《食品理化分析技术》实验指导书 （试行） 韩 明 广州城市职业学院生物与环境工程系 2006.9
《食品理化分析技术》实验指导书 （试行） 韩 明 广州城市职业学院生物与环境工程系 2006.9
目 录 模块一 基本实验技能 . 1 实验一 器皿洗涤与缓冲 溶液配制.1 实验二 溶液浓度的标定1 模块二 单元技能实验 . 1 实验一 食品的比重测定1 实验二 食品中水分的测 定.3 实验三 食品中灰分的测 定.5 实验四 牛乳酸度的测定5 实验五 蛋白质含量的测 定.7 实验六 氨基酸总量(氨态 氮)的测定 .10 实验七 饮料中还原糖的 测定.12 实验八 食品中脂肪的测 定.14 实验九 水果中维生素c的 测定.16 实验十 食品中铅的测定 .19 实验十一 食物中钙的测 定.22 实验十二 食物中磷的测 定.26 实验十三 食品中铜元素 的测定.29 实验十四 酱油中山梨酸、 苯甲酸的测定.31 实验十五 肉制品中亚硝 酸盐的测定.33 实验十六 食品中着色剂 的测定.35 实验十七 蘑菇罐头中漂 白剂的测定.38 实验十八 气相色谱法测 定午餐肉中的有机氯农药 .41 模块三 综合实验 . 42 实验一糕点产品的理化检 验.42 实验二 果冻产品的理化 检验.44 实验三 碳酸饮料产品的 理化检验.45
目 录 模块一 基本实验技能 . 1 实验一 器皿洗涤与缓冲 溶液配制.1 实验二 溶液浓度的标定1 模块二 单元技能实验 . 1 实验一 食品的比重测定1 实验二 食品中水分的测 定.3 实验三 食品中灰分的测 定.5 实验四 牛乳酸度的测定5 实验五 蛋白质含量的测 定.7 实验六 氨基酸总量(氨态 氮)的测定 .10 实验七 饮料中还原糖的 测定.12 实验八 食品中脂肪的测 定.14 实验九 水果中维生素c的 测定.16 实验十 食品中铅的测定 .19 实验十一 食物中钙的测 定.22 实验十二 食物中磷的测 定.26 实验十三 食品中铜元素 的测定.29 实验十四 酱油中山梨酸、 苯甲酸的测定.31 实验十五 肉制品中亚硝 酸盐的测定.33 实验十六 食品中着色剂 的测定.35 实验十七 蘑菇罐头中漂 白剂的测定.38 实验十八 气相色谱法测 定午餐肉中的有机氯农药 .41 模块三 综合实验 . 42 实验一糕点产品的理化检 验.42 实验二 果冻产品的理化 检验.44 实验三 碳酸饮料产品的 理化检验.45
实验四 蜜饯产品的理化 检验.46 实验五 酱菜类产品的理 化检验.52
实验四 蜜饯产品的理化 检验.46 实验五 酱菜类产品的理 化检验.52
模块一 基本实验技能 实验一 器皿洗涤与缓冲溶液配制 一、 常用洗涤液的配制和使用方法 1. 重铬酸钾—浓硫酸溶液(100g/L)(洗液)：称取化学纯重铬酸钾 100g 于烧杯中，加入 100mL 水，微加热，使其溶解。把烧杯放于水盆中冷却后，慢慢加入化学纯硫酸，边加边 用玻璃棒搅动，防止硫酸溅出，开始有沉淀析出，硫酸加到一定量沉淀可溶解，加硫酸至溶 液总体积为 1000mL。 该洗液是强氧化剂，但氧化作用比较慢，直接接触器皿数分钟至数小时才有作用，取出后要 用自来水充分冲洗 7～10 次，最后用纯水淋洗 3 次。 2. 肥皂洗涤液、碱洗涤液、合成洗涤剂洗涤液：配制一定浓度，主要用于油脂和有机物的 洗涤。 3. 氢氧化钾—乙醇洗涤液(100g/L)：取 100g 氢氧化钾，用 50mL 水溶解后，加工业乙醇 至 1L，它适用洗涤油垢、树脂等。 4. 酸性草酸或酸性羟胺洗涤液：称取 10g 草酸或 1g 盐酸羟胺，溶于 10mL 盐酸(1+4)中； 该洗液洗涤氧化性物质。对沾污在器皿上的氧化剂，酸性草酸作用较慢，羟胺作用快且易洗 净。 5. 硝酸洗涤液：常用浓度(1+9)或(1+4)，主要用于浸泡清洗测定金属离子的器皿。一般浸 泡过夜，取出用自来水冲洗，再用去离子水或双蒸水冲洗。 洗涤后玻璃仪器应防止二次污染。 二、 玻璃器皿的清洗、干燥与保存 (一) 洗涤仪器的一般步骤 1. 用水刷洗：使用用于各种形状仪器的毛刷，如试管刷、瓶刷、滴定管刷等。首 先用毛刷蘸水刷洗仪器，用水冲去可溶性物质及刷去表面粘附灰尘。 2. 用合成洗涤水刷洗：市售的餐具洗涤灵是以非离子表面活性剂为主要成分的中 性洗液，可配制成 1—2%的水溶液，也可用 5%的洗衣粉水溶液，刷洗仪器，它们都有较强 的去污能力，必要时可温热或短时间浸泡。 洗涤的仪器倒置时，水流出后，器壁应不挂小水珠。至此再用少许纯水冲仪器三次，洗 去自来水带来的杂质，即可使用。 (二) 砂芯玻璃滤器的洗涤 1、新的滤器使用前应以热的盐酸或铬酸洗液边抽滤边清洗，再用蒸馏水洗净。 2、针对不同的沉淀物采用适当的洗涤剂先溶解沉淀，或反复用水抽洗沉淀物，再用蒸馏水 冲洗干净，在 110℃烘箱中烘干，然后保存在无尘的柜内或有盖的容器内。若不然积存的灰 尘和沉淀堵塞滤孔很难洗净。表 2 列出一些洗涤砂芯滤板的洗涤液可供选用。 (三) 特殊要求的洗涤方法 在用一般方法洗涤后用蒸汽洗涤是很有效的。有的实验要求用蒸汽洗涤，方法是烧瓶安 装一个蒸汽导管，将要洗的容器倒置在上面用水蒸汽吹洗。 某些测量痕量金属的分析对仪器要求很高，要求洗去 ug 级的杂质离子，洗净的仪器还 要浸泡至 1:1 盐酸或 1:1 硝酸中数小时至 24h，以免吸附无机离子，然后用纯水冲洗干净。 有的仪器需要在几百摄氏度温度下烧净，以达到痕量分析的要求。 (四) 玻璃仪器的干燥 坐失验经常要用到的仪器应在每次实验完毕之后洗净干燥备用。用于不同实验的仪器对 干燥有不同的要求，一般定量分析中的烧杯、锥形瓶等仪器洗净即可使用，而用于有机化学 实验或有机分析的仪器很多是要求干燥的，有的要求无水迹，有的要求无水。应根据不同要 求来干燥仪器。 1、晾干 不急用的，要求一般干燥，可在纯水涮洗后，在无尘处倒置晾干水分，然后自然 干燥。可用安有斜木钉的架子和带有透气孔的玻璃柜放置仪器。 2、烘干 洗净的仪器控去水分，放在电烘箱中烘干，烘箱温度为 105—120℃烘 1h 左右。 也可放在红外灯干燥箱中烘干。此法适用于一般仪器。称量用的称量瓶等烘干后要放在干燥
