 结合血红素 细齿蛋白 结合铜 (,、B因子、D因子、备解素等 凝血蛋白类 血液凝固作用 除M因子(C2·)外的13种凝血蛋白 免疫球蛋白 排除外来抗原 包括IgG、A,M、D,E 蛋白酶抑制物 抑制蛋白酶作用 包括a-抗胰蛋白酶、a抗摩蛋白酶、巨球蛋白 等6种以上 血清酶类 血浆固有酶如LCAT等 在血浆中具有重要的调节代谢作用 组织细胞少量释放的细胞内酶 在血浆中无生理作用 由于细胞破裂而进人血循环的细胞内酶 在血浆中无生理作用 10 蛋白类激素 胰岛素、胰高血糖素、生长激素等 多种代谢调节作用
10 ➢功能分类: