1 实训一 葡萄糖的杂质检查 一、 实训目的 1、掌握葡萄糖中杂质的检查方法。 2、熟悉供试品溶液与对照品溶液制备、检查、比色等操作方法。 3、了解称量、平行操作、干燥等操作要点。 二、 实训原理 葡萄糖分子中具有醛基，还原碱性酒石酸铜生成红色氧化亚铜沉淀。 本品除了检查氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等到一般杂质外，还需检查溶 液的澄清度与颜色（目的是检查水不溶性物质或有色杂质）、乙醇溶液的澄清度（检查 醇不溶性杂质如糊精、蛋白质等）、亚硫酸盐与可溶性淀粉（因为制备时使用的酸可能 带有亚硫酸盐，而可溶性淀粉是中间体引入）。 三、 实训操作 1、干燥失重 取本品 1~2g，置与供试品同样条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中，使供试品平铺于 瓶底，厚度不超过 5mm，加盖，精密称定，将称量瓶放入洁净的培养皿中，瓶盖半开 或置瓶旁，放入 105℃干燥箱中干燥。取出后迅速盖好瓶盖，置干燥器放冷至室温，迅 速精密称重，再于 105℃干燥箱中至恒重，即得，减失重量不得过 9.5%。 2、性状 本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒粉末，无臭，味甜，在水中易溶，乙醇中微溶。 取本品约 10g，精密称定，置 100ml 量瓶中，加水适量与氨试液 0.2ml，溶解后，用 水稀释至刻度，摇匀，放置 10min，在 25℃时测定比旋度，应为 52.5~53.0°。 3、酸度 取本品 2.0g，加新沸过的冷蒸馏水 20ml，溶解后，加酚酞指示液 3 滴 NaOH 滴定液 0.2ml，应显粉红色。 4、乙醇溶液的澄清度 取本品 1.0g 加 90%乙醇 30ml，置水浴中加热回流约 10min，溶液应澄清。 5、亚硫酸盐与可溶性淀粉 取本品 1.0g，加水 10ml 溶解后，加碘试液 1 滴，应即显黄色。 6、蛋白质 取本品 1.0g 加水溶解后，加磺基水杨酸溶液（1→5）3ml，不得发生沉淀。 7、氯化物 取本品 0.3g，置于 25ml 纳氏比色管，加水溶解使成约 13ml，再加稀硝酸 5ml，加 水使成约 20ml 摇匀，即得供试溶液。另取标准氯化钠溶液（10ug/ml）3.0ml，置 25ml 纳管中，加稀硝酸 5ml，加水使成约 20ml，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶 液中，分别加入硝酸银试液 0.5ml，用水稀释至 25ml，摇匀，在暗处放置 5min，同置黑 色背景下，从比色管上方向下观察、比浊，供试液不得比对照液更浓。（0.010%）
1 实训一 葡萄糖的杂质检查 一、 实训目的 1、掌握葡萄糖中杂质的检查方法。 2、熟悉供试品溶液与对照品溶液制备、检查、比色等操作方法。 3、了解称量、平行操作、干燥等操作要点。 二、 实训原理 葡萄糖分子中具有醛基，还原碱性酒石酸铜生成红色氧化亚铜沉淀。 本品除了检查氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等到一般杂质外，还需检查溶 液的澄清度与颜色（目的是检查水不溶性物质或有色杂质）、乙醇溶液的澄清度（检查 醇不溶性杂质如糊精、蛋白质等）、亚硫酸盐与可溶性淀粉（因为制备时使用的酸可能 带有亚硫酸盐，而可溶性淀粉是中间体引入）。 三、 实训操作 1、干燥失重 取本品 1~2g，置与供试品同样条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中，使供试品平铺于 瓶底，厚度不超过 5mm，加盖，精密称定，将称量瓶放入洁净的培养皿中，瓶盖半开 或置瓶旁，放入 105℃干燥箱中干燥。取出后迅速盖好瓶盖，置干燥器放冷至室温，迅 速精密称重，再于 105℃干燥箱中至恒重，即得，减失重量不得过 9.5%。 2、性状 本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒粉末，无臭，味甜，在水中易溶，乙醇中微溶。 取本品约 10g，精密称定，置 100ml 量瓶中，加水适量与氨试液 0.2ml，溶解后，用 水稀释至刻度，摇匀，放置 10min，在 25℃时测定比旋度，应为 52.5~53.0°。 3、酸度 取本品 2.0g，加新沸过的冷蒸馏水 20ml，溶解后，加酚酞指示液 3 滴 NaOH 滴定液 0.2ml，应显粉红色。 4、乙醇溶液的澄清度 取本品 1.0g 加 90%乙醇 30ml，置水浴中加热回流约 10min，溶液应澄清。 5、亚硫酸盐与可溶性淀粉 取本品 1.0g，加水 10ml 溶解后，加碘试液 1 滴，应即显黄色。 6、蛋白质 取本品 1.0g 加水溶解后，加磺基水杨酸溶液（1→5）3ml，不得发生沉淀。 7、氯化物 取本品 0.3g，置于 25ml 纳氏比色管，加水溶解使成约 13ml，再加稀硝酸 5ml，加 水使成约 20ml 摇匀，即得供试溶液。另取标准氯化钠溶液（10ug/ml）3.0ml，置 25ml 纳管中，加稀硝酸 5ml，加水使成约 20ml，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶 液中，分别加入硝酸银试液 0.5ml，用水稀释至 25ml，摇匀，在暗处放置 5min，同置黑 色背景下，从比色管上方向下观察、比浊，供试液不得比对照液更浓。（0.010%）