模块一 基本实验技能 实验一 器皿洗涤与缓冲溶液配制 一、 常用洗涤液的配制和使用方法 1. 重铬酸钾—浓硫酸溶液(100g/L)(洗液)：称取化学纯重铬酸钾 100g 于烧杯中，加入 100mL 水，微加热，使其溶解。把烧杯放于水盆中冷却后，慢慢加入化学纯硫酸，边加边 用玻璃棒搅动，防止硫酸溅出，开始有沉淀析出，硫酸加到一定量沉淀可溶解，加硫酸至溶 液总体积为 1000mL。 该洗液是强氧化剂，但氧化作用比较慢，直接接触器皿数分钟至数小时才有作用，取出后要 用自来水充分冲洗 7～10 次，最后用纯水淋洗 3 次。 2. 肥皂洗涤液、碱洗涤液、合成洗涤剂洗涤液：配制一定浓度，主要用于油脂和有机物的 洗涤。 3. 氢氧化钾—乙醇洗涤液(100g/L)：取 100g 氢氧化钾，用 50mL 水溶解后，加工业乙醇 至 1L，它适用洗涤油垢、树脂等。 4. 酸性草酸或酸性羟胺洗涤液：称取 10g 草酸或 1g 盐酸羟胺，溶于 10mL 盐酸(1+4)中； 该洗液洗涤氧化性物质。对沾污在器皿上的氧化剂，酸性草酸作用较慢，羟胺作用快且易洗 净。 5. 硝酸洗涤液：常用浓度(1+9)或(1+4)，主要用于浸泡清洗测定金属离子的器皿。一般浸 泡过夜，取出用自来水冲洗，再用去离子水或双蒸水冲洗。 洗涤后玻璃仪器应防止二次污染。 二、 玻璃器皿的清洗、干燥与保存 (一) 洗涤仪器的一般步骤 1. 用水刷洗：使用用于各种形状仪器的毛刷，如试管刷、瓶刷、滴定管刷等。首 先用毛刷蘸水刷洗仪器，用水冲去可溶性物质及刷去表面粘附灰尘。 2. 用合成洗涤水刷洗：市售的餐具洗涤灵是以非离子表面活性剂为主要成分的中 性洗液，可配制成 1—2%的水溶液，也可用 5%的洗衣粉水溶液，刷洗仪器，它们都有较强 的去污能力，必要时可温热或短时间浸泡。 洗涤的仪器倒置时，水流出后，器壁应不挂小水珠。至此再用少许纯水冲仪器三次，洗 去自来水带来的杂质，即可使用。 (二) 砂芯玻璃滤器的洗涤 1、新的滤器使用前应以热的盐酸或铬酸洗液边抽滤边清洗，再用蒸馏水洗净。 2、针对不同的沉淀物采用适当的洗涤剂先溶解沉淀，或反复用水抽洗沉淀物，再用蒸馏水 冲洗干净，在 110℃烘箱中烘干，然后保存在无尘的柜内或有盖的容器内。若不然积存的灰 尘和沉淀堵塞滤孔很难洗净。表 2 列出一些洗涤砂芯滤板的洗涤液可供选用。 (三) 特殊要求的洗涤方法 在用一般方法洗涤后用蒸汽洗涤是很有效的。有的实验要求用蒸汽洗涤，方法是烧瓶安 装一个蒸汽导管，将要洗的容器倒置在上面用水蒸汽吹洗。 某些测量痕量金属的分析对仪器要求很高，要求洗去 ug 级的杂质离子，洗净的仪器还 要浸泡至 1:1 盐酸或 1:1 硝酸中数小时至 24h，以免吸附无机离子，然后用纯水冲洗干净。 有的仪器需要在几百摄氏度温度下烧净，以达到痕量分析的要求。 (四) 玻璃仪器的干燥 坐失验经常要用到的仪器应在每次实验完毕之后洗净干燥备用。用于不同实验的仪器对 干燥有不同的要求，一般定量分析中的烧杯、锥形瓶等仪器洗净即可使用，而用于有机化学 实验或有机分析的仪器很多是要求干燥的，有的要求无水迹，有的要求无水。应根据不同要 求来干燥仪器。 1、晾干 不急用的，要求一般干燥，可在纯水涮洗后，在无尘处倒置晾干水分，然后自然 干燥。可用安有斜木钉的架子和带有透气孔的玻璃柜放置仪器。 2、烘干 洗净的仪器控去水分，放在电烘箱中烘干，烘箱温度为 105—120℃烘 1h 左右。 也可放在红外灯干燥箱中烘干。此法适用于一般仪器。称量用的称量瓶等烘干后要放在干燥
器中冷却和保存。带实心玻璃塞的及厚壁仪器烘干时要注意慢慢升温并且温度不可过高，以 免烘裂，量器不可放于烘箱中烘。 硬质试管可用酒精灯烘干，要从底部烘起，把试管口向下，以免水珠倒流把试管炸裂，烘到 无水珠时，把试管口向上赶净水汽。 3、热（冷）风吹干 对于急于干燥的仪器或不适合放入烘箱的较大的仪器可用吹干的办法， 通常用少量乙醇、丙酮（或最后再用乙醚）倒入已控去水分的仪器中摇洗控净溶剂（溶剂要 回收），然后用电吹风吹，开始用冷风吹 1—2min，当大部分溶剂挥发后吹入热风至完全干 燥，再用冷风吹残余的蒸汽，使其不再冷凝在容器内。此法要求通风好，防止中毒，不可接 触明火，以防有机溶剂爆炸。 (五) 玻璃仪器的保管 在贮藏室内玻璃仪器要分门别类地存放，以便取用。经常使用的玻璃仪器放在实验柜内，要 放置稳妥，高的、大的放在里面，以下提出一些仪器的保管办法。 1． 移液管 洗净后置于防尘的盒中。 2． 滴定管 用后，洗去内装的溶液，洗净后装满纯水，上盖玻璃短试管或塑料套管，也可 倒置夹于滴定管架上。 3． 比色皿 用毕洗净后，在瓷盘或塑料盘中下垫滤纸，倒置晾干后装入比色皿盒或清洁的 器皿中。 4． 带磨口塞的仪器 容量瓶或比色管最好在洗净前就用橡皮筋或小线绳把塞和管口栓好， 以免打破塞子或互相弄混。需长期保存的磨口仪器要在塞间垫一张纸片，以免日久粘住。长 期不用的滴定管要除掉凡士林后垫纸，用皮筋栓好活塞保存。 5． 成套仪器 如索氏萃取器，气体分析器等用完要立即洗净，放在专门的纸盒里保存。 总之要本着对工作负责的精神，对所用的一切玻璃仪器用完后要清洗干净，按要求保管， 要养成良好的工作习惯，不要在仪器里遗留油脂、酸液、腐蚀性物质（包括浓碱液）或有毒 药品，以免造成后患。 三、 常用缓冲溶液的配制 1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L） X 毫升 0.2 mol/L 甘氨酸+Y 毫升 0.2 mol/L HCI，再加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 2.0 2.4 2.6 2.8 50 50 50 50 44.0 32.4 24.2 16.8 3.0 3.2 3.4 3.6 50 50 50 50 11.4 8.2 6.4 5.0 甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L 甘氨酸溶液含 15.01 克/升。 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L） X 毫升 0.2 mol/L 邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到 20 毫升 pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 5 5 5 5 5 4.070 3.960 3.295 2.642 2.022 3.2 3.4 3.6 3.8 5 5 5 5 1.470 0.990 0.597 0.263 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L 邻苯二甲酸氢溶液含 40.85 克/升 3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升）
器中冷却和保存。带实心玻璃塞的及厚壁仪器烘干时要注意慢慢升温并且温度不可过高，以 免烘裂，量器不可放于烘箱中烘。 硬质试管可用酒精灯烘干，要从底部烘起，把试管口向下，以免水珠倒流把试管炸裂，烘到 无水珠时，把试管口向上赶净水汽。 3、热（冷）风吹干 对于急于干燥的仪器或不适合放入烘箱的较大的仪器可用吹干的办法， 通常用少量乙醇、丙酮（或最后再用乙醚）倒入已控去水分的仪器中摇洗控净溶剂（溶剂要 回收），然后用电吹风吹，开始用冷风吹 1—2min，当大部分溶剂挥发后吹入热风至完全干 燥，再用冷风吹残余的蒸汽，使其不再冷凝在容器内。此法要求通风好，防止中毒，不可接 触明火，以防有机溶剂爆炸。 (五) 玻璃仪器的保管 在贮藏室内玻璃仪器要分门别类地存放，以便取用。经常使用的玻璃仪器放在实验柜内，要 放置稳妥，高的、大的放在里面，以下提出一些仪器的保管办法。 1． 移液管 洗净后置于防尘的盒中。 2． 滴定管 用后，洗去内装的溶液，洗净后装满纯水，上盖玻璃短试管或塑料套管，也可 倒置夹于滴定管架上。 3． 比色皿 用毕洗净后，在瓷盘或塑料盘中下垫滤纸，倒置晾干后装入比色皿盒或清洁的 器皿中。 4． 带磨口塞的仪器 容量瓶或比色管最好在洗净前就用橡皮筋或小线绳把塞和管口栓好， 以免打破塞子或互相弄混。需长期保存的磨口仪器要在塞间垫一张纸片，以免日久粘住。长 期不用的滴定管要除掉凡士林后垫纸，用皮筋栓好活塞保存。 5． 成套仪器 如索氏萃取器，气体分析器等用完要立即洗净，放在专门的纸盒里保存。 总之要本着对工作负责的精神，对所用的一切玻璃仪器用完后要清洗干净，按要求保管， 要养成良好的工作习惯，不要在仪器里遗留油脂、酸液、腐蚀性物质（包括浓碱液）或有毒 药品，以免造成后患。 三、 常用缓冲溶液的配制 1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L） X 毫升 0.2 mol/L 甘氨酸+Y 毫升 0.2 mol/L HCI，再加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 2.0 2.4 2.6 2.8 50 50 50 50 44.0 32.4 24.2 16.8 3.0 3.2 3.4 3.6 50 50 50 50 11.4 8.2 6.4 5.0 甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L 甘氨酸溶液含 15.01 克/升。 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L） X 毫升 0.2 mol/L 邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到 20 毫升 pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 5 5 5 5 5 4.070 3.960 3.295 2.642 2.022 3.2 3.4 3.6 3.8 5 5 5 5 1.470 0.990 0.597 0.263 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L 邻苯二甲酸氢溶液含 40.85 克/升 3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升）