2 8、硫酸盐 取本品 2.0g ，加水溶解使成约 40ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性；溶液 如不澄清，滤过），置 50ml 纳氏比色管中，加稀盐酸 2ml，摇匀，即得供试品溶液。另 取标准硫酸钾溶液（每 1ml 相当于 100µg 的 SO4 2－）2.0ml，置 50ml 纳氏比色管中，加 水使成约 40ml，加稀盐酸 2ml，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中，分别 加入 25%氯化钡溶液 5ml，用稀释使成 50ml，充分摇匀。放置 10min，同置黑色背景上， 从比色管上方向下观察，比较，供试液如发生浑浊，与对照液比较不得更浓。（0.010%）。 9、炽灼残渣 取本品 1g ，置已炽灼至恒重的瓷坩锅中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷， 加硫酸 0.5－1ml 使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在 700－800℃炽灼到恒重。残 渣重不得 0.1%。 10、铁盐 取本品 2.0g ，于 50ml 烧杯中，加水 20ml 溶解后，加硝酸 3 滴，缓缓煮沸 5min， 放冷，移入 50ml 比色管中，用水洗涤烧杯，洗液并入比色管中，加水稀释使成 45ml， 加硫氰酸铵溶液（30→100）3ml，摇匀。如显色，与标准铁溶液（每 1ml 相当于 10μgFe）， 2.0ml 用同一方法制成的对照液比较，不得 更深（0.010%）。 11、重金属 取 4%硫代乙酰胺水溶液 1.0ml，临用前加入 5.0ml 混合液（由氢氧化钠液 1mol/L， 15ml，加水 5ml 及甘油 20ml 组成，）在沸水浴加热 20s，冷却。此液即为硫代乙酰胺试 液，配好后应立即使用。取 25ml 纳氏比色管 2 支，甲管中加标准铅溶液（每 1ml 相当 于 10μg Pb），与醋酸盐缓冲液（pH3.5）各 2ml 后，加水稀释成 25ml。乙管中加本品 4.0g，水 23ml，振摇溶解，加醋酸盐缓冲液 2ml，摇匀。甲乙两管分别加入硫代乙酰胺 试液各 2ml，摇匀，放置 2min，两管同置白纸上，自上面透视。乙管显出的颜色与甲管 比较不得更深，含重金属不得过百万分之五。 12、砷盐 取本品 2.0 置 A 瓶中，加水 5ml 溶解后，加稀硫酸 5ml 与溴化钾－溴试液 0.5ml。 置水浴上加热约 20min，使保持稍过量的溴存在，必要时，再补加溴化钾－溴试液适量， 并随时补充蒸散的水分。放冷，加盐酸 5ml 与水量使成 28ml，加碘化钾 液 5ml 与酸性 氯化亚锡试液 5 滴。在室温放置 10min 后，加锌粒 2g，立即将装有醋酸铅棉花及溴化汞 试纸的导气管 C 密塞于 A 瓶上，并将 A 瓶置 25－40 ℃的水浴中。45min 后，取出溴化 汞试纸，将生成的砷斑与用标准砷溶液每 1ml 相当于 1μgAs）2ml 按同样方法制成的标 准砷斑比较，颜色不得更深，含砷量不得过百万分之一。（注：醋酸铅棉花要装得疏松， 不可塞紧）。 四、说明 1、正文中规定的“澄清”，系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未 0.5 超过号 浊度标准液，有关浊度标准液和比色液的配制见《中国药典》
2 8、硫酸盐 取本品 2.0g ，加水溶解使成约 40ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性；溶液 如不澄清，滤过），置 50ml 纳氏比色管中，加稀盐酸 2ml，摇匀，即得供试品溶液。另 取标准硫酸钾溶液（每 1ml 相当于 100µg 的 SO4 2－）2.0ml，置 50ml 纳氏比色管中，加 水使成约 40ml，加稀盐酸 2ml，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中，分别 加入 25%氯化钡溶液 5ml，用稀释使成 50ml，充分摇匀。放置 10min，同置黑色背景上， 从比色管上方向下观察，比较，供试液如发生浑浊，与对照液比较不得更浓。