2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 19.15 19.45 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55 Na2HPO4 分子量 = 14.98，0.2 mol/L 溶 液为 28.40 克/升。 Na2HPO4-2H2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液含 35.01 克/升。 C4H2O7·H2O 分子量 = 210.14 ，0.1 mol/L 溶液为 21.01 克/升。 4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH 钠离子浓度 （mol/L） 柠檬酸（克） C6H8O7·H2O 氢氧化钠 (克) NaOH 97% 盐酸（毫升） HCl（浓） 最终体积 （升）① 2.2 3.1 3.3 4.3 5.3 5.8 6.5 0.20 0.20 0.20 0.20 0.35 0.45 0.38 210 210 210 210 245 285 266 84 83 83 83 144 186 156 160 116 106 45 68 105 126 10 10 10 10 10 10 10 使用时可以每升中加入 1 克克酚，若最后 pH 值有变化，再用少量 50% 氢氧化钠溶液或浓 盐酸调节，冰箱保存。 5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L） pH 0.1 mol/L 柠檬酸 （毫升） 0.1 mol/L 柠檬酸钠 （毫升） pH 0.1 mol/L 柠檬酸 （毫升） 0.1 mol/L 柠檬酸钠 （毫升） 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 18.6 17.2 16.0 14.9 14.0 13.1 1.4 2.8 4.0 5.1 6.0 6.9 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 8.2 7.3 6.4 5.5 4.7 3.8 11.8 12.7 13.6 14.5 15.3 16.2
2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 19.15 19.45 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55 Na2HPO4 分子量 = 14.98，0.2 mol/L 溶 液为 28.40 克/升。 Na2HPO4-2H2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液含 35.01 克/升。 C4H2O7·H2O 分子量 = 210.14 ，0.1 mol/L 溶液为 21.01 克/升。 4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH 钠离子浓度 （mol/L） 柠檬酸（克） C6H8O7·H2O 氢氧化钠 (克) NaOH 97% 盐酸（毫升） HCl（浓） 最终体积 （升）① 2.2 3.1 3.3 4.3 5.3 5.8 6.5 0.20 0.20 0.20 0.20 0.35 0.45 0.38 210 210 210 210 245 285 266 84 83 83 83 144 186 156 160 116 106 45 68 105 126 10 10 10 10 10 10 10 使用时可以每升中加入 1 克克酚，若最后 pH 值有变化，再用少量 50% 氢氧化钠溶液或浓 盐酸调节，冰箱保存。 5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L） pH 0.1 mol/L 柠檬酸 （毫升） 0.1 mol/L 柠檬酸钠 （毫升） pH 0.1 mol/L 柠檬酸 （毫升） 0.1 mol/L 柠檬酸钠 （毫升） 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 18.6 17.2 16.0 14.9 14.0 13.1 1.4 2.8 4.0 5.1 6.0 6.9 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 8.2 7.3 6.4 5.5 4.7 3.8 11.8 12.7 13.6 14.5 15.3 16.2
4.2 4.4 4.6 4.8 12.3 11.4 10.3 9.2 7.7 8.6 9.7 10.8 6.2 6.4 6.6 2.8 2.0 1.4 17.2 18.0 18.6 柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L 溶液为 21.01 克/升。 柠檬酸钠 Na3 C6H5O7·2H2O：分子量 294.12， 0.1 mol/L 溶液为 29.41 克/毫升。 6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L） pH(18℃) 0.2 mol/L NaAc (毫升) 0.3 mol/L HAc (毫升) pH(18℃) 0.2 mol/L NaAc (毫升) 0.3 mol/L HAc (毫升) 2.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 0.75 1.20 1.80 2.65 3.70 4.90 9.25 8.80 8.20 7.35 6.30 5.10 4.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 5.90 7.00 7.90 8.60 9.10 9.40 4.10 3.00 2.10 1.40 0.90 0.60 Na2Ac·3H2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为 27.22 克/升。 7．磷酸盐缓冲液 （1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2） pH 0.2 mol/L Na2HPO4 (毫升) 0.3 mol/L NaH2PO4 (毫升) pH 0.2 mol/L Na2HPO4 (毫升) 0.3 mol/L NaH2PO4 (毫升) 5.8 5.9 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 6.9 8.0 10.0 12.3 15.0 18.5 22.5 26.5 31.5 37.5 43.5 49.5 55.0 92.0 90.0 87.7 85.0 81.5 77.5 73.5 68.5 62.5 56.5 51.0 45.0 7.0 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0 61.0 67.0 72.0 77.0 81.0 84.0 87.0 89.5 91.5 93.0 94.7 39.0 33.0 28.0 23.0 19.0 16.0 13.0 10.5 8.5 7.0 5.3 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液为 85.61 克/升。 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为 71.64 克/升。 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为 31.21 克/升。 （2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L） pH mol/L/15Na2HP O4 (毫升) mol/L//15KH2P O4 (毫升) pH mol/L//15Na2HP O4 (毫升) mol/L//15KH2P O4 (毫升) 4.9 0.10 9.90 7.1 7.00 3.00
4.2 4.4 4.6 4.8 12.3 11.4 10.3 9.2 7.7 8.6 9.7 10.8 6.2 6.4 6.6 2.8 2.0 1.4 17.2 18.0 18.6 柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L 溶液为 21.01 克/升。 柠檬酸钠 Na3 C6H5O7·2H2O：分子量 294.12， 0.1 mol/L 溶液为 29.41 克/毫升。 6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L） pH(18℃) 0.2 mol/L NaAc (毫升) 0.3 mol/L HAc (毫升) pH(18℃) 0.2 mol/L NaAc (毫升) 0.3 mol/L HAc (毫升) 2.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 0.75 1.20 1.80 2.65 3.70 4.90 9.25 8.80 8.20 7.35 6.30 5.10 4.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 5.90 7.00 7.90 8.60 9.10 9.40 4.10 3.00 2.10 1.40 0.90 0.60 Na2Ac·3H2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为 27.22 克/升。 7．磷酸盐缓冲液 （1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2） pH 0.2 mol/L Na2HPO4 (毫升) 0.3 mol/L NaH2PO4 (毫升) pH 0.2 mol/L Na2HPO4 (毫升) 0.3 mol/L NaH2PO4 (毫升) 5.8 5.9 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 6.9 8.0 10.0 12.3 15.0 18.5 22.5 26.5 31.5 37.5 43.5 49.5 55.0 92.0 90.0 87.7 85.0 81.5 77.5 73.5 68.5 62.5 56.5 51.0 45.0 7.0 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0 61.0 67.0 72.0 77.0 81.0 84.0 87.0 89.5 91.5 93.0 94.7 39.0 33.0 28.0 23.0 19.0 16.0 13.0 10.5 8.5 7.0 5.3 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液为 85.61 克/升。 