（0.010%）。 9、炽灼残渣 取本品 1g ，置已炽灼至恒重的瓷坩锅中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷， 加硫酸 0.5－1ml 使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在 700－800℃炽灼到恒重。残 渣重不得 0.1%。 10、铁盐 取本品 2.0g ，于 50ml 烧杯中，加水 20ml 溶解后，加硝酸 3 滴，缓缓煮沸 5min， 放冷，移入 50ml 比色管中，用水洗涤烧杯，洗液并入比色管中，加水稀释使成 45ml， 加硫氰酸铵溶液（30→100）3ml，摇匀。如显色，与标准铁溶液（每 1ml 相当于 10μgFe）， 2.0ml 用同一方法制成的对照液比较，不得 更深（0.010%）。 11、重金属 取 4%硫代乙酰胺水溶液 1.0ml，临用前加入 5.0ml 混合液（由氢氧化钠液 1mol/L， 15ml，加水 5ml 及甘油 20ml 组成，）在沸水浴加热 20s，冷却。此液即为硫代乙酰胺试 液，配好后应立即使用。取 25ml 纳氏比色管 2 支，甲管中加标准铅溶液（每 1ml 相当 于 10μg Pb），与醋酸盐缓冲液（pH3.5）各 2ml 后，加水稀释成 25ml。乙管中加本品 4.0g，水 23ml，振摇溶解，加醋酸盐缓冲液 2ml，摇匀。甲乙两管分别加入硫代乙酰胺 试液各 2ml，摇匀，放置 2min，两管同置白纸上，自上面透视。乙管显出的颜色与甲管 比较不得更深，含重金属不得过百万分之五。 12、砷盐 取本品 2.0 置 A 瓶中，加水 5ml 溶解后，加稀硫酸 5ml 与溴化钾－溴试液 0.5ml。 置水浴上加热约 20min，使保持稍过量的溴存在，必要时，再补加溴化钾－溴试液适量， 并随时补充蒸散的水分。放冷，加盐酸 5ml 与水量使成 28ml，加碘化钾 液 5ml 与酸性 氯化亚锡试液 5 滴。在室温放置 10min 后，加锌粒 2g，立即将装有醋酸铅棉花及溴化汞 试纸的导气管 C 密塞于 A 瓶上，并将 A 瓶置 25－40 ℃的水浴中。45min 后，取出溴化 汞试纸，将生成的砷斑与用标准砷溶液每 1ml 相当于 1μgAs）2ml 按同样方法制成的标 准砷斑比较，颜色不得更深，含砷量不得过百万分之一。（注：醋酸铅棉花要装得疏松， 不可塞紧）。 四、说明 1、正文中规定的“澄清”，系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未 0.5 超过号 浊度标准液，有关浊度标准液和比色液的配制见《中国药典》
3 2、测定氯化物用滤纸过滤时，滤纸中如含有氯化物，可预先用含有硝酸的水溶液洗净 后再用。 3、乙醇溶液的澄清度是控制不溶于乙醇的淀粉和糊精的限量。 4、亚硫酸盐与可溶性淀粉项，如存在亚硫酸盐时碘试液褪色，存在可溶性淀粉时溶液 呈蓝色。 5、砷盐检查项中，加溴化钾－溴试液系进行有机破坏。砷在分子中可能以有机状态结 合，不转化为无机砷，则在检查中不能放出砷化氢气体，加入的氯化亚锡与金属锌作用， 在锌粒表面形成锌锡原电池，起到极化作用，从而使氢气均匀而连续发生，同时氯化亚 锡还将反应中产生 I2还原为 I －。 5、试液配制 酚酞指示液：取酚酞 1g，加乙醇 100ml 使溶解，即得。 溴化钾－溴试液：取溴 30g 与溴化钾 30g，加水使成 100ml。 碘化钾试液：取碘化钾 16.5g，加水使溶解成 100ml，即得。本液应临用新配。 酸性氯化亚锡试液：取氯化亚锡 20g，加盐酸使溶解成 50ml，滤过，即得，本液配 成后 3 个月内适用。 五、思考题 1、检查亚硫酸盐与可溶性淀粉，如果显蓝色，为什么？ 2、为什么一般检查方法要遵循平行操作原则？
3 2、测定氯化物用滤纸过滤时，滤纸中如含有氯化物，可预先用含有硝酸的水溶液洗净 后再用。 3、乙醇溶液的澄清度是控制不溶于乙醇的淀粉和糊精的限量。 4、亚硫酸盐与可溶性淀粉项，如存在亚硫酸盐时碘试液褪色，存在可溶性淀粉时溶液 呈蓝色。 5、砷盐检查项中，加溴化钾－溴试液系进行有机破坏。砷在分子中可能以有机状态结 合，不转化为无机砷，则在检查中不能放出砷化氢气体，加入的氯化亚锡与金属锌作用， 在锌粒表面形成锌锡原电池，起到极化作用，从而使氢气均匀而连续发生，同时氯化亚 锡还将反应中产生 I2还原为 I －。 5、试液配制 酚酞指示液：取酚酞 1g，加乙醇 100ml 使溶解，即得。 溴化钾－溴试液：取溴 30g 与溴化钾 30g，加水使成 100ml。 碘化钾试液：取碘化钾 16.5g，加水使溶解成 100ml，即得。本液应临用新配。 酸性氯化亚锡试液：取氯化亚锡 20g，加盐酸使溶解成 50ml，滤过，即得，本液配 成后 3 个月内适用。 五、思考题 1、检查亚硫酸盐与可溶性淀粉，如果显蓝色，为什么？ 2、为什么一般检查方法要遵循平行操作原则？