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为 71.64 克/升。 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为 31.21 克/升。 （2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L） pH mol/L/15Na2HP O4 (毫升) mol/L//15KH2P O4 (毫升) pH mol/L//15Na2HP O4 (毫升) mol/L//15KH2P O4 (毫升) 4.9 0.10 9.90 7.1 7.00 3.00
2 5.2 9 5.9 1 6.2 4 6.4 7 6.6 4 6.8 1 6.9 8 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 9.50 9.00 8.00 7.00 6.00 5.00 4.00 7 7.3 8 7.7 3 8.0 4 8.3 4 8.6 7 8.1 8 8.00 9.00 9.50 9.75 9.90 10.00 2.00 1.00 0.50 0.25 0.10 0 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 178.05，1/15M 溶 液为 11.876 克/升。 KH2PO4 分子量 = 136.09，1/15M 溶液为 9.078 克/升。 8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M） X 毫升 0.2M K2PO4 + Y 毫升 0.2N NaOH 加水稀释至 29 毫升 pH(20℃) X (毫升) Y（毫升） pH(20℃) X (毫升) Y（毫升） 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 5 5 5 5 5 5 0.372 0.570 0.860 1.260 1.780 2.365 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 5 5 5 5 5 5 2.963 3.500 3.950 4.280 4.520 4.680 9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃） pH 0.04M 巴比妥 钠溶液 0.2V 盐酸 pH 0.04M 巴比 妥钠溶液(毫 升) 0.2N 盐酸(毫 升) 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 8.2 100 100 100 100 100 100 100 100 18.4 17.8 16.7 15.3 13.4 11.47 9.39 7.21 8.4 8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 9.6 100 100 100 100 100 100 100 100 5.21 3.82 2.52 1.65 1.13 0.70 0.35 巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M 溶液为 8.25 克/升 10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃） 50 毫升 0.1M 三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与 X 毫升 0.1N 盐酸混匀后，加水稀释至 100
2 5.2 9 5.9 1 6.2 4 6.4 7 6.6 4 6.8 1 6.9 8 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 9.50 9.00 8.00 7.00 6.00 5.00 4.00 7 7.3 8 7.7 3 8.0 4 8.3 4 8.6 7 8.1 8 8.00 9.00 9.50 9.75 9.90 10.00 2.00 1.00 0.50 0.25 0.10 0 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 178.05，1/15M 溶 液为 11.876 克/升。 KH2PO4 分子量 = 136.09，1/15M 溶液为 9.078 克/升。 8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M） X 毫升 0.2M K2PO4 + Y 毫升 0.2N NaOH 加水稀释至 29 毫升 pH(20℃) X (毫升) Y（毫升） pH(20℃) X (毫升) Y（毫升） 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 5 5 5 5 5 5 0.372 0.570 0.860 1.260 1.780 2.365 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 5 5 5 5 5 5 2.963 3.500 3.950 4.280 4.520 4.680 9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃） pH 0.04M 巴比妥 钠溶液 0.2V 盐酸 pH 0.04M 巴比 妥钠溶液(毫 升) 0.2N 盐酸(毫 升) 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 8.2 100 100 100 100 100 100 100 100 18.4 17.8 16.7 15.3 13.4 11.47 9.39 7.21 8.4 8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 9.6 100 100 100 100 100 100 100 100 5.21 3.82 2.52 1.65 1.13 0.70 0.35 巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M 溶液为 8.25 克/升 10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃） 50 毫升 0.1M 三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与 X 毫升 0.1N 盐酸混匀后，加水稀释至 100
毫升。 pH X(毫升) pH X(毫升) 7.10 7.20 7.30 7.40 7.50 7.60 7.70 7.80 7.90 8.00 45.7 44.7 43.4 42.0 40.3 38.5 36.6 34.5 32.0 29.2 8.10 8.20 8.30 8.40 8.50 8.60 8.70 8.80 8.90 26.2 22.9 19.9 17.2 14.7 12.4 10.3 8.5 7.0 三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2 CH2OH CHOCH2 NH2 分子量=121.14; 0.1M 溶液为 12.114 克/升。Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M 硼酸根） pH 0.05M 硼砂 （毫升） 0.2M 硼砂 （毫升） pH 0.05M 硼砂 （毫升） 0.2M 硼酸 （毫升） 7.4 7.6 7.8 8.0 1.0 1.5 2.0 3.0 9.0 8.5 8.0 7.0 8.2 8.4 8.7 9.0 3.5 4.5 6.0 8.0 6.5 5.5 4.0 2.0 硼砂 Na2B4O7·H2O,分子量=381.43;0.05M 溶液 （=0.2M 硼酸根）含 19.07 克/升。 硼酸 H2BO3,分子量=61.84,0.2M 溶液为 12.37 克 /升。 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 11．硼酸-硼砂缓冲液（0.2M 硼酸根） pH 0.05M 硼砂 （毫升） 0.2M 硼酸 （毫升） pH 0.05M 硼砂 （毫升） 0.2M 硼酸 （毫升） 7.4 7.6 7.8 8.0 1.0 1.5 2.0 3.0 9.0 8.5 8.0 7.0 8.2 8.4 8.7 9.0 3.5 4.5 6.0 8.0 6.5 5.5 4.0 2.0 硼砂 Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M 溶 液（=0.2M 硼酸根）含 19.07 克/升。 硼酸 H2BO3，分子量=61.84, 0.2M 溶液为 12.37 克/升。 硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M） X 毫升 0.2M 甘氨酸+Y 毫升 0.2NnaOH 加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 8.6 50 4.0 9.6 50 22.4
毫升。 pH X(毫升) pH X(毫升) 7.10 7.20 7.30 7.40 7.50 7.60 7.70 7.80 7.90 8.00 45.7 44.7 43.4 42.0 40.3 38.5 36.6 34.5 32.0 29.2 8.10 8.20 8.30 8.40 8.50 8.60 8.70 8.80 8.90 26.2 22.9 19.9 17.2 14.7 12.4 10.3 8.5 7.0 三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2 CH2OH CHOCH2 NH2 分子量=121.14; 0.1M 溶液为 12.114 克/升。Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M 硼酸根） pH 0.05M 硼砂 （毫升） 0.2M 硼砂 （毫升） pH 0.05M 硼砂 （毫升） 0.2M 硼酸 （毫升） 7.4 7.6 7.8 8.0 1.0 1.5 2.0 3.0 9.0 8.5 8.0 7.0 8.2 8.4 8.7 9.0 3.5 4.5 6.0 8.0 6.5 5.5 4.0 2.0 硼砂 Na2B4O7·H2O,分子量=381.43;0.05M 溶液 （=0.2M 硼酸根）含 19.07 克/升。 硼酸 H2BO3,分子量=61.84,0.2M 溶液为 12.37 克 /升。 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 11．硼酸-硼砂缓冲液（0.2M 硼酸根） pH 0.05M 硼砂 （毫升） 0.2M 硼酸 （毫升） pH 0.05M 硼砂 （毫升） 0.2M 硼酸 （毫升） 7.4 7.6 7.8 8.0 1.0 1.5 2.0 3.0 9.0 8.5 8.0 7.0 8.2 8.4 8.7 9.0 3.5 4.5 6.0 8.0 6.5 5.5 4.0 2.0 硼砂 Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M 溶 液（=0.2M 硼酸根）含 19.07 克/升。 硼酸 H2BO3，分子量=61.84, 0.2M 溶液为 12.37 克/升。 硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M） X 毫升 0.2M 甘氨酸+Y 毫升 0.2NnaOH 加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 8.6 50 4.0 9.6 50 22.4
8.8 9.0 9.2 9.4 50 50 50 50 6.0 8.8 12.0 16.8 9.8 10.0 10.4 10.6 50 50 50 50 27.2 32.0 38.6 45.5 甘氨酸分子量=75.07;0.2M 溶液含 15.01 克/升。 13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根） X 毫升 0.05M 硼砂+Y 毫升 0.2NNaOH 加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 9.3 9.4 9.6 50 50 50 6.0 11.0 23.0 9.8 10.0 10.1 50 50 50 34.0 43.0 46.0 硼砂 Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M 溶液为 19.07 克/升。 14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M） Ca2+、Mg2+存在时不得使用 pH 0.1MNa2CO3(毫升) 0.1MN2HCO3(毫升) 20℃ 37℃ 9.16 9.40 9.51 9.78 9.90 10.14 10.28 10.53 10.83 8.77 9.12 9.40 9.50 9.72 9.90 10.08 10.28 10.57 1 2 3 4 5 6 7 8 9 9 8 7 6 5 4 3 2 1 Na2CO2·10H2O 分子量=286.2;0.1M 溶液 为 28.62 克/升。 N2HCO3 分子量=84.0;0.1M 溶液为 8.40 克 /升。 15．“PBS”缓冲液 PH 7.6 7.4 7.2 7.0 H2O NaCl Na2HPO4 NaH2PO4 1000 8.5 2.2 0.1 1000 8.5 2.2 0.2 1000 8.5 2.2 0.3 100ml 8.5g 2.2g 0.4g
8.8 9.0 9.2 9.4 50 50 50 50 6.0 8.8 12.0 16.8 9.8 10.0 10.4 10.6 50 50 50 50 27.2 32.0 38.6 45.5 甘氨酸分子量=75.07;0.2M 溶液含 15.01 克/升。 13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根） X 毫升 0.05M 硼砂+Y 毫升 0.2NNaOH 加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 9.3 9.4 9.6 50 50 50 6.0 11.0 23.0 9.8 10.0 10.1 50 50 50 34.0 43.0 46.0 硼砂 Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M 溶液为 19.07 克/升。 14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M） Ca2+、Mg2+存在时不得使用 pH 0.1MNa2CO3(毫升) 0.1MN2HCO3(毫升) 20℃ 37℃ 9.16 9.40 9.51 9.78 9.90 10.14 10.28 10.53 10.83 8.77 9.12 9.40 9.50 9.72 9.90 10.08 10.28 10.57 1 2 3 4 5 6 7 8 9 9 8 7 6 5 4 3 2 1 Na2CO2·10H2O 分子量=286.2;0.1M 溶液 为 28.62 克/升。 N2HCO3 分子量=84.0;0.1M 溶液为 8.40 克 /升。 15．“PBS”缓冲液 PH 7.6 7.4 7.2 7.0 H2O NaCl Na2HPO4 NaH2PO4 1000 8.5 2.2 0.1 1000 8.5 2.2 0.2 1000 8.5 2.2 0.3 100ml 8.5g 2.2g 0.4g